皮卡佐剂及其治疗性疫苗作用机理

皮卡是人用安全的疫苗佐剂,是双链聚肌苷酸聚胞苷酸及微量卡那霉素和氯化钙的复合物。该佐剂是三种模式识别受体TLR3、NOD和RIG-1的配体。皮卡佐剂疫苗与受体结合后在体内活化非特异免疫,包括巨噬细胞吞噬功能,促进干扰素(IFN)、白细胞介素-2(IL-2)、-6、-12、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子的产生,促进产生共刺激因子CD40、CD80、CD86,促进抗原呈递细胞的提呈、活化T淋巴细胞,促进特异性的细胞免疫和体液免疫应答,促进免疫细胞的增殖。皮卡佐剂不仅提高疫苗的免疫原性,更由于促进干扰素、白细胞介素-2、-12的产生,使从主要产生体液免疫的预防性疫苗转变成具有强烈细胞免疫的治疗性疫苗。在三次独立的先感染后免疫的暴露后小白鼠和比格犬的试验中,在没有接种抗血清情况下,国内外市售人用狂犬病疫苗保护率仅为20%~30%,而皮卡狂犬病疫苗可高达70%~100%,统计学分析具有显著的差异(P <0.05~0.01)。皮卡狂犬病治疗性疫苗和皮卡乙肝治疗性疫苗正在新加坡进行1期临床研究。

HPLC法测定人用皮卡狂犬病疫苗和皮卡佐剂中硫酸卡那霉素的含量

目的:建立测定人用皮卡狂犬病疫苗和皮卡佐剂中硫酸卡那霉素含量的HPLC方法。方法:色谱柱为CAPCELL PAKC8 DD(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液(0.02 mol.L-1,pH 7.5)-甲醇-乙腈(23∶7∶40);流速为1.0mL.min-1;柱温为45℃;采用柱前衍生化法,衍生化试剂为2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS);检测波长为350 nm。结果:在0.01～1.0 mg.mL-1范围内,硫酸卡那霉素的浓度与峰面积呈现良好的线性关系(A=3×106C-3313.9,r=1.000,n=7);在80%,100%,120%3个浓度下的平均回收率(n=3)分别为82.5%(RSD=1.6%),90.3%(RSD=2.0%),81.6%(RSD=1.8%);方法的最低检测限为0.41μg.mL-1;最低定量限为1.39μg.mL-1;供试品溶液在8 h内稳定(RSD=1.1%)。结论:本方法准确、快速,通用性良好。

皮卡佐剂狂犬病治疗性疫苗对暴露后实验动物和人体免疫记忆的效果

目的检测皮卡佐剂狂犬病疫苗对暴露后实验动物免疫治疗作用和对人的免疫记忆效果。方法模仿人体暴露后免疫，对小白鼠和Beagle犬进行了先感染狂犬病毒野毒株病毒再用不同狂犬病灭活疫苗免疫，观察保护效果；对犬咬伤志愿者用皮卡佐剂狂犬病疫苗免疫2．5年后分离外周血单个核细胞，用流式细胞仪检测干扰素免疫记忆细胞数量。结果在法国巴斯德研究所、武汉生物制品研究所、军事医学科学院军事兽医研究所三次独立实验结果均显示在没有联合应用抗狂犬病免疫球蛋白的情况下，国内外市售人用狂犬病疫苗保护率为0％-30％，皮卡佐剂狂犬病疫苗保护率为70％～100％，统计学分析有极其显著的差异。暴露后志愿者用皮卡佐剂狂犬病疫苗免疫，2．5年后外周血单个核细胞仍能检出显著高的分泌IFN-γ细胞数量，显示对人体免疫特别是细胞免疫记忆反应良好。结论与市售狂犬病疫苗相比，皮卡佐剂狂犬病疫苗对暴露后实验动物具有显著地治疗作用，在人体中用也具有良好的免疫记忆效果。

皮卡佐剂狂犬病疫苗的有效性

皮卡佐剂狂犬病疫苗已取得国家临床研究批件。在暴露后免疫中,即使未同时接种抗血清,皮卡佐剂狂犬病疫苗也具有良好的保护效果,明显优于无佐剂的市售疫苗。因此,皮卡佐剂狂犬病疫苗有可能发展为一种治疗性疫苗,在无法实施抗血清接种时,用于Ⅲ度暴露后咬伤患者的免疫。本文就有关该疫苗的有效性作一综述,包括皮卡佐剂狂犬病疫苗的非特异性免疫功能及在动物体内的体液免疫和细胞免疫应答。