原位肝移植术后早期高BNP的影响因素及Nomogram模型的构建

分析原位肝移植术后早期高BNP的危险因素,并构建Nomogram模型。回顾性收集山东第一医科大学第一附属医院2019年11月至2023年7月136例原位肝移植受者的临床资料。根据受者术后3d内BNP峰值水平分为低BNP组(A组,n=77)和高BNP组(B组,≥400 pg/mL,n=59)。采用Logistic回归分析筛选肝移植术后高BNP的危险因素。使用R软件建立列线图预测模型,并计算一致性指数(Cindex),绘制ROC曲线以及绘制校准曲线。结果显示,手术时间、术中输红细胞量、术前BNP、术后3 d内NTproBNP升高是肝移植术后早期高BNP的独立危险因素。根据独立危险因素构建Nomogram模型,经一致性检验模型预测能力强(C-index=0.900,SD=0.010,Z=8.020,P<0.05)。ROC曲线下面积(AUC)为0.900,灵敏度为82.4%,特异度为90.9%。校准曲线显示,模型预测准确性较好。基于手术时间、术中输红细胞量、术前BNP、术后3 d内NTproBNP构建的预测原位肝移植术后早期高BNP的Nomogram模型,可提高预测原位肝移植术后早期高BNP的准确性。

神经母细胞瘤肝及肾上腺移植模型比较

目的 建立神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)肝移植模型,并与肾上腺原位移植模型进行比较,探索模型的特征。方法 采用微量注射针将含有5×10^(5)(SK-N-SH)细胞溶液沿肝叶长轴种植于小鼠肝左叶,造模结束后检测肿瘤的生长、转移情况、相关基因表达及肿瘤组织病理学变化。结果 小鼠接种肿瘤细胞21 d后成瘤率达100%,肿瘤的生长、转移、相关基因表达及病理特征明显。结论 本文通过更为简单的手术造模方法,成功构建了一种神经母细胞瘤肝移植模型,为NB研究者今后科学实验提供了更多理想的模型选择。

人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立

目的 :建立人肝癌裸鼠皮下 -肝原位移植瘤模型。方法 :先用组织学完整的新鲜人肝癌组织接种于裸鼠皮下 ,形成皮下移植瘤 ,然后用此移植瘤组织再接种于裸鼠肝内 ,建立肝原位移植瘤模型 (间接肝原位移植瘤模型 ) ,并将其与直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型作比较。 结果 :建立的间接肝原位移植瘤模型能稳定传代 ,移植瘤存活率达 10 0 % ,自发转移率达 5 7.8%。与直接肝原位移植瘤模型比较 ,该模型移植瘤存活率明显高于后者 (35 .6 % ,P<0 .0 1) ;与皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型比较 ,该模型局部侵袭率 (10 0 % )和自发远处转移率 (5 7.8% )明显高于皮下移植瘤模型 (14.5 % ,P<0 .0 1;37.1% ,P<0 .0 5 )和腹腔内移植瘤模型 (18.0 % ,P<0 .0 1;39.3% ,P<0 .0 5 )。 结论 :人肝癌裸鼠皮下 -肝原位移植瘤模型具有高存活率、高侵袭率和高转移率的优点 。

人肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植模型的建立及生物学特性的研究

目的 探讨肝恶性淋巴瘤发病机制，为实验治疗提供工具。方法 采用人肝恶性淋巴瘤术中新鲜组织块分别植入裸小鼠肝实质内和肩胛间皮下，观察原位移植和皮下移植成瘤率，移植瘤的侵袭、转移；并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学[甲胎蛋白（AFP）、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乳酸脱氢酶（LDH）]榆测，染色体核型和流式细胞分析。结果在裸小鼠体内建成了同一人体瘤源人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型（HLBL-0102）和皮下移植模型（HLBL-0103）。移植瘤的病理组织学为肝非霍奇金B细胞性恶性淋巴瘤。免疫组织化学显示：CD19、CD20、CD45RO、CD79a阳性，CD3、CD7阴性。血清学AFP阴性，HBsAg阳性，LDH 1267．5U／L。染色体众数范围55～59条。移植瘤细胞DI值1．57～1．61，均为异倍体。HLBL-0102和HLBL-0103分别传至37代和31代，共移植裸鼠383只。肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HLBL-0102移植瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长，瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉，无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结被累及。HLBL-0103在裸鼠皮下呈结节状局部生长。结论 HLBL-0102和HLBL-0103是首次建立成功的人肝恶性淋巴瘤裸鼠移植模型，完整地模拟了人肝恶性淋巴瘤患者的临床过程，为研究肝恶性淋巴瘤发病机制和实验治疗提供了理想的动物模型。

人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立

目的:使用α-氰基丙烯酸烷基酯建立人肝癌-裸鼠皮下肝原位移植瘤模型。方法:培养对数生长期的BEL-7402人肝癌细胞,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后再移植于裸鼠肝内,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立肝原位移植瘤模型(间接肝原位移植瘤模型)。结果:成功的利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立了间接肝原位移植瘤模型。移植瘤成功率达93.3%。结论:与传统的肝原位移植瘤模型制作方法比较,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立间接肝原位移植瘤模型方法简便,成功率高,便于推广使用。

中药复方WCAP及拆方对人胰腺癌皮下移植瘤裸小鼠模型及IL⁃6/STAT3信号通路的影响

目的观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响。方法建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平。结果①与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05)。②与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的mRNA表达均降低(P<0.05)。③与空白对照组比较,5-FU组、复方组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因涉及的c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2蛋白表达均降低(P<0.05),软坚散结组c-myc、MMP-2和IL-6蛋白表达均降低(P<0.05)。结论WCAP复方可抑制人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤的生长,其机制与抑制IL-6/STAT3通路并调节其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的表达水平有关;与各拆方相比,WCAP复方在抑瘤率、小鼠体质量及IL-6/STAT3通路及其下游靶基因调控方面作用更好。

人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及生物学特性的研究

目的为探讨肝原发性恶性淋巴瘤发病机制和为实验治疗提供动物模型.方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜组织块植入裸小鼠肝实质内,观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移,并进行形态学(光镜、电镜、免疫组织化学)、血清学(AFP、乙型肝炎HBsAg、LDH)、染色体核型和流式细胞仪分析.结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型(命名为HLBL-0102).移植瘤的病理组织学为肝原发性(非霍奇金B细胞性)恶性淋巴瘤,免疫组织化学显示,CD19、CD20、CD45RO、CD79a阳性,CD3、CD7阴性,血清学AFP阴性,HBsAg、HBsAb、HBeAb及 HBcAb均为阳性,LDH 1 267.5U/L.染色体众数范围55～59条;移植瘤细胞DI值1.57～1.61,均为异倍体.目前该瘤株在裸鼠体内生长3年,已经传至37代,共移植裸鼠283只;肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.人肝原发性恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长,瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉,无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及.原位移植瘤组织经病理学和超微结构观察,流式细胞仪DNA含量测定及染色体核型的分析,结果表明与来源人肝原发性恶性淋巴瘤细胞相一致.结论 HLBL-0102是首次建立成功的人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,完整地模拟了人肝原发性恶性淋巴瘤患者的临床过程,为研究肝原发性恶性淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型.

Suramine对人结肠癌的裸鼠皮下移植瘤和SCID小鼠原位种植肝转移之生长、转移及肿瘤血管形成的抑制作用

Suramine是最近发现的一个血管形成抑制剂,它是一个含有多硫基萘基脲的多价阴离子复合物,Suramine钠盐分子量为1429.2,结构式如下。

原位移植法建立肝脏H22肝癌细胞移植瘤小鼠模型

目的:建立H22肝癌细胞小鼠肝脏原位移植瘤模型,为进一步开展相关实验研究做准备。方法:直接注射一定数量的H22肝癌细胞于C57BL/6小鼠肝脏左叶,构建肝癌原位移植瘤模型。结果:术后7天小鼠肝脏表面出现大小不一结节散在分布,随着时间延长结节增多增大,后期腹腔脏器出现浸润、粘连,腹水增多。肝脏瘤组织及癌旁组织进行组织病理学检查,肝脏原位成瘤率100%,无自发消退。结论:原位注射H22肝癌细胞株能在肝脏局部形成原位移植瘤,且成瘤时间相对较短,成瘤过程中伴有脏器转移、腹水形成等,较好的模拟了机体原发性肝癌的病理生理学过程,能满足对肝癌相关研究的要求。

肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测

目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性。方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型。结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6％,自发转移率为81.8％;大量腹水发生率为40.9％,自发消退率为0％。模型平均自然生存期为28d,约移植14d后进入快速增殖期。结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型。

菌群移植对氟尿嘧啶抗鼠源结肠肿瘤的协同作用

目的:观察菌群移植对氟尿嘧啶抑制结肠癌MC38荷瘤小鼠移植瘤生长的协同作用效果。方法:选取雌性C57BL/6N小鼠21只作为研究对象,分为空白组、对照组、实验组。培养MC38小鼠结肠癌细胞接种于小鼠右前肢背部皮下构建结肠癌荷瘤模型。空白组无任何处理,取其粪便制作干预菌液,实验组和对照组自分组后每两天1次给予0.1 mL菌液/生理盐水灌胃至实验结束。成瘤后第6天,按照65 mg/kg剂量连续5天腹腔注射氟尿嘧啶,3天后处死实验动物,计算肿瘤体积和抑瘤率。采用HE染色观察结直肠组织情况。采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子Alpha(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)血清水平,通过16S测序进行肠道菌群检测和分析。结果:与空白组相比,实验组和对照组模型小鼠体重均明显降低(P<0.05),但对照组和实验组体重变化未见明显差异(P>0.05)。对照组荷瘤平均体积大于实验组荷瘤平均体积(P<0.05)。与对照组相比,实验组结直肠组织病理镜下可见更多的隐窝细胞,绒毛更完整。实验组IL-6血清水平高于对照组和空白组(P<0.05);实验组和对照组TNF-α血清水平与空白组相比升高明显(P<0.05),但实验组和对照组差异无统计学意义(P>0.05)。16S测序结果提示自体菌群移植干预后,实验组肠道菌群更接近空白组,对照组菌群丰富度最低,但三组未见明显区别(P>0.05)。进一步分析三组菌群差异,发现在属(Genus)水平上,与空白组相比,实验组的Mar-Odoribacter和Tan-Parabacteroide富集增多,对照组Ent-Escherichia-Shigella富集增多。结论:菌群移植后上调Mar-Odoribacter和Tan-Parabacteroide菌,下调Ent-Escherichia-Shigella菌,可保护肠道黏膜,改善机体代谢,激活机体免疫系统,促进了IL-6和TNF-α细胞因子表达,提高抗肿瘤免疫能力,对氟尿嘧啶抑制MC38荷瘤小鼠移植瘤增殖起到了协同作用。

原位肝移植治疗肝脏上皮样血管内皮瘤(附2例报告及文献复习)

目的探讨原位肝移植治疗肝脏上皮样血管内皮瘤(EHE)的疗效及相关治疗进展。方法回顾性分析2例肝脏EHE患者的临床资料。例1为肝脏广泛多发EHE合并脾脏多发梗死灶的患者,实施了原位肝移植+脾切除术;例2为肝脏多发EHE患者,仅实施了原位肝移植。结合国内外文献,分析肝脏EHE患者的病理学特点、肝移植治疗及预后情况。结果两例患者手术过程顺利,均康复出院。病理结果证实为肝脏EHE,例1合并脾脏EHE。例1术后1个月抗排斥反应药由他克莫司换为西罗莫司,术后4个月EHE复发,给予卡培他滨口服化学药物治疗(化疗);术后6个月考虑肝脏EHE复发并多发性骨转移,予索拉非尼口服抗肿瘤治疗,术后7个月患者死于恶病质、肝衰竭。例2随访至投稿日(术后8个月),未见术后相关并发症及肿瘤复发迹象。国内外文献报道提示肝脏EHE首选手术切除,肝内广泛多发而无法手术切除者,甚至有肝外病灶者,肝移植疗效最佳。另外,化疗、经皮穿刺肝动脉化疗栓塞和抗血管生成治疗对本病也有一定疗效。结论肝脏EHE治疗首选手术切除,对于肝内广泛多发者,肝移植被认为是最佳的治疗选择。应重视肝脏EHE移植术后复发的防治,以期进一步提高该病的疗效。

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进

目的:改进两套袖法大鼠原位肝移植模型,研究其手术成功率和远期存活率.方法:在Kamada两套袖法基础上,着重对供肝分离、灌注、肝上下腔静脉切取,肝上下腔静脉吻合,胆管吻合等手术方法作了进一步改进.结果:改进方法共施行手术80次,与以往92次传统手术法相比,供体手术时间(24.3±3.2)min和受体手术时间(56.4±5.0)min缩短(P<0.05),48h存活率91.3%(73/80)和1wk存活率87.5%(70/80)明显提高(P<0.05).结论:改进的两套袖法大鼠原位肝移植能明显提高供肝的质量和受体手术成功率.

大鼠原位肝移植模型的建立及术式改进

目的 探讨用双袖套法建立大鼠原位肝移植模型的手术改进方法。 方法 在 Kamada等的袖套法吻合血管的基础上进行改进 ,供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注 ,肝上下腔静脉用缝合法吻合 ,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合 ,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合下进行原位肝移植 36 0例 (次 )。 结果 施行大鼠原位肝移植其供体手术时间 (31.2± 5 .0 )分钟 ,供肝修整时间 (12 .0± 3.0 )分钟 ,受体手术时间 (45 .0± 5 .5 )分钟 ,无肝期 (2 0 .0± 2 .5 )分钟 ,手术死亡 31例 ,其中出血 12例 ,肝下下腔静脉血栓 8例 ,肝上下腔静脉回流不畅 7例 ,袖套扭转或脱落 4例。术后成活 2天以上 32 9例 ,成活率为 91.4 %。非干预组 (非药物治疗组 ) 1周存活率达 86 .5 %。 结论 改进的大鼠原位肝移植术操作简便 ,手术成功率高 ,可作为肝移植实验可靠、稳定的动物模型。

人肝癌裸小鼠原位移植模型的建立与鉴定

人肝癌裸小鼠原位移植模型的制备，是将肿瘤切除标本先接种到裸小鼠（ＢＡＬＢ／ＣＡ）皮下，待移植瘤稳定传代后，再植入同种裸小鼠肝内。皮下和原位移植瘤经光镜、电镜观察均保留人肝癌组织形态学特点。免疫组化染色显示人ＡＦＰ及ＨＢｓＡｇ阳性，细胞图像分析ＤＮＡ含量呈异倍体。但是肝癌最具特征性的生物学行为，如腹腔浸润转移、腹水等表现仅见于原位移植瘤模型。本模型的建立方法实用可靠。同时表明原位移植瘤模型在肝癌研究中更为理想。

人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

人胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及其生物学特性的研究

为探讨胃恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。将 11例胃恶性淋巴瘤新鲜组织移植裸鼠胃粘膜下层 ,观察原位移植成瘤率 ,移植瘤的侵袭和转移 ,及其形态学特征 (光镜 ,电镜 ,免疫组化)。从 11例胃恶性淋巴瘤标本中筛选出 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型和 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 ,分别传至 36代和 2 7代 ,共移植裸鼠 32 9只。自第 3代起移植成瘤率及液氮冻存复苏成活率均为 10 0 %。出现淋巴道、血道及种植转移。原位移植瘤的病理组织学、超微结构、DNA含量测定及染色体核型分析结果均与来源人胃恶性淋巴瘤相似。人胃恶性淋巴瘤在裸鼠胃内自主生长 ,浸润破坏胃壁各层组织结构。表明此模型可用于胃恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭。