HPLC/ELSD法结合固相萃取测定三七中人参皂苷Rg_1、Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的建立三七药材中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量测定方法。方法高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,结合固相萃取技术对样品进行预处理。色谱柱:大连伊利特Hypersil氨基柱(200mm×4.0mm,5μm);流动相:乙腈-异丙醇-10mmol·L-1醋酸铵水溶液(冰醋酸调pH5.0)(75∶20∶5);流速:0.6mL·min-1;柱温:室温;ELSD雾化器温度:55℃;氮气流量:2.3L·min-1。结果人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的线性范围为1.0～10.0μg,加样回收率为95.5%～102.5%,日内精密度≤2%、日间精密度≤4%。结论该方法简便准确,可作为三七的含量测定方法。

三七中三种皂苷含量测定方法的比较研究

目的:通过本方法和中国药典2005年一部三七项下的含量测定方法比较,建立一种快速、简便、准确的测定三七中三种皂苷含量的方法。方法:采用反向高效液相色谱法,梯度洗脱测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量,色谱柱Phenomenex C18柱,以乙腈为流动相A,水为流动相B,采用梯度洗脱,流速1.0ml·min,检测波长203nm。结果:该方法的测定比中国药典2005版三七项下的测定节省时间,同时经过对本方法系统的发法学研究,结果本方法线性关系良好,平均加样回收率分别为98.9%,99.2%,98.7%;RSD分别为1.4%,1.9%,1.7%(n=6),结论:本法快速、简便、灵敏和分离度好,适用于三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定,可以做为中国药典2005版三七中三种皂苷含量测定的提高研究。

人参提取液、药渣压滤液、药渣中人参皂苷含量对比研究

【目的】对比观察人参提取液、药渣压滤液、药渣中人参皂苷Rg1、Rb1和Re的含量。【方法】采用高效液相色谱(HPLC)法检测5批次人参提取液(按2005版中国药典所述方法进行提取)、药渣压滤液和药渣中人参皂苷Rg1、Rb1和Re的含量。【结果】人参药渣压滤液中人参皂苷Rg1、Rb1和Re含量与人参提取液比较差异均无统计学意义(P>0.05),但药渣中人参皂苷含量较人参提取液和人参药渣压滤液均显著减少(P<0.01),人参药渣中残留有较多的人参皂苷等有效成分,占提取的20%以上。【结论】药渣压滤液和药渣中均含有较高的人参皂苷Rg1、Rb1和Re等有效组分,药渣压滤液应与提取液混合入药,人参提取后药渣应加以开发利用。

红参破壁粉粒中人参皂苷成分的含量测定

【目的】建立红参破壁粉粒中人参皂苷成分的含量测定方法。【方法】采用高效液相色谱法测定红参破壁粉粒中人参皂苷含量。【结果】13批红参破壁粉粒中,人参皂苷Rg1在1.012～10.120μg范围内线性关系良好,平均回收率为101.4%,sR值为1.7%;人参皂苷Re在0.653 4～6.534 0μg范围内线性关系良好,平均回收率为95.0%,sR值为1.8%;人参皂苷Rb1在1.019～10.190μg范围内线性关系良好,平均回收率为104.9%,sR值为0.8%。【结论】本研究方法简便、快速,适用于红参破壁粉粒的含量测定,可以作为红参破壁粉粒的质量控制标准。

土贝母皂苷对HL-60细胞周期作用的研究

目的:应用土贝母皂苷(下称皂苷)作用于人早幼粒白血病细胞(HL -60),研究皂苷抗肿瘤作用的分子机制。方法:采用流式细胞术等方法分析细胞周期及凋亡;蛋白印迹免疫法检测细胞凋亡及周期相关基因 bcl- 2、cdc2 和 cy clinB1表达的变化。结果:15μmol/L皂苷作用 24 h 可将 HL -60 细胞阻滞于G2/M期,进而诱导凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。凋亡抑制基因bcl 2表达无明显变化,周期蛋白 cyclinB1 表达降低,而cdc2表达无明显改变。结论:皂苷导致HL- 60细胞 G2/M期阻滞,进而诱导凋亡;周期阻滞的分子机制与降低 cy clinB1蛋白水平有关,而凋亡的诱导与bcl- 2表达无关。

枫香槲寄生总皂苷提取工艺研究及含量测定

【目的】研究枫香槲寄生总皂苷的最佳提取工艺并测定总皂苷的含量。【方法】采用正交试验法优选最佳提取工艺,以齐墩果酸为对照品通过比色法测定总皂苷的含量。【结果】最佳提取条件为10倍量体积分数为70%的乙醇回流提取3次,每次1 h。显色后的样品稳定,测定方法准确、重现性好,可用于该植物药总皂苷的含量测定。其中第3批药材总皂苷含量最高,其百分含量为8.16%。【结论】该提取工艺操作简单,经济省时,方便可行。

AB-8大孔吸附树脂吸附知母皂苷动力学研究

【目的】考察AB-8大孔吸附树脂对知母溶液中皂苷吸附的动力学过程。【方法】通过静态吸附、单次动态吸附和串联动态吸附实验,采用紫外分光光度法测定知母皂苷的含量,绘制静态吸附曲线和动态吸附曲线。【结果】静态吸附实验中,Lagergren方程参数Kad=0.018 6,r=0.998 6,Dumwals-W agner方程参数K=0.008 1,r=0.995 8。动态吸附过程存在泄露现象,穿透点在600 mL(0.1 g/mL)。【结论】AB-8大孔吸附树脂对知母皂苷的吸附机理是前期以液膜扩散为主,后期以颗粒内扩散为主。动态吸附的泄露问题可通过串联吸附柱加以解决,此方法可以作为中试模型。

p53和Bcl-2 mRNA表达在三七皂苷R1诱导HL-60细胞凋亡中的作用

目的:探讨三七皂苷R1诱导HL-60细胞凋亡的作用机制。方法:采用MTT比色法观察三七皂苷R1对人白血病细胞株HL-60细胞增殖的抑制作用。采用流式细胞术检测细胞凋亡改变,并以RT-PCR检测凋亡调节基因p53、Bcl-2的表达。结果:三七皂苷R1能明显抑制人白血病细胞株HL-60细胞的生长,且呈时间和浓度依赖性。三七皂苷R1作用后人白血病细胞株HL-60细胞呈现凋亡特征,流式细胞术显示凋亡细胞比例升高。RT-PCR检测可见p53mRNA表达显著增加,而Bcl-2mRNA表达减少。结论:三七皂苷R1能诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡,其作用可能与凋亡调节基因p53的上调和Bcl-2的下调有关。

HPLC-ELSD测定柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、d的含量

目的:应用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、d的含量。方法:柴胡以碱性乙醇进行提取,AB-8大孔吸附树脂分离纯化,得到柴胡总皂苷,用HPLC-ELSD法测定柴胡皂苷a、d的含量。结果:柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、d的含量分别为4.31%,12.86%,柴胡皂苷a、d分别在0.09～0.72μg、0.16～1.08μg范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为102.39%、102.00%,RSD分别为1.95%、2.21%。结论:HPLC-ELSD测定柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、d含量,方法简便,结果可靠,可作为柴胡提取物质量控制的检测方法。

太白三七中三七总皂苷的提取及含量测定

采用皂苷类物质的提取通法,以甲醇为溶剂提取太白三七中的三七总皂苷,得到三七总皂苷粗品,并对其进行定性鉴定,最后用高效液相色谱法(HPLC)对太白三七中的三七总皂苷进行含量测定。太白三七中三七总皂苷的含量为4.337%。

HPLC梯度洗脱法测定愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量

目的:研究愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法:采用ODS色谱柱(250mm×4.6mm),乙腈-水梯度洗脱,0～35min(19:81),35～75min(19:81→21:79),流速:1.0ml·min-1,检测波长:203nm,柱温:30℃,进样量:10μl。结果:人参皂苷Rg1在0.217～2.604μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为96.59%,RSD为1.34%。结论:该方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定。

高效液相色谱梯度洗脱法测定七叶神软胶囊中人参皂苷Rb3的含量

目的:研究七叶神软胶囊中人参皂苷Rb3的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法:采用ODS色谱柱(250mm×4.6mm),乙腈-水梯度洗脱,0～19min(30:70→35:65),19～21min(35:65→50:50);21～26min(50:50),流速:1.0mL·min-1,检测波长:203nm,柱温:30℃,进样量:10μL。结果:人参皂苷Rb3在0.524～7.336μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率为96.50%,RSD为1.09%。结论:该方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于七叶神软胶囊中人参皂苷Rb3的含量测定。

HPLC法测定心脑舒胶囊中人参皂苷Rg_1的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定心脑舒胶囊中人参皂苷Rg1含量的方法。方法 :采用ODSC18色谱柱 ,乙腈 -0 0 2 %磷酸 (2 0 6∶79 4 )为流动相 ,流速为 1ml/min ,柱温 :4 0℃ ;检测波长 2 0 3nm。结果 :本法可测定心脑舒胶囊中人参皂苷Rg1含量 ,回收率为 97 5 5 % ,RSD为 1 79%。结论 :该方法简便、准确 ,可作为心脑舒胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定方法。

HPLC法测定铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rb_1的含量

目的 建立铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rb_1的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为岛津C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(34:66),流速为1.0 mL/min,检测波长为203nm,柱温为40℃。结果 人参皂苷Rb_1进样量在2.856μg～14.280μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为96.51％,RSD为1.59％。结论 该方法可用于铁皮枫斗颗粒的质量控制。

HPLC法测定消栓通络胶囊中人参皂苷Rg1的含量

目的：建立HPLC法对消栓通络胶囊定量的分析方法。方法：采用HPLC法测定人参皂苷Rg1的含量。结果：人参皂苷Rg1对照品线性范围在0．478-14．34μg，样品平均回收率为95．9％，RSD为3．0％。结论：此方法灵敏度、精密度和重现性良好，能有效控制消栓通络胶囊的质量。

SPE-HPLC法测定杞菊地黄丸含莫诺苷和马钱苷的量

目的建立SPE-HPLC法测定杞菊地黄丸含莫诺苷和马钱苷量的方法。方法采用Eclipse XDB-C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.100%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为240 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果莫诺苷和马钱苷分别在0.050、2.000μg范围内线性关系良好,莫诺苷的回归方程为Y=9.28×105X+14.4(r=0.999 2);马钱苷的回归方程为Y=1.02×105X+5.55(r=0.999 2),平均回收率分别为102.835%、99.080%[相对标准偏差(RSD)=1.400%、1.200%]。结论该法简便、准确、快速,可用于同时测定杞菊地黄丸中莫诺苷和马钱苷的含量,控制药品质量。

知母药材苷元类成分RP-HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:采用RP-HPLC-ELSD法建立知母药材的指纹图谱。方法:以Krom asil C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,采用甲醇-水进行梯度洗脱,流速1.0 m l.m in-1,柱温30℃,检测器温度100℃,气体流速2.0 m l.m in-1。结果:共标出知母药材苷元类成分8个共有峰,重复性、精密度和溶液稳定性试验中,峰面积大于10%总蜂面积的共有峰,其相对峰面积的RSD值均小于3%,符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》中的有关规定。结论:RP-HPLC-ELSD法稳定、可靠、重复性好,为知母药材质量控制提供参考。

HPLC法测定荔之咽滴丸中高车前苷含量

目的：建立荔之咽滴丸中高车前苷含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法，为荔之咽滴丸的质量控制提供依据。方法色谱柱：Hedera ODS-2（250.0 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：甲醇∶0.5%冰醋酸水溶液（50∶50）；柱温：30℃；流速：1.0 mL/min；检测波长：335 nm；进样量：10μL。结果高车前苷在0.20～2.52μg时呈良好的线性关系，相关系数（r）＝0.9998；平均回收率为99.80%，其相对标准偏差（RSD）为2.35%。结论 HPLC用于测定荔之咽滴丸中高车前苷含量，方法简便、准确、专属性强、重复性好，能起到控制荔之咽滴丸中高车前苷含量的作用。

复方参曲颗粒剂的制备和质量标准研究

【目的】研究复方参曲颗粒剂的制备和质量标准。【方法】以丹酚酸B的含量、流动性和引湿性等为指标,考察复方参曲颗粒剂的提取、纯化、浓缩、干燥、成型等工艺。以处方半数药材为研究对象,依据中国药典进行薄层鉴别;以丹酚酸B的含量为指标,通过对成品的提取方法、提取时间、溶剂用量3个方面进行选择,建立成品最佳提取方法;方法学考察包括线性、精密度、专属性、稳定性、准确度等内容。采用高效液相色谱(HPLC)法测定丹酚酸B的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇—乙腈—体积分数2%甲酸水(体积比为28∶10∶62)为流动相,检测波长为286 nm,按外标法定量。【结果】将小试最佳成型工艺进行3批放大中试生产,结果证明产品工艺稳定,符合质量标准规定;成品提取用体积分数75%甲醇50 mL,加热回流30 min所得的丹酚酸B含量最高,各项实验结果均符合相应参数的要求,说明采用的方法满足相应的检测要求。样品含量测定方法准确度、回收率均符合中国药典Ⅰ部(2005版)。该方法灵敏度高、专属性强。【结论】本实验筛选出了复方参曲颗粒剂最佳成型工艺。建立了以人参皂苷Rg1、橙皮苷、哈巴俄苷为对照品的薄层鉴别方法,为复方参曲颗粒剂的定性研究提供了依据;建立了以丹酚酸B为含量测定指标的HPLC法;建立了成品总皂苷含量测定方法。

举元颗粒剂质量标准研究

目的：建立举元颗粒剂的质量标准，确保制剂质量。方法：采用薄层色谱法对制剂中的黄芪、甘草进行定性鉴别；采用HPLC法测定制剂中人参皂苷Rg1的含量，色谱条件：LichrospherC18柱（4．6mm×250mm，5um）；流动相乙腈-水（35：65）；柱温25℃，流速1．0ml／min，检测波长203nm。结果：黄芪、甘草的薄层色谱斑点清晰，分离良好；人参皂苷Rg1在0．118～1．416μg范围内线性关系良好，7-0．9997，平均回收率为98．59％。结论：该研究方法专属可靠，可作为该制剂质量控制方法。