HPLC-DAD-ELSD法测定伤痛酊中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量

采用HPLC-DAD-ELSD法测定伤痛酊（STD）中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量。方法：采用HypersilC，。色谱柱（200mm×4．6mm，5μm）；流速：0．8ml·min^-1；氯化两面针碱和乙氧基白屈菜红碱：流动相A为乙腈，流动相B为0．1％甲酸一三乙胺（pH4．5），检测波长为273nm。岩白菜素和百两金皂苷A：甲醇一水（25：75）为流动相；漂移管温度：95℃，载气（N2）流速：2．5SLPM·min^-1。结果：氯化两面针碱与乙氧基白屈莱红碱进样量分别在0．021—0．426μg（r=0．9995）、0．075—1．494μg（r=0．9998）与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为99．22％、98．61％，RsD分别为0．64％、0．46％（n=9）；岩白菜素和百两金皂苷A分别在0．215～4．304（r=0．9993）、0．286—5。728μg（r=0．9997）进样量的自然对数值与峰面积的自然对数值良好的线性关系，平均加样回收率分别为99．15％、99．25％，RSD分别为0．77％、0．56％（n=9）。结论：该测定方法结果准确、灵敏度高、重复性好，可用于伤痛酊中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量测定。

HPLC-ELSD法测定朱砂根中岩白菜素和百两金皂苷A的含量

目的建立HPLC-ELSD法同步测定朱砂根活性成分岩白菜素和百两金皂苷A的含量。方法采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL min-1,柱温30℃。ELSD参数:漂移管温度100℃,载气流速2.5 mL min-1。结果岩白菜素和百两金皂苷A分别在0.42～8.40μg和0.51～10.20μg与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.2%、101.4%,RSD分别为1.6%、2.0%。结论建立的含量测定方法操作简便、结果准确、重现性好,可用于朱砂根药材的质量控制。

HPLC-ESLD测定瑶药竹叶风中岩白菜素和百两金皂苷A含量的方法研究

目的：建立瑶药竹叶风中岩白菜素和百两金皂苷A的含量测定方法,以控制该药材质量.方法：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ESLD）,摸索确定色谱条件,采用正交设计方法,筛选确定供试品溶液制备方法.结果：HPLC色谱条件：色谱柱为Kromasil C18 100A（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温35℃;流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速0.8 mL/min;ESLD参数为漂移管温度105℃,气体流量2.5 L/min;进样量为对照品溶液5,20μtL,供试品溶液5～20 μL.供试液制备方法：药材破碎度为过4号筛的粉末,甲醇浓度为75％,超声时间为20 min.结论：建立的竹叶风含量测定方法简便准确,重复性好,可作为竹叶风质量评价和控制的方法之一.

百两金皂苷A的急性与亚急性毒性实验

百两金皂苷A（ardisiacrispin A）是一种三萜皂苷（图1）,最早是从植物百两金（Ardisia crispa Thunb）中发现的[1],中药朱砂根（Ardisia crenata Sims）中也有较高含量的分布[2]。有报道称百两金皂苷A能诱导多种肿瘤细胞凋亡,其体外抗肿瘤作用机制与对细胞中caspase-8和caspase-9的活化相关[3-5]。目前,百两金皂苷A的体内实验研究尚未见报道。

百两金皂苷A的微生物转化及其产物的细胞毒活性研究

目的利用燕麦曲霉Aspergillus avenaceus AA 3.4454对百两金皂苷A进行微生物转化,并对转化产物进行细胞毒活性研究。方法将百两金皂苷A放置燕麦曲霉液体培养基中,28℃、160 r/min条件下共培养3 d后,利用多种柱色谱分离转化产物,采用核磁共振等波谱手段鉴定结构;采用MTT法测定转化产物对肿瘤细胞系的细胞毒活性。结果从百两金皂苷A的燕麦曲霉液体发酵液中分离出3个主要转化产物,其结构分别鉴定为西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(1)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(2)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-[α-D-半乳吡喃糖基-(1→3)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(3)。结论首次利用燕麦曲霉对百两金皂苷A进行微生物转化并分离得到在糖链的不同位置增加了α-D型半乳糖的转化产物,3个转化产物均为新化合物,均具有一定的细胞毒活性,且转化产物1对大细胞肺癌细胞的细胞毒活性略优于底物。

百两金根中的一个新皂苷

利用各种色谱分离技术,从百两金Ardisia Crispa根中分离得到7个化合物,根据理化性质和光谱数据鉴定为(+)-安五脂素(1),内消旋二氢愈疮木酸(2),6-羟基己酸(3),岩白菜素(4),正十四烷(5),β-谷甾醇(6)和百两金皂苷C(7).其中7为新化合物.采用MTT细胞试验研究化合物7对肝癌细胞Bel-7402的抑制活性.

百两金皂苷类似物的化学与药理学研究进展

对百两金皂苷类似物的化学和药理活性进行文献综述。迄今报道的百两金皂苷类似物大约有60个,其齐墩果烷三萜母核上具有多种与生物活性有关的特征取代基,包括13β,28-环醚、30-氧化甲基和3-O-糖链等。该类物质多具抗肿瘤、抗炎和抗真菌等药理活性,值得深入研究。

三萜皂苷混合物ardisiacrispin(A+B)对人白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及机制探讨

目的观察三萜皂苷混合物ardisiacrispin(A+B)对人白血病HL-60细胞增殖的抑制作用,并对其可能的作用机制进行探讨。方法应用MTT法测定增殖抑制作用,采用流式细胞术(FACS)分析阻断细胞周期及诱导凋亡作用,采用PI荧光染色观察凋亡小体的存在,以Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化。结果ardisiacrispin(A+B)可明显抑制HL-60细胞的增殖,具有浓度依赖性,作用48h的IC50值为4.2mg·L-1。ardisiacrispin(A+B)可阻断HL-60细胞于S期,在1.0～5.0mg·L-1范围内具有浓度依赖性,3.5mg.L-1ardisiacrispin(A+B)作用6、24和48h时,给药组中S期细胞比例分别为对照组的1.26、1.46和1.71倍。ardisia-crispin(A+B)可诱导HL-60细胞凋亡,在1.0～7.5mg.L-1浓度范围内具有浓度依赖性;此外,ardisiacrispin(A+B)可浓度依赖性地诱导PARP蛋白的裂解,2.5mg.L-1ardisi-acrispin(A+B)作用24h使裂解比例达到27.1%。结论Ardisiacrispin(A+B)可通过阻断细胞于S期、诱导凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。

红凉伞根茎皂苷化学成分研究

采用柱色谱等分离方法,经理化方法及1H,13C NMR等方法鉴定结构,从紫金牛科紫金牛属植物红凉伞(Ardisia crenataf.hortensis)根茎中分离鉴定出5个皂苷:朱砂根皂苷A(1)、朱砂根皂苷C(2)、百两金皂苷B(3)、3-O-[6′-O-palmitoyl-β-D-glucosyl-]-spinasta 7,22(23)-diene(4a)、3-O-[6′-O-palmitoyl-]-β-D-glucopyranosylstigmasterol(4b),这五个化合物均首次从该植物中分离得到。

百两金的化学成分

从百两金（Ardisia crispa（Thunb.）A.DC.）的根及茎乙醇提取物中分离得到了8个化合物,通过MS和NMR等方法鉴定为（7S,7′R）-双（3,4-亚甲二氧苯基）-rel-（8R,8′R）-二甲基四氢呋喃（1）,（-）-襄五脂素（2）,（7S,8S,7′R,8′R）-3,4-亚甲二氧基-3′,4′-二甲氧基-7,7′-环氧脂素（3）,异安五脂素（4）,α-菠甾醇（5）,26-羟基二十六烷酸甘油酸酯（6）,百两金皂苷B（7）,岩白菜素（8）。其中有化合物1~6为首次从该种植物中分离得到。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定红毛走马胎中百两金皂苷B的含量

目的：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）测定不同产地红毛走马胎药材中百两金皂苷B的含量。方法：样品以50%乙醇超声提取,采用HPLC-ELSD法测定,色谱柱为Symmetry C18（150 mm×4.5 mm,5μm）;柱温为30℃;流动相为甲醇-水（65∶35）;流速为0.8 m L·min-1;ELSD漂移管温度为95℃;气体流速为2.0 L·min-1。结果：百两金皂苷B的线性范围为0.268~2.144μg（r=0.999 8）,平均加样回收率为101.9%,RSD为1.7%（n=6）。结论：本法操作简便,结果准确可靠。不同产地红毛走马胎药材中百两金皂苷B的含量全草在2.6%~4.5%之间;根和茎在3.7%~6.2%之间。

朱砂根主要活性成分的含量测定研究

目的建立朱砂根中主要活性成分岩白菜素和百两金皂苷B的含量测定方法。方法采用HPLC-UV法测定岩白菜素和百两金皂苷B的含量。结果 岩白菜素在0.124 1～1.985 6μg范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.4%,RSD=2.7%;百两金皂苷B在2.008 8～20.088μg范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.2%,RSD=2.8%。结论 该方法简单、准确、重复性好,可作为评价朱砂根药材质量的方法。

基于正交试验设计优化朱砂根2种成分提取工艺研究

目的:正交试验法优选朱砂根药材2种成分最佳提取工艺。方法:以乙醇体积分数、料液比、提取时间考察因素,采用HPLC-ELSD法测定2种成分提取含量,以岩白菜素和百两金皂苷B提取含量为评价指标,采用L;(3;)正交试验法优选朱砂根药材2种成分提取工艺。结果:影响朱砂根药材2种成分提取含量主次顺序为B(料液比)>C(提取时间)>A(乙醇体积分数),提取的最佳工艺为乙醇体积分数50%,超声提取30 min,料液比为1︰30,提取1次。结论:该提取工艺稳定可行,重现性好,为朱砂根药材2种成分提取的最佳工艺。

江南紫金牛的化学成分研究

目的对江南紫金牛Ardisia faberi全草的化学成分进行分离、鉴定。方法采用正相硅胶、D101大孔吸附树脂、MCI、Sephadex LH-20、C18、C8等柱色谱方法进行分离纯化,并运用波谱分析的方法鉴定化合物的结构。结果从江南紫金牛全草80%乙醇渗漉液的醋酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到11个化合物,分别鉴定为鲍尔烯醇(1)、油酸(2)、(Z)-10-heneicosenoic acid(3)、蚱蜢酮(4)、岩白菜素(5)、mallonanoside A(6)、没食子酸乙酯(7)、落新妇苷(8)、槲皮苷(9)、百两金皂苷B(10)、ardicrenin(11)。结论化合物2、7、9、10、11是首次从该植物中分离得到,化合物3、4、6、8是首次从该属植物中分离得到。