携带HPV11基因组的HaCaT细胞APOBEC3s表达及α干扰素的调控

目的探讨携带HPV11基因组的HaCaT细胞（HPV11．HaCaT）中载脂蛋白B信使RNA编辑酶催化多肽样蛋白3家族（APOBEC3s，A3s）mRNA表达、主要A3蛋白在细胞内的表达、分布，以及外源性仅干扰素对其调节。方法qRT—PCR检测HPV11．HaCaT细胞中A3A、A3B、A3C和A3H mRNA的基础表达水平，并与正常HaCaT细胞作比较；分别用不同浓度的重组人IFN—α2b（rhIFN—α2b）作用于HaCaT、HPV11．HaCaT、Hela细胞6、24、48h后，qRT—PCR检测A3A、A3B、A3C和A3H mRNA表达水平。细胞免疫荧光染色法观察rhIFN—α2b刺激6h时，A3A蛋白在3种细胞中的表达和分布情况。结果HPV11．HaCaT细胞内A3A、A3B、A3CmRNA表达量均明显高于正常HaCaT细胞（P〈0．05）。在不同浓度rhIFN—α2b刺激下，3种细胞4种A3成员mRNA表达趋势存在差异，其中A3A升高最为明显。与各自正常对照组相比，10^6IU／ml rhIFN—α2b刺激6h时3种细胞的A3AmRNA表达明显升高，差异有统计学意义（HaCaT细胞35．77±5．01比1．00±0．05，P〈0．05；HPV11．HaCaT细胞15．34±2．14比0．99±0．01，P〈0．05；Hela24．60±5．45比0．97±0．03，P〈0．05），而A3B、A3C和A3HmRNA相对表达量均低于10倍。经10^6IU／ml rhIFN-α2b处理6h后，3种细胞胞质和胞核中均可见到A3A蛋白的阳性染色增加。结论HPV11进入HaCaT细胞后，可激活A3s（尤其是A3A）免疫系统。α干扰素诱导A3A的高表达可能是其发挥免疫调控功能的机制之一。