皮肤桥蛋白在肿瘤中作用的研究进展

肿瘤的发生发展与肿瘤细胞生存的微环境密切相关,细胞外基质是肿瘤微环境的主要组成成分,皮肤桥蛋白(dermatopontin, DPT)是一种由183个氨基酸残基组成的分泌性蛋白,在非胶原蛋白细胞外基质蛋白中所占比例非常高。DPT在肿瘤的发展过程中能通过提高转化生长因子-β的活性抑制肿瘤发生、与整合素结合抑制肿瘤转移、阻断维生素D受体潜在的信号转导通路,该文综述了DPT与肿瘤的相关研究,有利于深入了解DPT的作用机制,探究DPT在人类肿瘤发生发展中的可能作用。

低氧无血清对乳鼠心肌细胞皮肤桥蛋白表达的影响

目的在体外用低氧无血清条件模拟缺血心肌微环境,探讨心肌细胞皮肤桥蛋白(DPT)表达的变化。方法以低氧无血清处理乳鼠心肌细胞0、6、12和24 h,用实时反转录聚合酶链式反应检测DPT mRNA的表达变化,用Western blot检测DPT的蛋白表达变化。用酶联免疫吸附实验(ELISA)证实低氧无血清处理乳鼠心肌细胞24 hDPT蛋白的表达变化。结果与0 h组相比,低氧无血清处理心肌细胞6、12、24 h DPT的mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05)。用ELISA法也检测到低氧无血清处理心肌细胞24 h DPT的表达水平高于正常对照组(P<0.05)。结论低氧无血清可促进乳鼠心肌细胞DPT的表达,DPT可能在缺血缺氧引起的心室重构中发挥一定的作用。

皮肤桥蛋白在肥胖小鼠脂肪中的表达

目的:观察细胞外基质成员皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)基因的组织表达谱,以及在饮食诱导肥胖小鼠脂肪中的表达变化;探讨罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT基因表达的调控。方法:运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测6周龄小鼠主要组织的DPT mRNA和蛋白表达,以及正常和高脂饮食小鼠脂肪中的DPT表达;检测DPT在小鼠脂肪组织血管基质细胞和脂肪细胞中的表达差异。将3T3-L1细胞诱导分化为脂肪细胞,并以0.25、0.5、1、2μmol/L罗格列酮处理24 h,或以2μmol/L罗格列酮处理4、12、24、48 h,检测分化过程中及罗格列酮处理后DPT的表达。结果:DPT在小鼠脂肪中高度表达,高脂饮食16周后明显增加;DPT主要来源于脂肪细胞,且在3T3-L1细胞分化过程中的表达逐渐增加;不同剂量罗格列酮处理脂肪细胞24 h可降低DPT的表达量;2μmol/L罗格列酮处理脂肪细胞24、48 h后,DPT表达量明显降低。结论:肥胖状态下,脂肪组织中DPT的表达明显增加,罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT的表达具有调控作用,提示DPT可能参与肥胖的发生。

皮肤桥蛋白与骨形成的研究进展

皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)是富有酪氨酸残基的酸性蛋白,是一种重要的细胞外基质蛋白。研究发现DPT可以通过多种途径影响骨的形成,并且在骨组织的损伤修复过程中起重要作用。目前已经有研究表明DPT可以与维生素D受体、Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子等分子的相互作用调控骨组织的发生与发展。因此,研究DPT与骨组织的关系,对组织工程学的发展至关重要。本文综述了DPT对骨组织发生、发展过程中关键分子蛋白的影响,进而揭示其存在的潜在机制。

皮肤桥蛋白与肿瘤发展与转移关系的研究进展

在肿瘤的侵袭和转移中,肿瘤的微环境发挥着重要的作用,其中细胞外基质(extracellular matrix,ECM)是肿瘤微环境的主要组成部分,在肿瘤转移中发挥关键作用,皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)作为ECM蛋白,与肿瘤发展和转移密切相关。

细胞外基质的新成员——皮肤桥蛋白

皮肤桥蛋白是新近发现的分子量为 2 2kD的富含酪氨酸的蛋白质 ,由氨基末端酪氨酸富集区及随后三个相同的结构域构成。它在细胞外基质中分布广泛 ,具有结合蛋白聚糖、细胞、胶原蛋白及促进细胞粘附、胶原纤维合成的性质 ,是细胞外基质中的一种多功能蛋白质 ,在细胞、基质之间的相互作用及基质组装过程中具有重要作用。

皮肤桥蛋白通过转化生长因子β1促进皮肤纤维化的机制研究

目的探讨皮肤桥蛋白在转化生长因子β1介导的成纤维细胞活化促进皮肤纤维化过程中的作用机制。方法2022年3月至2023年7月,实验在上海交通大学医学院附属第九人民医院开展。于体外培养C57BL/6J小鼠皮肤成纤维细胞,用小干扰RNA进行皮肤桥蛋白的敲除并筛选沉默效率最高的小干扰RNA序列。确认转化生长因子β1刺激成纤维细胞的活化的最佳作用浓度。在体外建立敲除皮肤桥蛋白的小鼠皮肤成纤维细胞模型并加入转化生长因子β1促进其纤维化,利用CCK-8实验、流式细胞术等方法观察转化生长因子β1刺激后对成纤维细胞增殖、凋亡和细胞周期调控的影响,通过实时荧光定量反转录聚合酶链式反应检测纤连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链的RNA表达水平。结果小干扰RNA序列-3为沉默皮肤桥蛋白效率最高的序列(F=80.77,P<0.05)。转化生长因子β1刺激成纤维细胞活化的最佳浓度为10 ng/ml。CCK-8实验显示,敲除皮肤桥蛋白可显著抑制转化生长因子β1促进的成纤维细胞增殖(F=71.06,P<0.05)。流式细胞仪结果显示,敲除皮肤桥蛋白可阻止成纤维细胞进入G2/M期,差异均有统计学意义(F=11.15、8.30,均P<0.05),但对成纤维细胞凋亡无明显影响,显示皮肤桥蛋白主要通过加快细胞周期进程促进转化生长因子β1介导的细胞增殖。实时荧光定量反转录聚合酶链式反应的结果显示敲除皮肤桥蛋白后,纤连蛋白和Ⅰ型胶原蛋白α1链的表达下降,差异均有统计学意义(F=109.30、8.82,均P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白的表达变化差异无统计学意义,证明皮肤桥蛋白可促进转化生长因子β1介导的成纤维细胞纤维化指标的表达。结论皮肤桥蛋白在转化生长因子β1介导的成纤维细胞活化引起的皮肤纤维化过程中起着重要的调控作用。

PR、DPT和TGF-β1在子宫内膜癌组织中的表达及相关性

目的研究孕激素受体(progesterone receptor,PR)、皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)和转化生长因子-β1(transformation growth factorβ1,TGF-β1)在子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌临床病理特征的相关性。方法搜集纳入2013年9月—2016年4月徐州医科大学附属邳州医院及徐州市中心医院确诊的子宫内膜癌患者80例、不典型增生子宫内膜患者30例及正常增生期患者30例作为研究对象,免疫组化(SP法)检测癌组织、不典型增生子宫内膜组织及正常增生期内膜组织中PR、DPT及TGF-β1的定位及表达水平,分析PR、DPT及TGF-β1的表达水平与子宫内膜癌患者临床病理特征之间的关系,进一步分析PR与DPT、TGF-β1之间的表达相关性。结果PR、DPT及TGF-β1阳性率在子宫内膜癌、不典型增生内膜与正常子宫内膜组织中存在显著性差异(P<0.05),且PR和DPT阳性表达率在子宫内膜癌中表达最低,TGF-β1在子宫内膜癌中表达最高。PR表达定位于细胞核及细胞质,DPT和TGF-β1表达定位于细胞质。子宫内膜癌中PR表达水平在组织细胞学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移上差异有统计学意义(P<0.05);DPT表达水平在组织细胞学分级及淋巴结转移上差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1表达水平在组织细胞学分级、病理分期及肌层浸润深度上差异存在统计学意义(P<0.05);等级相关性分析发现PR与DPT的表达呈正相关(r=0.28,P<0.05),而PR与TGF-β1的表达呈负相关(r=-0.224,P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中PR、DPT阳性表达率最低,而TGF-β1阳性表达率最高,PR表达与DPT呈正相关,而与TGF-β1呈负相关,三者表达与子宫内膜病变的发生、发展密切相关。

TiO_2纳米管对DPT在成骨细胞中表达的影响及机制研究

目的研究不同管径TiO_2纳米管修饰的钛材料与成骨细胞在体外复合培养,观察其对成骨细胞的粘附、增殖和分化的影响,并探讨可能的机制,为纳米材料的临床应用提供理论依据。方法将骨植入材料金属物质分成四组,其中三组经处理后分别内置有50 nm、100 nm、CDW图案的纳米管,以未经任何处理的钛片作为对照组,将MG-63成骨细胞分别接种于内置有50 nm、100 nm、CDW图案的纳米管与对照组钛片的6孔板中,采用MTT实验对四组材料复合培养MG-63的细胞活力进行评估;应用碱性磷酸酶(alkline phosphatase,ALP)试剂盒检测四组细胞碱性磷酸酶活性的改变;荧光共聚焦检测皮肤桥蛋白(DPT)的表达情况;通过Western blot实验检测DPT、黏着斑激酶,粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)蛋白的表达变化。结果MTT检测显示,三种纳米管复合培养MG-63活性比对照组钛片复合培养的MG-63活性增强,培养的第3d,5d,7d MG-63细胞活性增强显著,呈时间依赖性。与钛片复合培养组相比,50 nm、100 nm、CDW图案的纳米管复合培养组ALP、DPT、FAK及OPN表达水平增加。结论50 nm、100 nm、CDW图案的纳米管复合培养更能促进成骨细胞的生长与铺展,具有良好的生物相容性,其机制可能与增加ALP的表达水平和激活DPT/FAK信号通路相关。