白附子标准汤剂的物性参数与化学成分相关性研究

目的 探究白附子标准汤剂的物性参数与其化学成分之间的相关性并建立模型,以期用物性参数指征内在化学成分,为实现标准汤剂的快速质量评价提供参考。方法 制备白附子生品及炮制品的标准汤剂,测定其物性参数(相对密度、pH值、氧化值),紫外分光光度法测定淀粉、总多糖、总黄酮的含量,高效液相色谱法测定核苷类成分及有机酸类成分的含量,采用熵权TOPSIS客观赋权法建立多指标综合评分,利用SPSS 21.0软件对白附子标准汤剂的物性参数、化学成分及综合评分进行相关性分析,并建立相应的回归模型。结果 相关性分析显示白附子标准汤剂物性参数与化学成分呈显著相关,其中pH值和相对密度是与内在化学成分最为关联的两个物性参数;综合评分与相对密度呈显著负相关,与pH值、氧化值均呈显著正相关;回归分析所建立的模型,拟合度均较高,模型有效。结论 研究对白附子标准汤剂的物性参数和大、小分子成分含量进行综合考察,其物性参数与化学成分呈显著相关,建立的回归模型拟合度均较高,表明以物性参数指征内在化学成分具有可行性,可为实现白附子标准汤剂的快速质量评价与控制提供一定的参考依据。

基于主成分分析法优选半夏、天南星及白附子水丸制剂工艺

目的利用主成分分析法优选半夏、天南星、白附子生品及炮制品水丸的最佳制剂工艺。方法首先利用均匀设计法设计并制备多批次药材水丸。紫外-可见分光光度法及高效液相色谱法测定水丸中的成分含量(总淀粉、总多糖、总皂苷、尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、鸟苷、夏佛塔苷)。之后利用主成分分析法计算不同样品的综合评价指标值,绘制等高线图并优选出不同水丸的最佳工艺。结果炮制和制剂过程对药品的药性药效有影响。对于3味药材的丸剂来说,半夏生品及最优炮制品水丸的最佳制备工艺为泛丸时间0.5 h、干燥时间8 h、干燥温度80℃,市售炮制品水丸的最佳制备工艺为泛丸时间0.5 h、干燥时间12 h、干燥温度80℃,天南星水丸的最佳制备工艺为泛丸时间0.5 h、干燥时间8 h、干燥温度60℃,白附子水丸的最佳制备工艺为泛丸时间1 h、干燥时间12 h、干燥温度60℃。结论利用主成分分析法,可以聚合多元信息,综合评价,为中药水丸质量判断及工艺优选提供了新的方法。

QuEChERS-气相色谱-串联质谱法测定白附子中35种禁用农药的残留量

在《中华人民共和国药典》(2020年版)四部通则2341新增第五法的基础上,提出了题示方法,并对前处理、色谱、质谱条件进行优化,解决了同分异构体农药在检测过程中易转化、分解的难题。用乙腈和QuEChERS萃取试剂盒提取样品中的35种禁用农药,用农残专用净化管去除杂质,所得样品提取液经氮吹浓缩和乙腈稀释后,加入磷酸三苯酯内标溶液,采用气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)分析。用DB-17MS毛细管色谱柱在程序升温条件下分离样品溶液中各禁用农药,配有电子轰击离子(EI)源的三重四极杆质谱仪在多反应监测(MRM)模式下检测,基质匹配法联合内标法定量。结果表明:各禁用农药与内标的质量浓度比值均与对应的峰面积比值在一定范围内呈线性关系,相关系数均不小于0.999 8,检出限(3S/N)为0.16~5.00μg·kg^(-1);按标准加入法进行回收试验,回收率为61.1%~121%;仪器、方法以及中间精密度试验所得各农药测定值的相对标准偏差分别为1.2%~1.8%(n=6)、2.3%~5.5%(n=6)和2.5%~5.7%(n=12)。方法用于实际样品的分析,6批白附子样品中均未检出35种禁用农药。

白附子对大鼠脑缺血再灌注的保护作用研究

目的 探究白附子对大鼠脑缺血再灌注的保护作用。方法 将32只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、白附子组(10 g/kg)和尼莫地平组(10 mg/kg),每组8只。除假手术组外,其余各组均采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,并且在造模前各组不间断地灌胃给药8 d。缺血再灌注24 h后,通过Longa 5分法评估神经功能缺损,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死发生率,苏木素-伊红(HE)染色观察神经元病理变化,试剂盒测定血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果 与模型组相比,白附子组和尼莫地平组Longa评分均大幅下降[(1.67±0.52)分、(1.33±0.52)分比(2.83±0.41)分,P<0.05],梗死体积显著减小[(14.96±7.54)%、(8.20±7.17)%比(24.97±7.16)%,P<0.05],大脑皮层神经元损失明显改善,血清MDA活性降低[(1.26±1.02)μmol/L、(1.67±0.54)μmol/L比(3.91±1.09)μmol/L,P<0.05]、SOD活性水平提高[(12.53±2.56)U/mL、(13.81±1.75)U/mL比(8.08±3.93)U/mL,P<0.05]。结论 白附子可以减轻氧化应激反应,对缺血后血流恢复引起的脑损伤具有保护作用。

白附子对人T细胞和单核细胞的调节活性

目的 :研究中药白附子的免疫学调节活性。方法 :用3H介入法测定了中药白附子提取物(Rhizomatyphoniiextract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性 ;用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后 ,检测了RTE的效应细胞 ;用51Cr游离实验测定了人杀伤细胞和自然杀伤细胞的杀伤活性 ,用ELISA法和生物法研究了单核细胞的细胞因子产生 ,并用3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能 ;用层析法分析了白附子的化学成分 ,并用SDS PAGE法测定了其有效成分的分子量。结果 :RTE对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性有很强的促进作用 ,并有较好的量效关系 ;RTE的效应细胞是T细胞 ;RTE增强人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性和自然杀伤细胞的非特异性杀伤活性、增强单核细胞的细胞因子 (肿瘤坏死因子和白细胞介素 1)产生 ,并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白附子的化学成分为 66道尔顿的糖蛋白。结论 :RTE对人的T细胞和单核细胞有免疫增强作用 ,并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞和外来抗原 ,这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。

当归、白术、制白附子多糖对小鼠免疫调节作用的影响

目的以中药植物多糖作为抗原,探讨其对小鼠免疫系统的激发特点,为多糖在免疫调节功能方面的应用提供科学依据。方法取当归、白术、制白附子3种中药植物水溶性多糖为抗原,分别给予小白鼠免疫刺激,采用ELISA法检测小鼠血清中的相应抗体及交叉抗体。结果3种中药植物类水溶性多糖均能刺激小鼠产生特异性IgG类抗体及非特异性交叉抗体,不同多糖刺激产生非特异抗体范围不同。结论中药多糖可能是一种泛特异广谱免疫调节剂。

白附子不同炮制品镇静、抗惊厥作用比较研究

对白附子生、制品进行了镇静、抗惊厥及镇痛作用的比较研究。结果表明白附子生、制品均有明显的镇静作用,能明显或不同程度的推迟因戊四唑及士的宁所致小鼠惊厥出现时间和死亡时间,减少小鼠扭体反应次数。新、老法制品与生品药效作用相近,新、老法制品比较亦无差异。

中药白附子的化学成分研究(Ⅰ)

中药白附子为天南星科梨头尖属植物独角莲 Typhonium giganteum Engl.的干燥地下块茎 ,我们自其低极性部位分离并鉴定了 6个化合物 ,分别为天师酸 (tianshic acid, )、尿嘧啶 (uridine, )、桂皮酸 (cinnamic acid, )、棕榈酸 (palm itic acid, )、β-谷甾醇 (β- sitosterol, )和β-谷甾醇 - 3- O-葡萄糖苷 (β- sitosterol- 3- O- gluceroside, ) ,其中天师酸、桂皮酸为本属植物中首次分得。

白附子提取物对胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制

目的:研究白附子提取物对人SHG-44脑胶质瘤细胞生长的影响,初步探讨白附子对胶质瘤细胞增殖和凋亡的作用机制。方法:培养脑胶质瘤SHG-44细胞,将其分为空白对照组和8、40、200及1 000μg.L-1白附子提取物组,MTT法检测白附子提取物对SHG-44细胞生长的影响,倒置显微镜观察细胞凋亡形态,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,细胞免疫组织化学法检测Bcl-2与Bax蛋白表达。结果:MTT结果,与空白对照组比较,8和200μg.L-1白附子提取物组细胞在30min和3h时,细胞增殖均明显受抑制,细胞增殖活性降低(P<0.05);1 000μg.L-1白附子提取物组细胞在30min、1h和3h时,细胞增殖活性均明显降低(P<0.05);不同浓度白附子提取物对胶质瘤细胞增殖抑制作用呈剂量-时间依赖性。镜下观察,与空白对照组比较,各药物组细胞均出现数量不等的凋亡小体。流式细胞术分析,部分细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡率随着药物浓度的增加而升高。细胞免疫组织化学检测,与空白对照组比较,200μg.L-1白附子提取物组细胞Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax蛋白表达增高(P<0.01)。结论:白附子提取物可抑制SHG-44细胞的增殖及诱导其发生凋亡,其作用机制与Bcl-2蛋白表达下降和Bax蛋白表达上升有关。

白附子不同炮制品抗炎作用比较研究

对白附子生、制品进行了抗炎作用的比较研究。结果表明,白附子对大鼠蛋清性、酵母性及甲醛性关节肿,有明显或不同程度的抑制作用。对棉球肉芽肿增生亦有明显的抑制作用,其抗炎作用同免疫器官胸腺,脾脏关系不大。新、老法制品与生品抗炎作用相近,新老法制品比较亦无差异。

BP-ANN结合正交试验法优化白附子多糖提取工艺

目的采用反向传播人工神经网络(BP-ANN)结合正交试验法优化白附子多糖提取工艺。方法水提醇沉法提取多糖后,苯酚-硫酸法测定含有量。基于单因素试验的基础上,按照L9(34)正交表安排进行试验,考察提取温度、提取时间、料液比对多糖得率的影响,BP-ANN技术优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间3.5 h,提取温度90℃,料液比1∶20,多糖得率达5.20%。结论该方法重复性良好,而且试验次数少。

白附子不同炮制品毒性比较研究

本实验结果表明,白附子生品对眼结膜、胃粘膜及皮肤有明显的刺激作用,而新法炮制后的制品同药典一样,刺激作用和强度均较生品明显减弱或消失。灌胃给药:生、制品毒性均不明显。腹腔注射:生品呈现明显毒性反应,制品毒性减弱,其中新法毒性减弱最明显。连续用药21天,除生品对大鼠体重增长有明显影响外,其它各组对体重、肝、肾功能及血象均未见有明显的影响。

白附子酪氨酸酶活性抑制成分的提取与分离

研究了不同溶剂及提取方式对白附子中酪氨酸酶抑制成分的影响,并应用活性追踪法对白附子中酪氨酸酶活性抑制成分进行考察。结果表明,以20%乙醇水溶液为溶剂从白附子中提取的粗提物对酪氨酸酶活性的抑制作用最强,抑制率可达到96.35%,与恒温水浴振荡提取法相比,超声波辅助提取法对活性成分的提取效果更好。在此提取条件下所得白附子粗提物对酪氨酸酶的半抑制浓度IC50为24.69mg/mL。该粗提物依次经乙醚和正丁醇萃取,所得正丁醇萃取组分对酪氨酸酶的抑制率达71.94%。对高活性的正丁醇萃取组分进行分离,获得了一种酪氨酸酶抑制率高达98.82%的组分,是一种潜在的酪氨酸酶抑制剂。研究结果对白附子及其活性组分在医药和食品领域的应用有指导意义。

白附子提取物对胶质瘤细胞的生长抑制作用及其机制

目的:研究白附子提取物对体外培养的脑胶质瘤细胞生长的影响,初步探讨其抑制胶质瘤细胞生长的机制。方法:培养人脑胶质瘤SHG-44细胞,分为空白对照组和不同剂量(8、40、200和1 000μg·L-1)白附子提取物组,MTT法检测白附子提取物对SHG-44细胞生长的抑制作用,ELISA法检测细胞分泌Bax和caspase-3蛋白水平,Western blotting法检测细胞中caspase-3蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,24h时200和1 000μg·L-1白附子提取物组、48h时8、40、200和1 000μg·L-1白附子提取物组细胞的生长抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01);48h时白附子提取物组细胞分泌Bax和caspase-3蛋白水平均呈上升趋势,40、200和1 000μg·L-1白附子提取物组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不同剂量白附子提取物组SHG-44细胞caspase-3蛋白表达水平随白附子提取物剂量的增加呈上升趋势,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:白附子提取物通过上调Bax蛋白表达水平,使caspase-3表达水平增加,激活凋亡通路,抑制细胞生长。

超微粉碎对白附子中草酸钙针晶形态和数量的影响

目的比较超微粉碎法与常规粉碎法的白附子粉末中草酸钙针晶的形态和数量的差别。方法对白附子中草酸钙针晶进行光学显微镜、扫描电镜观察比对分析及显微数量分析。结果超微粉碎使白附子粉末中草酸钙针晶碎断,数目减少。超微粉碎粉末草酸钙针晶碎片较常规粉碎粉末可减少1/8～1/2。扫描电镜观察超微粉碎的草酸钙针晶晶体出现纵向断裂,晶体呈扁的长方体,见不到草酸钙针晶圆柱体和针尖。结论超微粉碎方法对白附子中草酸钙针晶的形态、数量和存在的方式有所改变。

白附子抗肿瘤药理作用研究

目的:研究白附子不同提取部位在小鼠体内的抗肿瘤活性。方法:分别以S180实体瘤和腹水瘤小鼠为实验动物模型,灌胃给予不同的白附子提取部位,前者处死小鼠计算各给药组的抑瘤率及胸腺指数和脾指数,后者计算各给药组的生命延长率。结果:白附子提取物能不同程度的抑制小鼠肉瘤S180的生长速度,延长S180腹水瘤小鼠的生存时间,提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。结论:白附子具有一定的抗肿瘤作用。

白附子不同炮制品中桂皮酸的含量测定

目的:为筛选炮制白附子的方法提供科学依据。方法:利用HPLC法测定桂皮酸的含量。结果:桂皮酸在0.512-5.120μg范围内,线性关系良好,回收率为98.08%。结论:姜、矾煮制白附子中桂皮酸含量最低,临床使用最安全。

白附子不同炮制品中5-羟甲基糠醛的含量变化研究

目的:探讨白附子不同炮制品中5-羟甲基糠醛的含量变化规律。方法:采用RP-HPLC法,AgilentHC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(11∶89),检测波长280 nm,流速1.0 mL/m in。结果:白附子不同炮制品中都检测出5-羟甲基糠醛,其含量在一定时间内随加热时间的延长而增加,在一定范围内随辅料白矾用量的增加而增加。结论:白附子质量控制和饮片加工炮制规范化研究应特别注意5-羟甲基糠醛的产生和含量变化。

RP-HPLC法测定白附子趁鲜加工样品中草酸钙针晶的含量

目的:测定白附子趁鲜加工炮制饮片中草酸钙针晶的含量,比较炮制因素对其含量的影响。方法:RP-HPLC法。结果:白附子趁鲜加工后草酸钙针晶含量降低。结论:白矾复制法能够降低鲜白附子中草酸钙含量,可能是其刺激性降低的原因之一。RP-HPLC法简单快捷,可操作性强,结果准确可信。

白附子临床应用辨误

中药饮片中存在很多异物同名的情况，尤其有些名称相近似但作用相差较大的饮片，若相互代用后，则会严重影响中医临床疗效。如白附子、关白附与白附片三者不仅名称相似，饮片外形也相近，极易混淆。中国地域广大，因历史沿用习惯不同，各地对同一名称的饮片尚存在付予不同品种的现象，如对临床处方开具的“白附子”，北京、河南、河北、香港等地的药房一般给予禹白附，而上海、浙江、台湾等地习惯给予关白附，还有将白附子与白附片混淆现象。