家兔支气管败血波氏杆菌重组百日咳杆菌粘附素(PRN)蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)PRN蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌prn基因序列(AY376325)设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pGEX-4T-1中,以E.coli BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白PRN作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数等,建立检测支气管败血波氏杆菌抗体的间接ELISA方法。结果成功克隆了prn全基因序列,并在E.coliBL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白PRN具有良好的抗原性。应用重组蛋白PRN为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白PRN抗原的包被浓度为500ng/mL,最适血清稀释度为1∶40。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。

百日咳杆菌粘附素的分子生物学研究进展

百日咳杆菌粘附素又称６．９×１０＾４外膜蛋白，是所有毒力百日咳杆菌产生的一种非 纤毛性凝集原，存在于细菌外膜表面，具有免疫原性。本文就Ｐｒｎ 的基因和分子结构、生物合成和调控，生物学性等进行了综述。

药食兼优话大蒜

大蒜含有丰富的碳水化合物、矿物质、蛋白质、脂肪、多种维生素等,常食能增强体质。大蒜中所含的一种带油脂性的白色液体叫硫化丙烯,即大蒜素,具有特殊的香辛气味,可促进消化,增进食欲,使大蒜成为人们最喜爱的调味料。古希腊名医希波克拉底赞其为“完美的食物”。