TRPV6在人参二醇组皂苷(PDS)减轻LPS休克脑损伤中表达的变化及意义

目的通过观察人参二醇组皂苷(PDS)对TRPV6蛋白的影响,探讨PDS对LPS诱导休克时脑损伤的保护机制。方法将大鼠随机分为对照组、LPS休克(LPS)组、地塞米松(LPS+Dex)组、PDS低剂量(LPS+PDSL)组、PDS中剂量(LPS+PDSM)组及PDS大剂量(LPS+PDSH)组。大鼠静脉注射LPS(4 mg/kg)4 h后,观察各组大鼠生存期,计算生存率,Western Blot检测大脑皮质中TRPV6和Bcl-2的蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组大鼠生存率降低达50%,脑皮质中TRPV6的蛋白表达水平明显降低,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值降低;而与LPS组相比,LPS+Dex组和LPS+PDS各组大鼠生存率增加,脑皮质中TRPV6的蛋白表达水平明显增高,Bcl-2/Bax比值也增高。结论PDS减轻LPS诱导的脑损伤,可能与上调脑皮质中TRPV6蛋白有关。

桔梗皂苷-D诱导肺腺癌A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞

目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡作用;Hoechst-33258荧光染色观察细胞核形态的变化;Western-blot蛋白印迹法分析凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:MTT检测结果显示,PD对A549和A549/DDP细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性。Hoechst 33258荧光染色发现,随着PD浓度增加,两种细胞核形态都有明显的改变。进一步流式细胞术结果表明,PD诱导A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞。Westernblot检测结果表明,PD通过上调Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3和PARP的表达,下调Bcl-2和Caspase-3的表达诱导A549和A549/DDP细胞凋亡。此外,PD通过下调Cyclin-D1、Cyclin-D3、CDK4、CDK6、E2F1和p-Rb及上调P18的蛋白水平诱导A549细胞周期G0/G1阻滞。同时,PD通过下调Cyclin-B1、p-Cdc2、E2F1和p-Rb及上调P27的蛋白表达诱导A549/DDP细胞周期G2/M阻滞。结论:PD通过线粒体途径诱导A549和A549/DDP细胞凋亡诱导,并且引发A549细胞G0/G1周期阻滞和A549/DDP细胞G2/M阻滞周期阻滞。

人参二醇组皂苷对不同龄大鼠LHmRNA表达的影响

目的 :从分子水平探讨人参二醇皂苷促进机体血浆睾酮水平增高的发生机制。方法 :采用不同龄雄性大鼠 ,随机分为人参二醇皂苷实验组和生理盐水对照组 ,提取大鼠脑垂体总RNA ,以LH—β为探针 ,进行Dotblot杂交。结果 :a 经PDS灌胃大鼠 ,无论是幼龄组还是成龄组大鼠脑垂体LH—βmRNA表达均强于其同龄对照组 ,尤其是幼龄组 ,两组间比较有显著差异。b 3周龄PDS组大鼠睾丸重量较同龄对照组增加 15%。结论 :人参二醇皂苷可促进雄性大鼠脑垂体LH—βmRNA表达增强 ,表明垂体促性腺细胞内LH—βmRNA含量增高 ,后者可通过垂体性腺轴系统发挥作用而促进血中睾酮水平增加。

一测多评法同时测定预知子中4种三萜皂苷

目的建立同时测定预知子中多种三萜皂苷成分的一测多评质量控制方法。方法采用Alltech Apollo C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈和0.1%的磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;以常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷PD,saponins PD)为内标物,考察在不同色谱柱、流动相系统、HPLC仪器条件下,皂苷PD,与常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷X,saponin X)、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷B,saponin B)、常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷A,saponin A)之间的相对校正因子,并利用该相对校正因子(RCF)计算皂苷X、皂苷B和皂苷A量。采用外标法同时测定药材中该4种成分的量,将测定值与计算值进行多种统计学检验,以验证该质控方法的准确性和可行性。结果在不同的条件下,预知子中皂苷PD与皂苷X、皂苷B及皂苷A的相对校正因子重现性良好,(RSD=0.70%、0.56%、0.59%),RCF分别为1.180、1.045、0.893。10批预知子中皂苷X、皂苷B及皂苷A的计算值与外标法实测值相比没有显著性差异(P>0.05)。结论采用一测多评法控制预知子的质量是准确的、可行的。

HPLC-ELSD测定不同产地预知子中四种皂苷的含量

目的：采用HPLC-ELSD测定预知子中常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷X,saponins X）,常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷B,saponins B）,常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷P D,saponins P D）,常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷A,saponins A）的含量。方法：采用安捷伦1100手动高效液相色谱仪,色谱柱为Cosmosil-C18ODS色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm）,ELSD检测器,流动相乙腈-0.2%甲酸水（45∶55）,体积流量1.0 mL·min-1;蒸发光散射检测器检测参数：漂移管温度98℃,氮气流量2.8 L·min-1。结果：皂苷X,皂苷B,皂苷P D,皂苷A进样量在2~10μg线性关系良好（R2分别为0.999 0,0.999 0,0.999 1,0.999 1）。平均回收率（n=6）分别为96.8%,101.9%,99.3%,100.5%;RSD分别为0.9%,1.2%,0.7%,1.3%。结论：该方法简单,分离效果好,结果准确,可用于预知子药材中皂苷X,皂苷B,皂苷P D,皂苷A的含量测定。