在体研究皮层扩散性抑制动物模型的评价

目的建立大鼠皮层扩散性抑制(CSD)动物模型,并研究其光学成像和电生理特性,为进一步的研究奠定基础。方法采用SD大鼠,在大鼠颅骨上分别钻磨出诱导窗口和观测窗口,分别用针刺和5mol/LKCl在诱导窗口诱导脑CSD,用0.9%NaCl作对照,电生理和光学成像的方法来描记CSD的产生与传播。结果针刺诱导组和KCl诱导组在观测窗口均可以观察到CSD波,在产生CSD波的同时,伴随着去极化电位的产生,而在NaCl对照组没有这一现象的发生。结论本方法制作的CSD动物模型,方法简单易行,可以用光学的方法直观观测CSD的产生发展,并结合电生理观测,适于在体研究,为进一步研究CSD的发生机制及其可能的作用提供了一种有效手段。

大鼠皮层扩散性抑制过程的在体内源光信号成像

皮层扩散性抑制 (corticalspreadingdepression ,CSD)是研究偏头痛、脑梗塞等疾病的一种重要病理模型 .而CSD过程中伴随发生的皮层血液动力学变化目前尚不完全清楚 .利用高分辨的内源光信号成像技术 ,在体观测了大鼠CSD产生和发展过程中 5 4 0nm及 6 6 0nm波长皮层反射内源光信号变化的时空动力学特征 ,分析讨论了引起这一内源光信号变化可能的内在生理机制 .实验结果显示 ,CSD诱发的内源光信号变化呈现多时相的特点 ,其传播由刺激中心以同心圆的样式向周围扩散 ,速度约为 (3 7± 0 4 )mm/min .对于 5 4 0nm ,CSD引起了皮层反射光强的降低 [幅度 (- 2 1± 1 2 ) % ,持续时程 (16 2± 3 8)s],升高 [幅度 (2 9± 1 6 ) % ,持续时程(13 8± 2 2 )s ],再降低 [幅度 (- 14 2± 4 5 ) % ,持续时程 (40 6± 8 4 )s]和再升高持续时程 [(14 6 2± 4 0 3)s ],同时观测到软脑膜动脉的大幅度舒张 ,血管管径变化峰值增大了 (6 9 2± 2 6 1) % .而对于 6 6 0nm ,内源光信号变化的时间特性在皮质区主要表现为反射光强的增大 [幅度 (3 8± 0 6 ) % ,持续时程 (17 9± 5 1)s],减小[幅度 (- 3 0± 1 7) % ,持续时程 (43 3± 6 4 )s

洋川芎内酯Ⅰ对偏头痛大鼠皮层扩散性抑制的影响

目的观察洋川芎内酯(ISEI)对偏头痛大鼠皮层扩展性抑制(CSD)电位及一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量的影响,初步探讨其起效机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组,模型组,SEI高、中、低剂量组,盐酸氟桂利嗪组,每组6只。除假手术组外,其余大鼠给予蘸有1 mol.L-1氯化钾(KCl)的棉球诱导CSD,并在大鼠顶叶局部放置电极记录偏头痛大鼠在给药前后CSD的波幅以及频率变化,以硝酸还原酶法测定大鼠血浆中NO和CGRP的含量变化。结果除假手术组外,其余各组给予KCl后3 min左右诱导出现CSD,表现为双向电位,与模型组比较,SEI中、低剂量组电位幅度虽有降低趋势,但无统计学意义(P>0.05),SEI高剂量组及盐酸氟桂利嗪组可明显抑制CSD的波幅,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组血浆中的NO、CGRP含量较假手术组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),而SEI高剂量组的NO、CGRP及中、低剂量组的CGRP含量较模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 SEI对偏头痛的治疗作用可能是通过调节血浆中的NO及CGRP含量实现的。

皮层扩散性抑制对蛛网膜下腔出血后皮层脑血流及细胞凋亡的影响

目的明确大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后皮层扩散性抑制(cortical spreading depression,CSD)对皮层脑血流及细胞凋亡的影响。方法采用枕大池2次注血法建立大鼠SAH模型,利用皮层给以KCl的方法诱导CSD的发生,激光多普勒血流仪行皮层脑血流测定,TUNEL染色检测细胞凋亡。结果 SAH组大鼠脑皮层血流较空白组和盐水组明显下降,其中5d组最低;皮层细胞凋亡水平明显升高,5d组最明显;CSD发生后SAH组脑血流下降更明显,凋亡更严重,空白组和盐水组变化不明显。结论 SAH后CSD的发生使脑血流进一步下降,皮层细胞的凋亡更加严重,CSD可能是导致迟发性缺血性神经功能障碍的机制之一。

不同钙离子通道阻滞剂对大鼠脑片皮层扩散性抑制的影响

目的：利用KCl化学刺激方法在大鼠离体脑片上诱导皮层扩散性抑制（CSD）,并以已知有效抑制药物N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂AP-5及σ1受体激动剂dextromethorphan（DM）作为参照,观察钙离子通道阻滞剂在皮层扩散性抑制中的影响。方法：采用6-7周龄的雄性SD大鼠,取大鼠离体脑片做细胞外记录,用2 mol/L KCl局部喷射的方法诱导皮层扩散性抑制,并在电流钳模式下描记CSD的电压和波幅变化,药物干预组则是在灌流液中加入药物,直接观察CSD的变化。所有实验结果均以振幅的平均值±标准误表示,多组间的数据两两比较使用秩和检验。结果：（1）用所建立的电生理学方法记录到的CSD,为细胞外慢电位,峰值30 mV,时长1~2min;（2）抑制药物DM、AP-5干预组与对照组相比差别具有统计学意义（P〈0.01）,盐酸氟桂利嗪组、尼莫地平组与对照组相比差别亦具有统计学意义,同时盐酸氟桂利嗪组与DM、AP-5组相比差别无统计学意义（P〉0.05）,尼莫地平组则与DM、AP-5相比差别具有统计学意义,尼莫地平对CSD的抑制作用不如抑制药物。结论：（1）采用KCl刺激的方法能在大鼠皮层离体脑片上稳定地诱导皮层扩散性抑制;（2）与已知阻断药物相比,T/N型钙离子通道阻滞剂盐酸氟桂利嗪对皮层扩散性抑制有明显的抑制作用,而L型钙离子通道阻滞剂尼莫地平的抑制作用则不明显。

大鼠皮层扩散性抑制过程中在体内源光信号与脑血管形态变化的相关性

利用高分辨率的在体光学成像技术同时监测大鼠皮层扩散性抑制(CSD)过程中570 nm皮层反射内源光信号和脑血管形态变化的时空动力学特征.观察到CSD过程中软脑膜动脉血管直径呈现多时相变化:在普遍被观察到的CSD过程中软脑膜动脉血管大幅度舒张之前,还存在一个较小幅度的软脑膜动脉扩张((21.5±13.6)％)和收缩((-4.2±3.5)％).并且软脑膜动脉血管直径的这一多时相变化与CSD诱发的内源光信号变化之间高度相关(相关系数r=0.89±0.025).

在体皮层扩散性抑制动物模型的建立

目的:用KCl和针刺分别在鼠皮层诱导皮层扩散性抑制(CSD),建立大鼠CSD动物模型,为进一步研究奠定基础。方法:采用Spangue-Dawley大鼠25只,随机分为针刺诱导组(n=10)、KCl诱导组(n=10)和NaCl对照组(n=5),在大鼠颅骨上分别钻磨出诱导窗口和观测窗口,分别在诱导窗口用针刺和滴加KCl诱导大鼠脑CSD,对照组在诱导窗口滴加NaCl,并用电生理记录和光学成像的方法来描记CSD的产生与传播,并分析其特点。结果:针刺诱导组和KCl诱导组在观测窗口均可以观察到向外周扩散的弧形波,观测窗口均可以观察到明暗相间的弧形波向远处扩散,针刺诱导的CSD波呈典型的同心圆样向四周均匀扩散,KCl诱导的CSD波则是呈不规则的圆弧形波向外周扩散,针刺组每次只诱发1次CSD波,而KCl组则可以诱导多次CSD波。在产生CSD波的同时,伴随着去极化电位的产生,而在NaCl对照组没有这一现象的发生。结论:用本方法制作CSD动物模型,简单易行,可以用OISI直观观测CSD的产生和发展,并与电生理观测到的去极化波一致,适于在体研究CSD,为进一步研究CSD的发生机制及其可能的作用提供了一种有效手段。

在体诱导鼠脑皮层扩散性抑制研究

目的用KCl和针刺分别在鼠脑诱导皮层扩散性抑制(CSD),研究其在体成像和电生理特点。方法用针刺(n=10)和KCl(n=10)诱导鼠脑CSD,并用NaCl作对照(n=5),电生理记录和光学成像来描记CSD的产生与传播,并分析其特点。结果单次针刺可诱导一组同心圆样扩散波,KCl诱导多组不规则弧形扩散波,两者均伴随去极化电位的变化,且两者电位的变化无统计学差异(P<0.05),在对照组没有这一现象的产生。结论KCl和针刺均可在体诱导鼠脑CSD,并通过光学成象(OISI)直接观测CSD的产生发展,与电生理观测结果一致,为进一步研究CSD的发生机制及其可能的作用提供了一种有效手段。

大鼠局灶性脑缺血后KCl诱导皮层扩散性抑制的体光学成像

采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,在额叶皮层用KCl诱导产生皮层扩散性抑制(corticalspreadingdepression,CSD)。MCAO4h后,利用550nm内源信号光学成像(opticalintrin-sicsignalimaging,OISI)监测局灶性脑缺血后大鼠顶-枕叶皮层内源光信号变化。成像1h内观测到一系列诱导CSD波(14±3次),CSD波局限于顶-枕叶皮层中央区域扩展,以光强的显著下降为特征;而旁侧区域光强无明显改变,不具备CSD波特征,表明CSD波未传播到该区域。随后TTC染色证明上述旁侧区域已经梗死。实验表明:MCAO后4h,皮层区域旁侧部分会梗死;CSD波的OIS变化可用来区分缺血梗死区和外周供血较为完整区域(未梗死区)。

格列本脲对大鼠皮层扩散性抑制中脑血管的调节作用

皮层扩散性抑制(corticalspreadingdepression,CSD)是研究偏头痛、脑梗塞等疾病的重要病理模型.已有研究表明,在普遍被观察到的CSD过程中软脑膜动脉血管大幅度舒张之前,还存在一个较小幅度的软脑膜动脉扩张和收缩.但其中的脑血管调节机制尚不清楚.采用550nm的内源信号光学成像(opticalintrinsicsignalimaging,OISI)监测ATP敏感钾离子通道(ATP-sensitivepotassiumchannels,KATP)的阻断剂格列本脲(glibenclamide,glyb),对针刺诱导的大鼠CSD过程中软脑膜动脉血管舒缩过程的影响.实验中观测到软脑膜血管的初始小收缩(initialslightconstriction,ISC)相对于对照组显著减弱,其中应用10μmol/Lglyb时,74.5%的ISC被完全抑制,100μmol/Lglyb时则有96.2%的ISC完全消失.相对于CSD发生前,软脑膜动脉血管大幅舒张(largedilation,LD)的峰值也分别显著增强了(53.8±19.3)%和(59.8±19.6)%.结果表明,可能是神经元上的KATP在CSD过程中被glyb阻断从而抑制了软脑膜动脉血管的收缩.

皮层扩散性抑制的研究进展

皮质扩散性抑制(cortical spreading depression,CSD)是大脑皮质受刺激后产生的电活动抑制带,该抑制带可以将大脑皮质跨膜离子的浓度梯度迅速摧毁并去极化,导致细胞内外发生短路,可以影响大脑的灌注及代谢,导致不良预后,该文将从以下几个方面对CSD的研究进展进行综述。

氯胺酮抑制皮层扩散性抑制发生发展的研究进展

皮层扩散性抑制（cortical spreading depression,CSD）是一种在大脑皮层神经元及胶质细胞中波浪式扩散传导的抑制性脑电活动,这种病理现象的特征性表现为病变区域的神经元肿胀、细胞外钾离子及谷氨酸含量升高、局部皮层功能受损。越来越多的证据表明,皮层扩散性抑制与先兆性偏头痛、癫痫、卒中、脑外伤及脑出血等疾病的预后密切相关。

脑皮层扩散性抑制对大鼠蛛网膜下腔出血后皮层微循环的影响

目的探讨脑皮层扩散性抑制(CSD)对蛛网膜下腔出血(SAH)模型小鼠脑皮层微循环的影响。方法将30只雄性成年C57小鼠随机分为正常组(n=10,制作透明颅窗、诱导窗加KCl)、对照组(n=10,制作透明颅窗及SAH模型、诱导窗加NaCl)和观察组(n=10,制作透明颅窗及SAH模型、诱导窗滴KCl)。采用颈动脉内穿刺法构建SAH模型。使用激光散斑血流成像和内源信号成像技术记录脑皮层微循环和CSD。结果观察组、正常组出现CSD,对照组未产生CSD。观察组CSD后脑皮层血流明显下降(P<0.05)、血管明显收缩(P<0.05),其中CSD后5 d较显著。正常组CSD后血管明显舒张(P<0.05)、皮层血流明显增加(P<0.05)。对照组无明显变化(P>0.05)。结论KCl能诱导产生CSD;CSD能使正常小鼠脑皮层血流增加和血管扩张;CSD使SAH后脑皮层血流减少和血管收缩。

皮层扩散性去极化在急性脑损伤中的研究进展

急性脑损伤是临床上的一种危急情况,包括原发性损伤和继发性损伤两个方面。近年来研究发现,皮层扩散性去极化现象广泛存在于导致急性脑损伤的疾病中,是急性脑损伤后继发性损害病理生理改变的核心机制。本文对皮层扩散性去极化在急性脑损伤中的研究进展进行综述。

阿米替林对大鼠皮层神经元钠离子通道电流及其mRNA的影响

目的:观察阿米替林(AMI)对大鼠皮层神经元钠通道电流及其mRNA表达的影响。方法:运用全细胞膜片钳模式记录AMI加药前后的钠通道电流(INa);采用实时逆转录聚合酶链反应(real time reverse-transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)观察实验组和对照组皮层神经元钠通道各亚型的mRNA表达量。结果:AMI抑制大鼠皮层神经元INa及其mRNA表达(P<0.05)。10μMAMI显著改变钠通道的激活特性和失活特性。10μMAMI在5 min、10 min及24 h对Nav1.1均有抑制作用,而对于Nav1.2的作用只是在5 min时有抑制作用,对Nav1.6的抑制作用存在波动性的变化。结论:AMI对大鼠皮层神经元INa及其各亚型mRNA的表达均有浓度依赖性抑制作用。AMI对INa的抑制主要通过影响钠通道的激活和失活动力学来实现的,对其各亚型mRNA表达的抑制作用具有不同的特点。

皮层扩散性抑制对大鼠脑缺血后谷氨酸载体EAAC1 mRNA表达的影响

方法：用氯化钾诱发ＳＤ大鼠皮层扩散性抑制（ＣＳＤ），改良 Ｌｏｎｇａ法制作大鼠 ＭＣＡＯ模型，用地高辛标记的 ｃＲＮＡ探针，行原位杂交检测谷氨酸载体ＥＡＡＣ１ ｍＲＮＡ表达。结果：假手术组脑片上单位面积ＯＤ为（２ １８９±２６３），阳性颗粒数为（４３．２±４．７）个。缺血 ３０ｍｉｎ时皮层ＥＡＡＣ１ ，ｍＲＮＡ表达明显上调，经ＣＳＤ处理后再缺血时，与对照组比较表达水平均明显增高，其中Ｌｉ ３０ｍｉｎ时最高。结论：ＣＳＤ的作用可能与诱导ＥＡＡＣ１合成，增加谷氨酸的摄取有关。

蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血机制和治疗

动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一种发病率和病死率都较高的疾病。迟发性脑缺血(DCI)是导致患者高病死率的主要原因。DCI的发病机制涉及脑血管痉挛、皮层扩散抑制、微血栓形成、微循环功能障碍等。治疗方法包括循环动力治疗、血管内治疗、尼莫地平、他汀类药物、硫酸镁及其他药物治疗。现主要从发病机制及治疗方法等方面对DCI予以综述。

偏头痛发病机制和治疗新进展

本文综述了近年有关 偏头痛研究和治疗新进展。包括家族性偏头痛的相关基因发现,5羟色胺受体与偏头痛相关性机理的阐明,三叉神经血管假说和皮层抑制假说,并介绍了新型偏头痛治疗药物。5-羟色胺受体激动剂。

偏头痛增加缺血性卒中风险的研究进展

流行病学数据已证实偏头痛可能增加缺血性卒中风险,神经影像学研究也显示偏头痛与脑结构异常有关。但联系偏头痛与缺血性脑疾病的可能病理生理机制尚不完全清楚,可能的假说包括药物和生活方式等外界因素影响、内皮功能障碍和凝血异常、皮层扩散抑制等。本文就近年来偏头痛增加缺血性卒中风险的流行病学、神经影像学和遗传学的证据,以及目前涉及的可能的主要病理生理机制给予综述。

偏头痛与缺血性脑卒中关系的研究进展

偏头痛是临床常见的原发性头痛类型,近年来关于其与缺血性脑卒中关系的研究越来越多。研究表明偏头痛与缺血性脑卒中风险增加有关,但二者相互关联的可能发病机制尚不十分清楚,可能机制包括皮层扩散抑制、卵圆孔未闭、高凝状态及内皮功能障碍、动脉夹层及遗传因素等。