大鼠马钱子碱中毒心肌细胞B-淋巴细胞／白血病2基因和半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶的表达

目的：研究马钱子碱中毒后不同时间段内心肌细胞B-淋巴细胞/白血病2基因（Bcl-2）和半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶（Caspase-3）表达的病理变化.方法：用20只Wistar大鼠为正常对照组,40只Wistar大鼠复制马钱子碱中毒模型,用免疫组织化学技术检测中毒后大鼠心肌细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白的表达,并用图像分析对检测结果进行分析.结果：大鼠在马钱子碱中毒低、中剂量后的1～7d不同时间段内,心肌细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白表达均高于正常对照组,差异有统计学意义.结论：Bcl-2和Caspase-3参与了马钱子碱中毒的病理生理过程.

B细胞淋巴瘤/白血病基因2在颅脑外伤后抗神经元凋亡作用

目的通过研究B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)高表达转基因小鼠和对照小鼠颅脑打击后神经元凋亡的差异,探寻Bcl-2抗凋亡及减轻颅脑损伤的作用。方法将构建的Bcl-2质粒转入C57BL/6J×CBA杂交小鼠的受精卵,培育得到携带Bcl-2的小鼠。Bcl-2转基因小鼠9只作为实验鼠,采用随机数字法分为实验1 d组、实验7 d组和实验14 d组,每组3只。同窝非转基因小鼠9只作为对照鼠,采用随机数字法分为对照1 d组、对照7 d组和对照14 d组,每组3只。采用液压打击法中侧方液压打击的方法,以中等打击力致小鼠中等颅脑外伤。余下3只同窝非转基因小鼠为假手术组,仅打开椎板,暴露硬脊膜,不予打击。分别于术后1、7、14 d处死小鼠,取脑组织切片行苏木精-伊红(H-E)染色,观察神经元变化;采用原位末端标记法(TUNEL)染色计数TUNEL标记的阳性细胞数即凋亡神经元,并计算TUNEL染色切片的积分光密度(IOD)值。结果经聚合酶链反应及Western印迹法检测证明所培育的转基因小鼠为Bcl-2高表达的小鼠。假手术组小鼠脑细胞未见明显变化。实验鼠和对照鼠的脑组织都有出血,结构被破坏,实验鼠的损伤肿胀及出现核固缩或解离的神经元数量少于对照鼠。假手术组小鼠的脑组织未见明显的凋亡神经元细胞。实验鼠和对照鼠的脑组织标本可见TUNEL染色阳性细胞,随时间的推移逐渐增多,在损伤后7 d达到高峰,然后稳定并逐渐减少。实验1 d组、实验7 d组、实验14 d组小鼠的每个光学显微镜高倍镜视野内的TUNEL阳性神经元数(P值分别为0.042、0.039、0.033)和TUNEL染色切片的IOD值(P值均为0.000)均分别显著少于对照1 d组、对照7 d组、对照14 d组。结论 Bcl-2蛋白是中枢神经系统内在的重要的抗凋亡因子,高表达Bcl-2能够抑制颅脑损伤后神经元的凋亡,从而减轻大脑的损害。

促凋亡基因HtrA2在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:研究促凋亡基因HtrA2在急性髓系白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:收集78例AML患者(初发组、完全缓解组和难治组)及同期就诊的25例对照组骨髓及外周血标本,提取总RNA,检测HtrA2基因的表达水平,分析不同组别、不同型别之间的HtrA2基因的表达水平。同期随访17例患者。结果:初诊组、完全缓解组和难治组的HtrA2的表达量存在较大的差异,最高值与最低值比值高达68.76,HtrA2水平在不同的患者存在较大差异,3组间差异有统计学意义(χ~2=35.13,P<0.05)。FAB各型别间HtrA2基因的相对表达量差异无统计学意义(F=0.004,P>0.05)。随诊患者治疗后其HtrA2基因表达明显高于治疗前(P>0.05)。HtrA2基因可以影响患者生存时间(Wald=4.979,P<0.05),而年龄和性别对患者生存状态的影响无统计学意义(Wald分别为2.426和0.883,P>0.05),随访期患者生存曲线分析显示患者的中位生存时间为34.50个月。结论:HtrA2基因的表达水平的检测有助于AML的诊断,治疗及预后评估。

B细胞淋巴瘤/白血病-2基因、CD10和细胞周期蛋白D1在B细胞性非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、CD10和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中的表达及临床意义。方法选择2017年6月至2019年8月新乡医学院第一附属医院收治的78例B-NHL患者(B-NHL组)和50例淋巴组织反应性增生患者(对照组)为研究对象。取B-NHL组患者肿瘤组织和对照组患者反应性增生淋巴组织,采用免疫组织化学染色法检测Bcl-2、CD10及cyclin D1表达,比较2组患者Bcl-2、CD10及cyclin D1表达情况;收集B-NHL患者临床病历资料,分析Bcl-2、CD10和cyclin D1水平与B-NHL临床病理特征的关系;对B-NHL患者随访1 a,统计患者病死情况,采用单因素分析和logistic回归分析影响预后的因素。结果 B-NHL组患者Bcl-2、CD10及cyclin D1阳性表达率分别为78.21%(61/78)、38.46%(30/78)、87.18%(68/78),对照组患者Bcl-2、CD10及cyclin D1阳性表达率分别为36.00%(18/50)、100.00%(50/50)、0.00%(0/50);B-NHL组患者Bcl-2、cyclin D1阳性表达率显著高于对照组(χ^(2)=22.971、92.992,P<0.01),CD10阳性表达率显著低于对照组(χ^(2)=49.231,P<0.01)。B-NHL患者的年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置、临床分期与Bcl-2、CD10及cyclin D1阳性表达无关(P>0.05);B-NHL患者的病理类型与CD10、cyclin D1阳性表达相关(P<0.05),与Bcl-2阳性表达无关(P>0.05)。B-NHL组患者病死20例(25.64%),生存58例(74.36%);肿瘤临床分期、病理类型、Bcl-2、CD10及cyclin D1表达与B-NHL患者病死相关(P<0.05),年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置与B-NHL患者病死无关(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、病理类型为弥漫大B细胞淋巴瘤、Bcl-2阳性表达、cyclin D1阳性表达及CD10阴性表达是影响B-NHL患者死亡的独立危险因素(P<0.01)。结论 Bcl-2、CD10及cyclin D1在B-NHL组织中异常表达,其可能参与了B-NHL的发生、发展;CD10、cyclin D1检测可鉴别诊断不同病理类型的B-NHL,且可作为评估B-NHL患者预后的参考指标。

细胞角蛋白19联合B细胞淋巴瘤/白血病-2基因mRNA检测诊断乳腺癌的临床研究

目的探讨联合检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B cell lymphoma/leukemia 2 gene,BCL-2)与细胞角蛋白19(Nuclear oncogene,ck19)基因表达水平在乳腺癌诊断中的应用。方法建立荧光定量聚合酶链反应(Fluorescence Quantita-tive-Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)法,并以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehydes-3-Phosphate Dehydrogenase,GAPDH)为内对照测定20名健康女性体检者(正常对照组)、35例良性乳腺疾病患者(良性乳腺疾病组)和89例乳腺癌患者(乳腺癌组)外周血中BCL-2和ck19的表达量。结果乳腺癌组患者BCL-2和ck19表达水平与GAPDH的比值显著高于正常对照组和良性乳腺疾病组(均P<0.05),而正常对照组与良性乳腺疾病组间BCL-2和ck19表达水平与GAPDH的比值差异无统计学意义(P>0.05)。3组GAPDH差异无统计学意义(P>0.05)。BCL-2与ck19联合检测的灵敏度高于单个基因的检测。结论FQ-PCR技术可以快速定量检测BCL-2和ck19 mRNA,两者联合检测可有效提高对乳腺癌诊断的灵敏度。

长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2对舌鳞癌细胞增殖和侵袭的调控作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)在舌鳞癌中的表达及其对癌细胞增殖和侵袭的影响。方法2018年5月至2019年7月收集在邯郸市第三医院进行手术治疗并经病理确诊的22例舌鳞癌组织及对应的癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中的表达情况。将体外培养的舌鳞癌细胞株CAL27细胞分为对照组(未转染)、空载体组(空载体)和DLEU2组(转染DLEU2),采用实时荧光定量PCR检测细胞中DLEU2表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭。结果与癌旁组织(1.00±0.00)相比,舌鳞癌组织中DLEU2表达水平(0.30±0.02)明显降低(P<0.05);3种舌鳞癌SCC-15(0.35±0.04)、SCC-4(0.48±0.04)和CAL-27(0.26±0.03)细胞中DLEU2的表达水平较人正常口腔黏膜HOK细胞(1.00±0.00)均明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DLEU2组细胞中DLEU2表达水平明显升高,且细胞增殖和侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论lncRNA DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中低表达,上调其表达可抑制舌鳞癌CAL-27细胞增殖和侵袭。

RNA结合蛋白HuR调控lncRNA DLEU2促进食管鳞癌细胞增殖、侵袭的机制

目的探讨RNA结合蛋白人抗原(Hu)R对食管鳞癌细胞增殖、侵袭的影响及其与长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因(DLEU)2的调控关系。方法收集食管鳞癌组织样本并在体外培养正常人食管鳞状上皮细胞Het-1A及食管鳞癌细胞系KYSE30、KYSE70、KYSE270,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测HuR mRNA与DLEU2表达水平。利用Lipofectamime2000试剂对KYSE30细胞进行转染,并随机分组为对照组、pcDNA组、pc-HuR组、sh-NC组、sh-HuR组、sh-HuR+si-NC组和sh-HuR+si-DLEU2组。CCK-8法检测各组KYSE30细胞活性;平板克隆形成实验检测各组KYSE30细胞增殖能力;荷瘤裸鼠实验观察体内肿瘤生长情况;Transwell小室检测各组KYSE30细胞侵袭能力;Western印迹检测各组KYSE30细胞中HuR蛋白表达水平;RNA免疫沉淀(RIP)实验分析HuR与DLEU2的结合关系。结果在食管鳞癌组织和细胞系中,HuR mRNA和蛋白表达及DLEU2水平均显著升高(P<0.05),其中KYSE30细胞系中HuR基因与DLEU2表达水平最高,故选择KYSE30细胞进行转染实验。转染pc-HuR的细胞中HuR蛋白表达明显上调,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均显著增加(P<0.05);转染sh-HuR的细胞中HuR蛋白表达明显下调,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均显著降低(P<0.05)。RIP实验和qRT-PCR检测发现HuR与DLEU2有相互作用关系。同时转染sh-HuR和si-DLEU2的细胞中DLEU2水平明显降低,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均比转染sh-HuR明显更低(P<0.05)。过表达HuR显著增加移植瘤体积和重量,抑制HuR明显减小移植瘤的体积和重量,而同时抑制HuR和DLEU2时移植瘤的体积和重量比单独抑制HuR时明显更小(P<0.05)。结论HuR通过与DLEU2结合,促进食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和移植瘤的体内生长。

急性白血病初诊及缓解后bcl-2表达水平的比较及临床意义

目的探讨急性白血病(AL)初诊及缓解后白血病基因2(bcl-2)表达水平及临床意义。方法回顾性分析2016年1月至2020年1月于本院确诊并接受治疗的91例AL患者的临床资料,分别在治疗前、缓解后抽取所有患者骨髓活检组织和骨髓液,检测bcl-2表达水平,并分析急性白血病骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平对患者预后的预测价值。结果联合化疗后,骨髓活检组织中bcl-2、骨髓细胞中bcl-2水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);将AL患者预后作为因变量,将骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平作为协变量,进行Logistics回归分析,得到回归方程Y=14.582-4.220X1-10.938X2,提示骨髓活检组织和骨髓细胞中低bcl-2表达水平是AL患者预后的保护因素(OR<1,P<0.05);将AL患者预后作为状态变量,骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平作为检验变量,绘制ROC曲线,骨髓活检组织中bcl-2表达水平单独预测的AUC为0.861,具有一定的预测价值;骨髓细胞中bcl-2表达水平单独预测AUC为0.854,具有一定的预测价值;骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平联合预测AL患者预后的AUC为0.944,具有较高的预测价值。结论 AL缓解后骨髓活检组织中bcl-2、骨髓细胞中bcl-2水平均低于治疗前,骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2水平表达与AL患者的预后水平密切相关,联合检测具有较高的临床价值,可为临床评估AL患者疾病恢复情况并实施有效的治疗方案提供参考依据,值得临床推广应用。

凋亡相关基因Bcl-2和细胞因子bFGF在豚鼠透镜诱导近视眼中的研究

目的:探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在透镜诱导豚鼠近视眼后极部巩膜细胞中的表达,以及二者对巩膜细胞凋亡的影响。方法:选健康4周龄豚鼠45只,随机分成3组,Ⅰ组(右眼配戴-20D)、Ⅱ组(右眼配戴-10D)Ⅲ组(不作任何干预)。实验前后用睫状肌麻痹下验光、A超动态观察豚鼠眼屈光度和眼轴长度,并取后极部巩膜组织,用电镜、终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导原位缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞术检测巩膜的凋亡细胞,应用免疫组织化学染色和蛋白印迹(Western-blot)法检测bFGF和bcl-2蛋白。结果:实验后诱导眼形成近视,且伴有眼轴延长。并在诱导眼巩膜细胞中检测到凋亡细胞,凋亡率高于对照组(P<0.05),透镜诱导的豚鼠近视眼后极部巩膜组织中bFGF和bcl-2的含量降低(P<0.05)。结论:bFGF与bcl-2在透镜诱导豚鼠近视眼后极部巩膜细胞中表达阳性,并可通过抑制细胞凋亡参与透镜诱导豚鼠近视的形成。

乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl鄄2和Bax表达的影响。方法将雄性昆明种小鼠随机分为4组,每组6只,分别给予10%,20%,30%的乙醇和生理盐水腹腔注射,每日1次,连续30d,通过心肌细胞的核固红鄄结晶紫和免疫组织化学染色,分析细胞凋亡及凋亡相关基因——B细胞淋巴瘤/白血病鄄2基因(B鄄celllymphoma/leukemia鄄2,Bcl鄄2)和Bcl相关蛋白(Bcl鄄associatedxprotein熏Bax)的表达。结果实验组部分心肌细胞核染色质凝集,染为蓝紫色;定量分析显示,实验组异常的心肌细胞核明显多于对照组(P<0.01)。实验组心肌细胞中Bcl鄄2的表达弱于对照组(P<0.01),且分布不均;而实验组心肌细胞中Bax的表达明显增强(P<0.01),可见棕色粗大颗粒。结论心肌细胞凋亡在乙醇对心肌影响的发生机制上发挥一定的作用;随着乙醇浓度的增加,心肌细胞的凋亡征象愈加明显;乙醇引起的心肌细胞凋亡与凋亡相关基因Bcl鄄2和Bax的异常表达有关。

细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞脂肪变性过程中的表达变化

目的观察细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞L02脂肪变性过程中的表达变化。方法以油酸和软脂酸(2∶1)混合液处理L02细胞0、5、10、20 h,建立人肝细胞脂肪变性模型。用油红O染色检测L02细胞内脂质含量;用荧光定量PCR技术检测L02细胞脂肪变性过程中CDK2、CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、c-Jun mRNA表达。结果随造模时间延长,L02细胞内橘红色脂滴聚集越来越多,至造模20 h,肝细胞染成橘红色。L02细胞内CDK2 mRNA相对表达量逐渐升高,造模5 h达最高(P均<0.05),随后逐渐下降;CDK4 mRNA相对表达量逐渐升高,造模10 h达最高(P均>0.05),随后逐渐下降,造模20 h最低(P均>0.05);不同时间点Cyclin D1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);Bcl-2 mRNA相对表达量随造模时间延长而升高,造模10 h达最高(P<0.05),随后降低;造模5、10、20 h的c-Jun mRNA相对表达量均较造模0 h高(P均<0.05),但无变化规律。结论人肝细胞L02脂肪变性过程中癌症相关基因CDK2、CDK4、Bcl-2、c-Jun表达先升高后降低,Cyclin D1表达变化不明显。

矢车菊色素对高龄糖尿病大鼠B细胞淋巴瘤基因2及Bcl-2相关X蛋白基因表达的影响

目的了解矢车菊色素对高龄2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki rats,GK大鼠)肾损害时B细胞淋巴瘤伯血病基因-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated X protem,Bax)基因表达的影响。方法 25周龄雄性GK大鼠24只随机分为矢车菊组和对照组,每组12只。矢车菊组饲喂含10%葡萄糖的矢车菊色素-3-葡萄糖苷溶液600 mg/L8周,对照组饲喂10%葡萄糖溶液8周。每周测量体重及空腹血糖,8周后处死。RT-qPCR检测大鼠左肾Bcl-2、Bax mRNA表达,同时检测左肾脏器指数、血清糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,GHbA1c)并观察右肾病理损害。结果矢车菊组肾Bcl-2 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。矢车菊组Bax基因与对照组比,mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。矢车菊组GK大鼠的体重、空腹血糖、血清GHbA1c和左肾脏器指数较对照组均降低(P<0.05)。与对照组比较,矢车菊组肾脏病理损害明显减轻。结论矢车菊色素可降低GK大鼠的体重、空腹血糖和血清GHbA1c水平,减轻糖尿病的肾损伤,可能与促进Bcl-2基因表达有关。

LncRNA DLEU2对宫颈癌细胞生物学行为、miR-21和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)对宫颈癌细胞生物学行为的影响,并基于miR-21和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨其作用机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、DLEU2干扰组、DLEU2干扰空载组、DLEU2过表达组、DLEU2过表达空载组。除对照组外,给予其他组细胞转染相应的质粒。转染24 h后,检测各组的细胞增殖活性、细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白表达水平、细胞周期及细胞周期相关因子的mRNA表达水平、细胞侵袭数量及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白表达水平、miR-21表达水平、Wnt/β-catenin的蛋白及mRNA表达水平。结果 (1)与对照组相比,DLEU2过表达组的细胞增殖活性降低、细胞凋亡率增加、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平下调、Bcl-2相关性蛋白X和Caspase-3蛋白表达水平上调(P<0.05)。(2)与对照组相比,DLEU2过表达组的G_(1)期和S期细胞比例降低、G_(2)期细胞比例升高、细胞周期相关因子的mRNA表达水平下调(P<0.05)。(3)与对照组相比,DLEU2过表达组的细胞侵袭数减少,神经型钙黏蛋白表达水平下调,上皮型钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05)。(4)与对照组相比,DLEU2过表达组的miR-21表达水平及Wnt3a、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平均下调。(5)DLEU2干扰组的上述指标变化均与DLEU2过表达组相反(P<0.05),而两个空载组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DLEU2可能通过调控miR-21及抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,从而影响宫颈癌细胞的存活、死亡、EMT和侵袭等生物学行为。

维奈托克治疗复发/难治急性髓系白血病的临床观察

目的观察维奈托克(venetoclax)联合低甲基化药物治疗复发/难治急性髓系白血病(AML)的疗效。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院北部院区血液科2020年1月—2021年8月收治的14例复发/难治AML患者的临床资料并进行随访。10例患者采用venetoclax联合阿扎胞苷治疗,另4例患者采用venetoclax联合地西他滨治疗。结果疗效达完全缓解(CR)或形态学CR而血小板计数未完全恢复(CRi)共5例,部分缓解(PR)3例,未缓解(NR)6例。所有患者治疗后出现不同程度的骨髓抑制,发生肺部感染6例。结论复发/难治AML患者预后差,venetoclax联合低甲基化药物治疗对部分患者效果显著,可达到CR,且耐受性较好。

p53及Bcl–2基因阳性表达与乳腺癌患者临床特征的关系研究

目的:探究p53及B淋巴细胞瘤/白血病–2(Bcl–2)基因阳性表达与乳腺癌患者临床特征的关系。方法:选择2019年8月至2021年7月丰城市人民医院收治的120例乳腺癌患者,所有患者均行p53及Bcl–2基因阳性表达的检测。分析乳腺癌患者中影响p53及Bcl–2基因阳性表达的因素,并对相关因素行logistic回归分析。结果:120例患者中,p53基因阳性表达85例,Bcl–2基因阳性表达35例。p53基因阳性表达的患者中,不同肿瘤分期系统(TNM)分期、组织分化程度及雌激素受体(ER)表达情况之间占比差异具有统计学意义(P<0.05);Bcl–2基因阳性表达的患者中,不同TNM分期及组织分化程度之间占比差异具有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析结果显示:TNM分期Ⅱ~Ⅲ期、肿瘤组织低、中分化、ER阳性是p53基因阳性表达的独立危险因素(P<0.05);TNM分期Ⅱ~Ⅲ期、肿瘤组织低、中分化是Bcl–2基因阳性表达的独立危险因素(P<0.05)。结论:p53阳性表达的变化提示乳腺癌患者预后不良,TNM分期、组织分化程度及ER性质等均可对p53阳性表达率的变化造成明显影响。而Bcl–2则反映患者预后状况,TNM分期及组织分化程度是影响Bcl–2基因阳性表达的独立危险因素,故对患者p53及Bcl–2基因阳性表达的测定能够更好的评估患者的病情及预后,为临床诊疗提供更加可靠的诊断依据。

Cag A阳性幽门螺杆菌对胃癌细胞lncRNA DLEU2表达及上皮间质转化的影响

目的探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达,并选择DLEU2表达最高的胃癌细胞进行后续实验。将Hp NCTC标准菌株26695或11637分别与正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞共培养0、3、9、12 h,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达。采用Western blotting法检测与NCTC 26695或11637共培养3、9、12 h正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞Cag A表达以及共培养3、9、12 h神经钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达。同时,分析与NCTC 26695或NCTC 11637共培养的胃癌细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达的关系。结果HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28细胞DLEU2相对表达量均高于GES1细胞(P均<0.05)。在胃癌细胞中,以HGC-27细胞DLEU2相对表达量最高。因此,选择胃癌细胞HGC-27进行后续实验。NCTC 11637感染3、9、12 h时GES1细胞DLEU2相对表达量均高于NCTC 11637感染0 h时(P均<0.05),NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞DLEU2相对表达量高于NCTC 11637感染0 h时(P<0.05)。NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞和GES1细胞Cag A、N-cadherin、Vimentin相对表达量均高于NCTC 26695感染12 h时相应细胞(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,NCTC 26695或11637感染的HGC-27细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达均呈正相关关系(P均<0.05)。结论Cag A阳性Hp能够引起胃癌细胞长链非编码RNA DLEU2异常表达,而DLEU2异常表达可促进胃癌细胞上皮间质转化。

新生大鼠缺血缺氧性脑损伤组织中HAX-1、Caspase-3、bcl-2表达变化及意义

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)组织中血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1(HAX-1)、Caspase-3、bcl-2的表达,并探讨其意义。方法 128只大鼠随机分为观察组和对照组各64只,观察组采用Rice法制备HIBD模型,对照组仅分离左侧颈总动脉不结扎。分别于造模后0、2、6、12、24、48、72 h断头取脑,采用Western blot法检测大脑皮层HAX-1、Caspase-3、bcl-2蛋白。结果与对照组同时点比较,观察组HAX-1于造模后6、12、18、48 h表达升高,Caspase-3于造模后6、12、18 h表达升高,bcl-2于造模后2、6、12 h表达升高,P均<0.05;观察组造模后12、18 h的HAX-1的表达水平均高于造模后6 h,P均<0.05。结论新生大鼠HIBD模型大脑皮层中存在HAX-1、Caspase-3、bcl-2高表达,三者共同参与了HIBD的发生、发展。

结直肠癌组织中PDK1、Bcl-2、survivin表达变化及意义

目的观察结直肠癌组织中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)、Bcl-2、survivin表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测52例份结直肠癌组织(癌症组)及癌旁正常肠黏膜组织(对照组)、38例份腺瘤组织(腺瘤组)中的PDK1、Bcl-2、survivin蛋白,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系及三者表达的相关性。结果癌症组PDK1、Bcl-2、survivin蛋白阳性表达率均明显高于腺瘤组和对照组,P均<0.05。PDK1、Bcl-2、survivin蛋白表达均与结直肠癌T分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤分级等因素无关(P均>0.05)。结直肠癌组织中PDK1、Bcl-2、survivin蛋白表达两两互为正相关(P均<0.05)。结论结直肠癌组织中PDK1、Bcl-2、survivin呈高表达,三者可能在结肠癌的发生发展过程中具有一定的协同作用。

Bcl-2、cyclinA2和PI3K在激素受体阴性乳腺癌中的表达及意义

目的探讨激素受体阴性乳腺癌中B淋巴细胞瘤/白血病2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、细胞周期素A2(cyclin A2)和磷酸肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的表达及意义。方法采用实时聚合酶链反应(realtime polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测Bcl-2、cyclin A2和PI3K在激素受体阴性乳腺癌组织(58例)、乳腺正常组织(14例)中的表达水平,并采用Mann-Whitney U检验分析其与临床病理特征的关系。结果与乳腺正常组织相比,激素受体阴性乳腺癌中Bcl-2表达降低,而cyclin A2和PI3K表达增高(P<0.05)。在乳腺癌组织中,Bcl-2在TNM分期Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级和出现转移复发的患者中表达水平降低(P<0.05),但其表达在不同年龄、肿瘤大小和淋巴结转移的组间差异无显著性(P>0.05);cyclin A2在转移复发的患者中显著高表达(P<0.05),但在不同的年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期和淋巴结状态的组间差异均无显著性(P>0.05);PI3K在有淋巴结转移和TNM分期Ⅲ期的患者中高表达(P<0.05),但其表达在不同年龄、肿瘤大小、组织学分级以及是否转移复发的组间差异均无显著性(P>0.05)。结论 Bcl-2低表达、cyclin A2和PI3K高表达可能与激素受体阴性乳腺癌的发生发展有关。

不同时间窗电针治疗对脑梗死大鼠Bcl-2和BDNF表达的影响

目的研究大鼠脑缺血-再灌注后不同时间窗开始电针(electroacupuncture)治疗对其康复的影响。方法将100只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、电针组和模型组,制备左侧大脑中动脉栓塞/再灌注模型.电针组于动物再灌注后不同时间窗给予电针治疗,于治疗14d后取脑,采用RT-PCR检测梗死侧Bcl-2mRNA、BDNFmRNA的表达。结果各组均检测到BDNF mRNA和Bcl-2mRNA阳性表达,在电针12h亚组可以检测到BDNFmRNA的表达明显高于其它各组,有显著性差异(P<0.05);在电针24h组可以检测到Bcl-2mRNA的表达明显高于其它各组,有显著性差异(P<0.05)。结论在12h^24h时间窗给予电针治疗能促进大鼠脑梗死后梗死侧BD-NF mRNA和Bcl-2mRNA的表达达到峰值,从而发挥其脑保护及康复治疗的最大效应。