Synaptotagmin1影响小鼠卵母细胞减数分裂和皮质反应的研究

目的探讨Synaptotagmin1(Syt1)对小鼠卵母细胞减数分裂过程和皮质反应的影响。方法免疫印迹检测Syt1在小鼠卵母细胞的表达;免疫荧光分析Syt1在卵母细胞中定位以及对减数分裂过程的影响;活细胞实时拍摄系统观察皮质反应以及纺锤体、染色体在降调Syt1表达的动态变化。结果 (1)Syt1和小鼠卵母细胞皮质颗粒完全共定位;(2)降调Syt1表达,小鼠卵母细胞减数分裂进程受到阻碍;(3)活细胞实时拍摄系统证实了降调Syt1会影响中后期转换、第一极体释放以及进一步的皮质反应。结论 Syt1参与调控卵母细胞的减数分裂的成熟过程和皮质反应的发生。

大学生知觉控制感与皮质醇觉醒反应的关系

目的:基于“促进功能假设”考察大学生当天知觉控制感与皮质醇觉醒反应之间的关系。方法:以70名大学生为研究对象,在3天的每天早晨醒来、醒来后30分钟和45分钟采集唾液样本测量皮质醇觉醒反应,同时评估知觉控制感水平。结果:大学生早晨醒来45分钟内皮质醇水平显著升高,出现了皮质醇觉醒反应现象;当天的知觉控制感能够预测皮质醇觉醒反应,主观感知的控制水平越低,皮质醇觉醒反应越高(t=2.251,P<0.05)。结论:知觉控制感是调节大学生当天皮质醇觉醒反应的重要心理因素,知觉控制感较低导致神经内分泌能量的增加,为即将到来的一天做好充足的准备。

人脑初级体感皮质M_(20)反应的性别差异-脑磁图研究

目的:应用脑磁图(MEG)研究健康受试者初级体感皮质反应M20的潜伏期、波幅及位置的性别差异。方法:对40例受试者给予双侧腕部正中神经电刺激,固定电流脉冲0.3ms,刺激间期0.5s,诱发初级体感皮质兴奋。脑磁图检查后进行MR扫描,层厚1.5mm。大脑初级体感皮质反应由等电流偶极(ECD)评价。将脑磁图所获得的M20反应叠加到MRI上,形成磁源性影像(MSI)。结果:依照给予电刺激后反应潜伏期不同分别称为M20、M35及M60,因M35及M60易受刺激间期(ISI)的影响,只对M20的潜伏期、波幅及反应位置的性别差异进行分析。结果为(1)M20左、右半球潜伏期男性20.6±1.0ms和20.7±1.2ms,女性20.1±0.9ms和20.2±0.9ms,男女性同侧半球潜伏期无显著性差异(P>0.05);(2)M20左、右半球波幅男性23.6±11.2nAm和25.4±11.2nAm,女性25.8±10.5nAm和27.6±7.8nAm,男女性同侧半球波幅无显著性差异(P>0.05);(3)左半球男女性M20偶极位置在X轴位存在显著性差异(P<0.05),显示男性X轴上与女性相比稍偏外侧,右半球男女性M20偶极位置在X轴位无显著性差异(P>0.05),Y,Z轴无显著性差异(P>0.05);(4)磁源性影像显示所有受试者M20反应峰值均位于中央后回。结论:脑磁图可明确不同性别的大脑初级体感皮质反应M20潜伏期、波幅及位置。磁源性影像显示M20峰值位于?

人精子甘露糖受体参与诱导卵母细胞皮质颗粒反应

目的研究人精子甘露糖受体与卵母细胞皮质颗粒反应的关系。方法以亲和层析法纯化的人精子甘露糖受体(purified mannose receptor,pMR)作用去透明带金黄地鼠卵,继而用罗丹明偶联的兵豆凝集素(Tetramethylrhodam ine Isothiocyanate Labeled Lentil,TRITC-LCA)标记。通过荧光显微镜观察被标记的皮质颗粒及卵母细胞表面甘露糖基的变化情况。结果pMR作用卵母细胞后,卵母细胞内的皮质颗粒减少且细胞表面的甘露糖基数量增加。结论pMR作用于卵母细胞表面后,可触发皮质颗粒反应,并使皮质颗粒部分内容物转移到卵母细胞表面。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压患者皮质下觉醒反应特点分析

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并高血压患者皮质下觉醒反应特点。方法选择2015年10月~2016年6月在新疆自治区人民医院高血压中心住院的120例高血压患者,所有患者均行夜间多导睡眠监测,同时测定脉搏传导时间(PTT)以评估患者皮质下觉醒反应。根据呼吸暂停低通气指数(AHI),将研究对象分为无OSAHS组(17例)、轻度OSAHS组(21例)、中度OSAHS组(34例)和重度OSAHS组(48例)。对四组OSAHS相关参数、PTT觉醒指数进行统计分析。结果重度OSAHS组总PTT觉醒指数(PTTt)、呼吸相关性PTT觉醒指数(PTTr)、睡眠非快动眼期PTT觉醒指数(PTT-NREM)高于其余各组,PTT最小值低于其余各组(P<0.05)。各组间非呼吸相关性PTT觉醒指数(PTTn)、PTT平均值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PTTt、PTTr、PTT-REM、PTT-NREM与AHI、氧减指数、脑电觉醒指数呈正相关,与最低血氧饱和度(min Sa O2)呈负相关(P<0.05)。PTTn与AHI、min Sa O2、脑电觉醒指数、氧减指数之间无相关性(P>0.05)。无OSAHS组与轻中度OSAHS患者PTT-REM明显高于PTT-NREM(P<0.05)。结论在OSAHS合并高血压患者中PTT觉醒指数是一个客观的监测指标,其中PTTr是判断OSAHS严重程度的更为敏感的指标。

皮质下缺血性血管病脑血管反应性磁共振研究

目的:通过观察皮质下缺血性血管病(SIVD)患者不同脑区局部脑血管反应性(CVR)的变化及认知功能的损害,探讨SIVD局部CVR的改变在认知功能损害中的作用。方法:采用动脉自旋标记(ASL)磁共振灌注技术定量测定SIVD患者与对照组吸入5%CO2前后额叶、颞叶、顶叶、枕叶皮质和白质局部血流量(rCBF),CVR采用前后2次各兴趣区rCBF的增加率表示。结果:(1)SIVD组额叶皮质及白质、颞叶白质、枕叶白质的CVR比对照组显著降低(P<0.05)。(2)SIVD组有认知功能损害患者和无认知功能损害患者相比额叶皮质、额叶白质CVR下降明显(P<0.01)。结论:SIVD患者存在广泛的脑血管自动调节功能受损,并且额叶皮质、白质的CVR下降与认知功能损害有关。

含有成对皮质酮激素反应元件的基因在小鼠组织内的表达分析与验证

目的验证基于生物信息学的方法发现含有成对皮质酮激素反应元件(GREs)的皮质酮激素作用新基因。方法应用程序"NURD-finder2",从小鼠36 000个基因中筛选出含有成对GREs的88个基因,并选取了10个基因进行动物体内实验来验证。对小鼠(C57BL/6)的14种不同组织进行33P末端标记的原位杂交,用Image J软件分析。结果 10个所检测基因至少在一种组织中表达,而且发现脾脏对皮质酮激素急性应激有强反应;6个所测基因的mRNA水平在激素处理后有显著提高(P<0.05),其中质膜微囊蛋白家族-1(caveolin-1)在肺部有明显上调(P<0.05),生理上具有较强反应,其GRE序列与大鼠和人类的cav-1基因有较高同源性。结论验证了"NURD-finder2"发现新的含有成对GREs的皮质酮激素反应基因,这些基因具有组织特异性,可能在生理平衡的过程中具有重要作用。

抑郁症未用药患者唾液皮质醇觉醒反应与自杀意念的关系

目的:探讨抑郁症未用药患者的自杀意念与唾液皮质醇觉醒反应(CAR)的关系。方法:对30例未服药的抑郁症患者(抑郁症组)及30名健康志愿者(健康对照组)进行自杀意念自评量表(SIOSS)评估及早晨觉醒后0、30、45及60 min时的唾液皮质醇水平检测;分析影响SIOSS评分的相关因素。结果:抑郁症组SIOSS总分及各因子评分(P均<0.01)、觉醒后0、30、45 min时唾液皮质醇浓度及CAR曲线下面积(AUCg)显著高于健康对照组(t=2.892,t=3.209,t=2.350,t=3.418;P<0.05或P<0.01);以年龄、性别、体质量指数、睡眠时间以及觉醒时间作为协变量分析发现,其对皮质醇浓度既无主效应也无交互作用。结论:抑郁症患者存在较强的自杀意念及CAR水平显著升高;CAR可能是预测抑郁症患者自杀意念强度的生物学指标。

猪卵母细胞的皮质颗粒与多精受精

猪卵母细胞的体外成熟（IVM）和体外受精（IVF）是进行体外生产胚胎（IVP）的重要方法。多精受精常会导致早期胚胎死亡。严重影响着猪胚的IVP技术。受精时皮质颗粒（CGs）中酶的释放使透明带（ZP）上的蛋白分子进行修饰，从而可阻止猪卵的多精受精。

皮质颗粒在评估卵母细胞胞质成熟中的相关应用

卵母细胞的成熟包括细胞核和胞质的成熟。目前无公认标准对卵母细胞胞质成熟度进行评估。皮质颗粒的增殖和特征性分布是常用于评估卵母细胞胞质成熟的重要指标。本文主要对皮质颗粒评估卵母细胞胞质成熟度的可行性和相关应用作一综述。

青少年应激下皮质醇应答与风险决策相关性的性别差异

本研究旨在探讨中国青少年应激下皮质醇应答和风险决策相关性的性别差异。本研究以健康初中生为被试者,采用特里尔社会应激测试(Trier Social Stress Test,TSST)诱发机体应激反应,测试唾液皮质醇在应激前后不同时间段的水平,并要求被试者在应激状态下完成气球模拟风险决策任务(Balloon Analogue Risk Task,BART)。结果发现,男性在TSST诱导下皮质醇反应度显著高于女性,男性中高皮质醇应答者BART表现为更高程度的冒险行为和更低的总奖励金额,而女性中高皮质醇应答者BART表现为更高的总奖励金额。研究结果提示,中国青少年应激条件下皮质醇应答与风险决策之间的联系存在性别差异,尤其在男性,高皮质醇应答者更具有冒险行为。

热休克蛋白90和糖皮质激素受体mRNA在糖皮质激素敏感型依赖型和抵抗型哮喘中的表达及其在抵抗型哮喘发病中的作用

目的:观察糖皮质激素抵抗型、敏感型、依赖型中热休克蛋白90(HSP90)、糖皮质激素受体(GR)mRNA表达情况,同时分析HSP90、GR mRNA在抵抗型哮喘发病中的作用,提高临床不同类型哮喘患者治疗效果。方法:以2015年7月至2016年8月间我院门诊部门收治的86例哮喘患者为研究对象,根据患者对糖皮质激素不同反应分为敏感组(39例)、抵抗组(20例)、依赖组(27例),同时随机选取入院行健康检查结果正常的受检者为对比组(35例),所有受检者均空腹抽取外周血,使用逆转录-聚合酶链(RT-PCR)测定热休克蛋白90、GR mRNA在细胞内表达情况,同时在体外分别以白介素4(IL-4)、白介素2(IL-2)以及联合刺激细胞,记录HSP90、GR mRNA表达改变情况。结果:抵抗组HSP90、GR mRNA细胞内表达明显高于其他组,而HSP90/GR明显低于其他组,P<0.05;在IL-4、IL-2刺激下各组GR、HSP90 mRNA均出现不同的表达上升情况。结论:抵抗型哮喘者出现抵抗反应可能与细胞中HSP 90表达不足有关。

皮质醇觉醒反应对注意缺陷多动障碍儿童多目标追踪的影响:工作记忆的中介作用

目的探讨注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)儿童工作记忆在皮质醇觉醒反应(cortisol-awakening response,CAR)与多目标追踪(multiple objects tracking,MOT)之间的中介作用。方法2022年1月—2022年10月选取92例ADHD儿童(ADHD组)及94例正常儿童(对照组)为研究对象,对所有儿童觉醒后4个时间点的唾液皮质醇水平进行分析检测,分别用1-back及MOT范式评估儿童的工作记忆及MOT。采用SPSS 26.0软件对数据进行t检验、Pearson相关分析,采用SPSS 26.0中的插件PROCESS model 4进行中介效应分析。结果(1)ADHD组在CAR、1-back正确率与MOT表现[(30.97±5.63)、(81.33±10.64)%、(2.36±0.37)个]均显著低于对照组[(32.41±3.48)、(91.19±7.12)%、(2.62±0.28)个],均差异有统计学意义(t=-2.09,-7.22,-5.31,均P<0.05)。(2)Pearson相关分析显示,CAR与1-back正确率呈正相关(r=0.293,P<0.01),与MOT表现呈正相关(r=0.740,P<0.01);1-back正确率与MOT表现呈正相关(r=0.368,P<0.01)。(3)工作记忆在ADHD儿童CAR对MOT影响中起部分中介效应,占总效应的6.13%(0.003/0.049)。结论ADHD儿童存在多目标追踪缺陷,且工作记忆在ADHD儿童CAR与MOT表现之间起中介作用。

唾液皮质醇与围引产期抑郁的相关性

目的:探索胎儿畸形引产女性引产前唾液皮质醇水平的相关参数与围引产期抑郁的关系。方法:比较胎儿畸形女性引产前后抑郁组与非抑郁组之间唾液皮质醇水平的差异,应用logistics回归分析唾液皮质醇与围引产期抑郁发生的相关关系。结果:胎儿畸形引产女性抑郁组唾液皮质醇觉醒反应低于非抑郁组,引产前唾液皮质醇觉醒反应与引产前(OR=0.063,95%CI:0.005~0.754)和引产后3个月(OR=0.002,95%CI:0.000~0.061)抑郁的发生呈负相关。结论:唾液皮质醇觉醒反应越高,围引产期抑郁发生率越低,提示胎儿畸形引产女性引产前唾液皮质醇觉醒反应对引产后抑郁的发生有预测作用。

人糖皮质激素受体调控靶基因的生物信息学分析

目的分析糖皮质激素受体(GR)靶基因在人类基因组的分布及功能,明确其生物学意义。方法通过生物信息学的方法,在人类基因组中找出所有含有糖皮质激素反应元件(GRE)保守序列的基因。通过NCBI的基因注释得到基因名称、功能、基因的蛋白产物及其对应的基因本体学(Gene Ontology,GO)号等,然后对这些基因的功能进行GO分类,最后重点分析这些基因在免疫、炎症反应中的作用。结果含有GRE-1保守序列(5′-AGAACAnnnTGTTCT-3′)的基因共有225个,其中有18个位于基因启动子区域,10个位于基因外显子区域,197个位于内含子区域;含有GRE-2保守序列的基因有94个,其中有13个位于基因启动子区域,5个位于基因外显子区域,76个位于内含子区域。结论含有GRE的基因中F2R、DAXX、PAG1、ULBP3、OR8D4、RIMS1、NPY2R与激素代谢、免疫以及应激响应相关。

BALB/c、C57BL/6小鼠糖皮质激素效应差异机制研究

目的 观察BALB/c和C5 7BL/ 6两株小鼠的糖皮质激素 (Gc)效应差异 ,并对其分子机制进行初步探讨。方法 采用放免测定、Westernblot和EMSA方法检测两株小鼠即时应激前后血清皮质醇浓度、脑组织糖皮质激素受体 (GR)表达和脑组织GRE结合效率。结果 BALB/c和C5 7BL/ 6小鼠存在Gc GR信号通路效应差异 ,C5 7BL/ 6小鼠应激前、后GRE结合效率 (P <0 .0 1)和GR胞核 /胞浆比值 (P <0 .0 1)均高于BALB/c小鼠 ,但两株小鼠应激前后血清皮质醇浓度 (P >0 .0 5 )和胞浆内GR含量(P >0 .0 5 )相差不显著。结论 GR核转位量导致的GRE结合差异在两株小鼠Gc GR效应差异中扮演了重要角色。

Syntaxin4参与小鼠卵母细胞皮质颗粒的转运机制的研究

目的探讨Syntaxin4参与小鼠卵母细胞皮质反应及对皮质反应的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测Syntaxin4在小鼠卵母细胞表达;免疫荧光验证Syntaxin4与皮质颗粒在卵母细胞中的定位,分析Syntaxin4对小鼠卵细胞皮质反应的影响;活细胞实时拍摄系统观察降低Syntaxin4表达后皮质反应的动态变化。结果 (1)Syntaxin4在小鼠卵母细胞中表达,且在GV期和MII期无明显变化;(2)Syntaxin4与小鼠卵细胞皮质颗粒共定位;(3)活细胞实时拍摄证实降低Syntaxin4的表达后阻碍了皮质反应的进行。结论 Syntaxin4参与小鼠卵细胞皮质反应。

LXRα通过下调IRF3、GRIP1负性调控Kupffer细胞中LPS诱导的炎症反应机制

目的通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXRα负性调控炎症反应的相关机制。方法采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠肝脏中的Kupffer细胞,所得细胞在含20%小牛血清和1%青霉素/链霉素的1640培养基中培养。将分离的Kupffer细胞随机分为4组:空白对照组、TLR4配体激活剂LPS(1μg/ml)组、LXRα配体激活剂T0901317(5μg/ml)组、LPS和T0901317共同处理组。收集培养细胞,采用Western boltting法检测Kupffer细胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表达水平。ELISA检测Kupffer细胞培养上清液中干扰素(IFN)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量。结果LXRα蛋白质表达水平在T0901317处理组最高,LPS处理组最低。联合处理组中,LXRα表达明显低于T0901317处理组(P<0.05),但又显著高于其他两组(P<0.05)。IRF3及GRIP1蛋白表达量在LPS组最高,联合处理组表达明显降低,两组间均有显著差异(P<0.05);在LPS组及联合处理组中,IRF3及GRIP1蛋白表达量均高于对照组及T0901317处理组(P<0.05)。IFNβ在LPS处理组的含量较对照组和T0901317处理组明显增高(P<0.05);联合处理组IFNβ含量比LPS处理组明显降低(P<0.05);IFNβ表达T0901317处理组表达最低。TNF-α在LPS处理组的含量较其他3组明显增高(P<0.05);对照组、T0901317处理组和联合处理组水平较低,且他们3组之间无明显差别(P>0.05)。IL-1β的表达趋势与TNF-α相同。结论在应用LPS处理之前预防性应用LXRα激动剂,能明显抑制Kupffer细胞的IRF3及GRIP1表达,通过抑制IRF3、GRIP1的表达而发挥抗炎效应,从而抑制LPS所诱导的Kupffer细胞活化。