麦冬皂苷D调节cAMP/PKA/CREB信号通路对炎症性肠病大鼠炎性损伤的影响

目的:探究麦冬皂苷D调节cAMP/PKA/CREB信号通路对炎症性肠病(IBD)大鼠炎性损伤的影响。方法:将大鼠分为对照组、模型组、麦冬皂苷D低剂量组、麦冬皂苷D高剂量组和麦冬皂苷D高剂量+H-89(cAMP抑制剂)组。检测大鼠质量和大鼠结肠长度;酶联免疫吸附法检测血清IL-17、IL-6、IL-10、TNF-α、cAMP水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;HE染色检测结肠组织病理损伤;Western blot检测大鼠结肠组织中Bax、Bcl-2以及cAMP/PKA/CREB信号通路相关蛋白表达。结果:治疗结束后,与对照组相比,模型组大鼠结肠组织显著损伤,体质量、结肠长度、血清IL-10、cAMP水平、外周血Treg细胞比例、结肠组织Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达显著降低,血清IL-17、IL-6、TNF-α水平、外周血中Th17比例和Th17/Treg比值、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,麦冬皂苷D低、高剂量组大鼠结肠组织显著减轻,体质量、结肠长度、血清IL-10、cAMP水平、外周血Treg细胞比例、结肠组织Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达显著升高,血清IL-17、IL-6、TNF-α水平、外周血中Th17比例和Th17/Treg比值、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);H-89可部分逆转麦冬皂苷D对炎症性肠病大鼠的治疗作用(P<0.05)。结论:麦冬皂苷D可降低IBD大鼠炎症反应和结肠组织损伤,可能是通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路实现的。

白头翁皂苷D通过调控circ_0001178/miR-885-5p对甲状腺癌细胞的生物学行为的影响

目的探讨白头翁皂苷D对甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其对circ_0001178/miR-885-5p分子轴的调控作用。方法不同浓度的白头翁皂苷D处理人甲状腺癌细胞SW579,si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics转染至SW579细胞,pcDNA-circ_0001178、anti-miR-885-5p转染至SW579细胞后加入白头翁皂苷D处理;qRT-PCR检测circ_0001178与miR-885-5p的表达量;MTT、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0001178与miR-885-5p的靶向关系。结果白头翁皂苷D可降低circ_0001178的表达量、细胞活力及N-cadherin蛋白水平(P<0.05),可抑制克隆形成数、迁移及侵袭,还可促进miR-885-5p表达及E-cadherin的表达(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染si-circ_0001178或转染miR-885-5p mimics可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;circ_0001178能够靶向调控miR-885-5p;转染pcDNA-circ_0001178或转染anti-miR-885-5p均可逆转白头翁皂苷D对细胞生物学行为的作用。结论白头翁皂苷D可通过调控circ_0001178/miR-885-5p分子轴而抑制甲状腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

不同炮制方法对桔梗皂苷D含量的影响

本研究旨在比较不同炮制方法对桔梗皂苷D含量的影响。采用HPLC-ELSD法测定不同炮制方法加工的新鲜桔梗以及桔梗饮片中桔梗皂苷D含量。结果表明,用不同炮制方法炮制桔梗饮片后,桔梗皂苷D含量依次是姜汁制>酒制>生品>百合制>米泔水制>蜜制>醋制>炒制。用不同炮制方法炮制鲜桔梗后,桔梗皂苷D含量依次是醋制>酒制>生制>姜汁制>蜜制>炒制>百合制>米泔水制。不同炮制方法对桔梗皂苷D含量有影响,在炮制过程中,不同浓度的辅料对桔梗皂苷D含量亦有影响。

米泔水制桔梗优势菌的分离鉴定及纯种发酵桔梗对桔梗皂苷D含量的影响

分离鉴定米泔水制桔梗炮制液中的优势菌,考察各优势菌发酵桔梗对桔梗皂苷D含量的影响。用米泔水炮制桔梗,利用MRS培养基分离纯化炮制液中的优势菌,通过革兰氏染色、过氧化氢酶实验及16S rDNA测序技术鉴定分离的菌株,采用单菌种发酵桔梗,通过HPLC法测定桔梗皂苷D的含量。分离获得3株乳酸菌,分别为食窦魏斯氏菌、肠球菌和假肠膜明串珠菌,3株菌纯种发酵桔梗,桔梗皂苷D的含量均高于未发酵桔梗,其中前两株菌发酵桔梗提取液中桔梗皂苷D含量分别提高了8.19%和10.72%。米泔水制桔梗炮制液中以乳酸菌为优势菌群,纯种发酵桔梗提高了桔梗皂苷D的含量,推测米泔水制桔梗过程中可能存在微生物转化进而增强其活性。

桔梗皂苷D对人骨肉瘤细胞活力、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期的影响

目的:明确桔梗皂苷D(platycodin D,PD)对骨肉瘤细胞活力、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期的影响并探讨可能机制。方法:MG63和U2OS细胞分别分为对照组和PD(6.25、12.5、25、50和100μmol/L)处理组,CCK-8法检测细胞活力并筛选处理浓度。MG63分为对照(0μmol/L)组和PD(15μmol/L)处理组,U2OS分为对照(0μmol/L)组和PD(25μmol/L)处理组,划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Hoechst 33342染色法观察细胞核形态;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;Western blot实验检测cleaved caspase-3、cleaved PARP、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p-JNK、B细胞淋巴瘤蛋白2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-ssociated X protein,BAX)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、CDK1、cyclin B1、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和p-ERK的蛋白表达水平;选取MG63进行蛋白质组测序分析。结果:与对照组比较,PD处理后,MG63和U2OS细胞的存活率、划痕愈合率和侵袭细胞数显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),且细胞出现核浓染、碎裂等现象;MG63和U2OS的细胞周期分布分别在G2/M期和G0/G1期增多;PD处理组BAX、cleaved caspase-3、cleaved PARP和p-JNK/JNK蛋白表达较对照组升高,Bcl-2、MMP-2、MMP-9、CDK4、cyclin D1、CDK1、cyclin B1和p-ERK/ERK蛋白表达较对照组降低(P<0.05)。蛋白质组测序分析显示PD作用与细胞分裂、细胞周期、局部黏附、凋亡及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路等有关。结论:PD抑制骨肉瘤细胞体外的活力、迁移、侵袭,并促进凋亡和周期阻滞,其机制可能与调控MAPK信号通路有关。

桔梗经米泔水炮制后挥发性成分及桔梗皂苷D的含量变化

目的:考察桔梗经米泔水炮制后挥发性成分及桔梗皂苷D的含量变化。方法:将桔梗生制饮片与米泔水按照100 g∶600 mL配比加入同一容器中于28℃浸泡24 h,烘干,得到桔梗炮制品,采用气相色谱-质谱测定桔梗生品及炮制品挥发油化学成分,采用高效液相色谱法测定桔梗皂苷D的含量。结果:在桔梗生品中检出22个化学成分,占挥发油总量的69.94%;在桔梗炮制品中检出20个化学成分,占挥发油总量的89.11%。生品和炮制品共有化合物11个,炮制后桔梗中新增9个化合物,减少11个化合物,共有化合物中除正三十一烷相对含量降低外,亚油酸等其他成分相对含量均有不同程度升高。桔梗经米泔水炮制后桔梗皂苷D含量明显增加。结论:米泔水炮制桔梗改变了挥发性成分及桔梗皂苷D的含量。

桔梗皂苷D对人结肠癌细胞中程序性细胞死亡配体-1表达和血管生成的影响

[目的]探讨桔梗皂苷D(PLD)对人结肠癌细胞的程序性细胞死亡配体-1(PD-L1)表达、集落形成、伤痕愈合及内皮细胞血管生成的影响.[方法]采用MTT法检测PLD对人结肠癌细胞HCT116细胞增殖的影响,蛋白免疫印迹法检测PLD对HCT116细胞中PD-L1蛋白表达的影响,细胞集落法观察PLD对HCT116细胞增殖能力的影响,划痕实验法观察PLD对细胞迁移速率的影响,小管形成实验法观察PLD对内皮细胞血管生成的影响.[结果]PLD可抑制肿瘤细胞增殖(P<0.001),以浓度和时间依赖性地抑制HCT116细胞中PD-L1蛋白的表达,抑制HCT116细胞集落的形成、迁移和内皮细胞血管的生成.[结论]PLD可抑制结肠癌HCT116细胞中的PD-L1表达,抑制HCT116细胞的增殖、迁移及血管生成.

基于PI3K/AKT/mTOR途径桔梗皂苷D对脑缺血再灌注诱导的血脑屏障的保护作用及机制研究

本研究旨在探讨桔梗皂苷D (Platycodin D,PLD)通过PI3K/AKT/mTOR途径对脑缺血再灌注诱导的血脑屏障的保护作用及机制研究。试验采用糖尿病Sprague-Dawley大鼠构建大脑中动脉闭塞模型。动物试验分组:sham组、HIR组、PLD组、3-MA组(3-甲基腺嘌呤,3-methyladenine)和PLD+3-MA组。分析各组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗塞体积和血脑屏障渗透性。透射电子显微镜观察血脑屏障超微结构变化和自噬。免疫印迹法分析紧密连接(Tight junction,TJ)蛋白(ZO-1、claudin-5和occludin)免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法,分析自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3B和p62)和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达。结果表明,PLD和自噬抑制剂3-MA治疗显著降低了脑梗死体积、脑含水量和伊文思蓝渗漏,同时增加了TJ蛋白的表达,降低了自噬相关蛋白的表达(P<0.05)。此外,PLD增加了PI3K、AKT和mTOR的磷酸化水平。PLD通过抑制自噬预防高血糖条件下,脑缺血再灌注损伤后的血脑屏障损伤,可能通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路来实现。

桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞诱导凋亡作用分析及机制研究

研究桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞诱导凋亡作用分析及机制。方法 通过HE染色结合电子显微镜观察的方法,判断细胞形态学状况;通过流式细胞学检测的方式,观察细胞凋亡情况;通过Western blot检测的方式,观察与细胞凋亡通路有关的蛋白表达;通过PCR检测法的方式,观察p53、Bcl-2、Bax mRNA表达水平;通过免疫组织检测法的方式,观察与细胞凋亡有关的蛋白。结果 相对于对照组,实验组细胞凋亡指数更高一些,实验组Survivin、Livin表达水平更低一些,实验组Caspas-9、Caspas-8、Caspas-3及Cyt-c表达水平更高一些。结论 对人移行细胞癌患者治疗时,摄入一定的桔梗皂苷D后,可通过对提升Caspas-9、Caspas-8、Caspas-3、Cyt-c及p53表达水平,降低Bcl-2表达水平,促进线粒体途径等方式,使移行细胞癌5637细胞凋亡,以此达到治疗的目的。

麦冬皂苷D的药理作用研究进展

麦冬皂苷D是从中药麦冬中提取出的甾体皂苷类成分,具有抗炎、抗肿瘤、降脂、心肌保护作用、神经保护作用、胃肠道保护、调节骨代谢等广泛的药理作用。该文对近些年麦冬皂苷D的药理作用研究进行了综述和分析,为其进一步开发提供参考。

桔梗皂苷D抗肿瘤作用机制研究进展

桔梗来源于桔梗科植物桔梗的干燥根,具有宣肺、利咽、祛痰、排脓的功效。现代研究表明,桔梗的主要活性物质桔梗皂苷D具有抗炎、抗氧化、降血脂、抗血栓、抗癌及调节免疫等多种药理作用。本文对桔梗皂苷D抗肿瘤机制的相关研究文献进行了综述,发现其主要集中在诱导癌细胞凋亡、抑制肿瘤发展、诱导癌细胞自噬、抑制癌细胞免疫逃避及抑制炎症信号通路激活等方面,体现了桔梗皂苷D多靶点、多通路的作用特点,且作为抗肿瘤药物的增效减毒剂亦有良好表现。

桔梗皂苷D减轻大鼠肾缺血/再灌注损伤

目的探究桔梗皂苷D(PD)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用。方法将大鼠分为假手术组、模型组,PD低、中和高剂量组(n=10)。模型组、低、中和高剂量组大鼠通过夹闭大鼠双侧肾蒂来建立缺血/再灌注损伤模型,假手术组大鼠进行相同的建模手术操作,但不夹闭肾蒂。建模前5 min对低、中和高剂量组大鼠分别腹腔注射12.5、25和50 mg/kg的PD。建模24 h后,检测大鼠的血清肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平,以及肾组织抗氧化标志物[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)]水平。苏木精-伊红(HE)染色评价肾组织病变。免疫组织化学染色检测肾组织caspase-3的表达,通过caspase-3阳性的细胞数量来评估肾小管上皮细胞的凋亡指数。RT-qPCR检测肾组织炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-10的mRNA表达。Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、p65、p-p65、核因子κB(NF-κB)抑制因子(IκB)和p-IκB的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠的肾脏病变程度、血清Cr和BUN水平、肾小管上皮细胞的凋亡指数均升高(P<0.05)。与模型组大鼠相比,低、中和高剂量组大鼠的肾脏病变程度、血清Cr和BUN水平、肾小管上皮细胞的凋亡指数均降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠的肾组织中MDA水平、IL-1β和IL-6的mRNA水平和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达水平均升高,SOD和GSH-Px水平以及IL-10的mRNA水平均降低(P<0.05)。与模型组大鼠相比,低、中和高剂量组大鼠的肾组织中MDA水平、IL-1β和IL-6的mRNA水平和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达水平均降低,SOD和GSH-Px水平以及IL-10的mRNA水平均升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D对大鼠肾缺血/再灌注损伤有保护作用,其机制可能与提高抗氧化能力和抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

桔梗皂苷D增强人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa对奥沙利铂的敏感性

目的探讨桔梗皂苷D对人直肠癌耐药细胞株SW1463/奥沙利铂(Oxa)化学治疗敏感性的增强作用。方法取人直肠癌细胞系SW1463,建立稳定的耐奥沙利铂细胞株SW1463/Oxa。将构建成功的人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa随机分为桔梗皂苷D组、Oxa组、桔梗皂苷D+Oxa组和对照组。MTT法检测细胞增殖曲线;RT-qPCR检测脱氧核糖核酸甲基转移酶3a(DNMT3a)、磷酸化组蛋白γ-H2AX、DNA双链修复蛋白RAD51、信号传导子和转录激活子3(STAT3)信使核糖核酸(mRNA)表达;Western blot检测细胞DNMT3a、γ-H2AX、RAD51、STAT3蛋白表达及磷酸化STAT3(p-STAT3)水平。结果成功构建人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa;与对照组和Oxa组比,桔梗皂苷D组和桔梗皂苷D+Oxa组细胞增殖能力、DNMT3a、RAD51、STAT3 mRNA和蛋白表达以及p-STAT3水平降低(P<0.05),γ-H2AX mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D能增强人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa对Oxa的化疗敏感性,推测是通过抑制DNMT3a、RAD51、STAT3的表达,促进γ-H2AX的表达实现此作用的。

基于网络药理学和实验验证探讨麦冬皂苷D治疗肺纤维化的作用机制

目的运用网络药理学预测麦冬皂苷D(Ophiopogonin D,OPD)抗肺纤维化潜在作用机制,进一步通过小鼠体内实验进行验证。方法本研究通过数据挖掘发现麦冬为治疗气阴两虚型肺纤维化使用频率最高的中药,为探究其物质基础,对其进行网络药理学分析。通过博来霉素构建肺纤维化小鼠模型,并给予不同浓度的OPD干预治疗,验证网络药理学结果。结果首先通过网络药理学分析发现,线粒体自噬可能是麦冬发挥抗肺纤维化作用的潜在靶点,同时对网络图拓扑学分析发现,活性成分麦冬皂苷D与线粒体自噬关系最大。动物实验发现,OPD能缓解小鼠肺纤维化,减少胶原沉积;同时对线粒体自噬相关蛋白检测发现,该化合物能够增加肺组织中PINK1、Parkin蛋白的表达,减少p62蛋白含量,降低细胞内ROS水平。结论OPD通过促进肺组织中PINK1/Parkin依赖的线粒体自噬,改善线粒体功能发挥抗肺纤维化作用。

麦冬皂苷D对小鼠力竭游泳抗疲劳作用的研究

目的通过力竭游泳构建小鼠疲劳模型,观察麦冬皂苷D的抗疲劳作用。方法本次实验共分3批进行。第1批ICR小鼠随机分为空白对照组,游泳模型组,麦冬皂苷D低(20 mg·kg^(-1))、中(40 mg·kg^(-1))和高(60 mg·kg^(-1))剂量组,在连续灌胃给予受试药物1周后,第7天通过负重游泳实验评价抗疲劳活性,次日通过非负重游泳实验测定血清肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TRIGL)和尿素氮(UREAL)。第2、3批小鼠按上述剂量给药1周后进行非负重游泳实验,采用血乳酸检测等技术手段,分析麦冬皂苷D高、中、低剂量对小鼠体重、血乳酸、肝糖原的影响。结果与游泳模型组比较,灌胃麦冬皂苷D的小鼠负重游泳时间延长、肝糖原含量升高、血清CK水平下降、血清TRIGL含量升高、游泳后血乳酸曲线下面积下降,上述指标均有统计学意义(均P<0.05);血清UREAL下降,但无统计学差异(P>0.05)。结论麦冬皂苷D能明显增强小鼠运动耐力,并显著减少小鼠体内的乳酸堆积,增加肝糖原储备。

桔梗皂苷D对大鼠溃疡性结肠炎的改善作用及对TLR4/NOD信号通路蛋白表达的影响

【目的】探讨桔梗皂苷D对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及机制。【方法】将50只大鼠随机分为5组,包括正常组,模型组,桔梗皂苷D低、中、高剂量组,每组10只。除正常组大鼠给予蒸馏水饮用外,其他组大鼠通过在饮用水中施加5%硫酸葡萄糖钠(DSS)连续7 d诱导构建溃疡性结肠炎模型。实验第2~8周,桔梗皂苷D低、中、高剂量组大鼠分别灌胃10、25、50 mg·kg^(-1)·d^(-1)桔梗皂苷D混悬液,正常组和模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水。给药期间,观察大鼠一般情况。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠组织病理形态并进行组织学评分,Western Blot法检测结肠组织Toll样受体4(TLR4)/核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)通路相关蛋白TLR4、髓样分化因子88(MyD88)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达水平。【结果】(1)与正常组比较,模型组大鼠体质量、生存率、结肠长度和结肠质量均显著降低,疾病活动指数(DAI)评分显著升高(均P<0.01);与模型组比较,桔梗皂苷D低、中、高剂量组大鼠体质量、生存率、结肠长度和结肠质量均显著升高,DAI评分显著降低,其中,桔梗皂苷D中剂量组差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2)与正常组比较,模型组结肠组织病理学评分升高(P<0.001);与模型组比较,桔梗皂苷D低、中、高剂量组结肠组织病理学评分均显著降低(P<0.05或P<0.01)。(3)与正常组比较,模型组中TLR4、MyD88和NLRP3的蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,桔梗皂苷D中剂量组的TLR4、MyD88和NLRP3蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】桔梗皂苷D可改善大鼠溃疡性结肠炎,其机制与通过TLR4/NOD信号通路缓解肠道炎症有关。

重楼皂苷D激活Hippo通路抑制多形性胶质母细胞瘤细胞增殖与侵袭

目的探讨重楼皂苷D(polyphyllin D,PPD)抑制多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)恶性生物学行为的分子机制。方法使用的细胞模型为DBTRG-05MG(DBTRG)和A172细胞株。将PPD处理后的细胞,通过MTT实验、实时无标记细胞分析技术(real-time cellular analysis,RTCA)和集落形成实验检测PPD对细胞存活能力的影响;流式细胞术、DAPI染色、Westernblot检测PPD对细胞凋亡的影响;Transwell细胞侵袭实验和RTCA测定PPD对细胞侵袭能力的影响;划痕愈合实验和高内涵成像分析系统测定PPD对细胞迁移能力的影响;Westernblot测定PPD所导致的Hippo信号通路相关蛋白质的表达以及蛋白质的磷酸化水平的变化;通过Caspase-3抑制剂(Z-DEVDFMK,Z-DEVD)与PPD共处理明确Caspase-3对MST1的激活作用;利用分子对接研究PPD与Caspase-3在三维空间的相互作用;通过靶点稳定性药物亲和反应实验明确PPD与Caspase-3的直接结合。结果PPD对GBM细胞的增殖具有显著的抑制能力。PPD能够诱导GBM细胞发生凋亡。PPD处理组的GBM细胞侵袭、迁移能力显著下降。PPD能够下调YAP蛋白及其下游靶基因Cyr61、c-Myc的转录,促进YAP上游信号分子LATS1、MST1的磷酸化,表明PPD能够激活GBM细胞中的Hippo信号通路。Z-DEVD能够拮抗PPD对MST1的磷酸化,表明PPD通过激活Caspase-3进而激活Hippo信号通路。分子对接模拟发现PPD能够在C-末端区域与Caspase-3结合;基于靶点稳定性的药物亲和反应实验表明PPD阻碍了蛋白酶pronase对Caspase-3的水解作用,表明PPD与Caspase-3具有直接结合作用。结论PPD通过靶向Caspase-3激活Hippo信号通路抑制GBM细胞增殖、侵袭和迁移并诱导凋亡。

麦冬皂苷D抗心血管疾病作用机制研究进展

心血管疾病是一类累及心脏或血管的复杂疾病,其主要类型包括冠心病、风湿性心脏病、外周动脉疾病、脑血管疾病、中风,是死亡的主要原因。目前以西药治疗为主,不良反应多,预后不佳。麦冬为百合科植物麦冬的干燥块根,具有养阴生津、润肺清心的功效。麦冬皂苷D是从麦冬中提取的一种皂苷类成分。已有研究表明,麦冬皂苷D有保护心肌细胞、血管内皮细胞,改善脂代谢、糖代谢、改变肠道微生物群的作用,其主要通过减轻氧化应激,改善内质网应激,对抗线粒体凋亡,减轻炎症反应,稳定Ca^(2+)稳态等机制发挥作用。目前,麦冬皂苷D在治疗心血管疾病方面已进行了多项研究,并取得了一定的成果,本文通过总结近年来麦冬皂苷D治疗心血管疾病的相关实验研究成果,并根据其体内外药理作用及作用机制进行分类叙述,以期为麦冬皂苷D作为治疗心血管疾病潜在药物提供理论依据,亦为其治疗心血管疾病的进一步机制研究提供参考。

桔梗皂苷D对大鼠急性脑梗死后神经功能障碍和认知功能障碍的改善作用

目的探索桔梗皂苷D对大鼠缺血性卒中后神经功能障碍和认知功能障碍的保护作用及其机制。方法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随后利用桔梗皂苷D的治疗研究其对脑缺血/再灌注损伤后神经功能障碍和认知功能障碍的保护作用。动物随机分为伪手术组,急性脑梗死组,急性脑梗死低剂量桔梗皂苷D治疗组,急性脑梗死高剂量桔梗皂苷D治疗组。治疗10 d后,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色用于测量脑缺血体积。采用Longa评分法行神经学检查和Morris水迷宫试验评估神经功能和认知功能。通过免疫荧光检测轴突蛋白MAP2表达量和利用Western blot检测脑组织中铁死亡相关蛋白的表达。结果桔梗皂苷D的治疗能有效减少MCAO大鼠脑缺血体积,改善神经功能,提高记忆和学习能力。桔梗皂苷D上调了海马组织中MAP2蛋白的表达,伴随着铁死亡相关通路蛋白的抑制及铁含量的降低。结论桔梗皂苷D治疗改善MCAO大鼠的神经功能和认知功能缺损,其潜在的作用机制与其对铁死亡信号通路的调节有关。本研究将为缺血性卒中的治疗提供新的途径。

基于HPLC/TLC法建立桔梗颗粒中甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D的快速指认方法

采用HPLC法和TLC法相结合,建立中成药桔梗颗粒中甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D等关键有效成分的快速色谱指认方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC),以色谱指纹指认的方法,确认桔梗颗粒中的绿原酸与甘草酸铵,而色谱柱则运用InertSustain C18柱,参数为4.6 I.D. x 250mm、5μm;流动相采用乙腈-0.05%的磷酸溶液,在梯度洗脱工作开展之时,检测波长选定237nm,控制流速为1mL/min;对桔梗颗粒中桔梗皂苷D采用薄层色谱法(TLC)来完成色谱指认,准备10μl的桔梗颗粒阴性、桔梗皂苷和吸取桔梗颗粒供试品溶液,在相同的硅胶G波层板上点滴后,放置在三氯甲烷、甲醇、水的混合下层溶液中,控制三者的比例为13:7:2。之后进行展开、去除、晾干,喷涂10%硫酸乙醇溶液,加热至温度105℃,当发现斑点清晰显色后,分别放置在日光、365nm紫外线灯下检测,明确色谱出现和桔梗皂苷D对照品的斑点颜色。结果 桔梗颗粒供试品溶液同甘草酸铵、绿原酸标准对照品的溶液,在色谱图位置上相同,存在相同的保留时间色谱峰;而TLC结果显示,在波层板上,供试品与对照品在对应位置上存在同色斑点。结论 使用该方法获得的结果准确可靠,且操作相对便捷,可作为桔梗颗粒中关键有效成分甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D的快速指认检测方法。