不同皮革蛋白的开发利用研究

对不同动物源的铬鞣皮渣及其碱水解产物———皮革蛋白进行了营养成分的分析,并比较了皮革蛋白的体外消化率.结果表明,不同动物源的铬鞣皮渣和皮革蛋白在粗蛋白含量和氨基酸组成方面存在明显差异;不同皮革蛋白均具有良好的消化性,以猪皮蛋白消化性最好,其次为牛皮蛋白,羊皮蛋白的消化性最差.

皮革蛋白喂鸡毒性试验

皮革蛋白是从制革鞣前废水中提得的一种蛋白饲料。近年来,国内己在提取工艺及饲喂试验方面做了一些研究,但对鸡能否导致毒性反应尚无报道。本文系采用同一饲养水平,将皮革蛋白以不同比例混入饲粮,替代鱼粉及其他饲料蛋白质,测定其对肉鸡增重、血液生化指标、实质性器官及组织细胞有无影响,以便为进一步开发利用提供科学依据。

解析乳及乳制品中添加皮革水解蛋白问题

我国食品安全问题日益突出,其中乳制品掺假问题也倍受关注。乳及乳制品中添加皮革水解蛋白,对乳品的生产和消费产生很大负面影响,严重阻碍行业的发展。本文对乳及乳制品掺假的原因,皮革水解蛋白的提取工艺、特性、应用、对人体健康的损害、相关禁用限用法规、检测分析方法等方面进行了系统解析。

保护剂提高皮革用蛋白酶稳定性的研究

酶制剂在皮革行业的应用越来越广泛,为提高皮革用蛋白酶的应用性能,促进清洁化酶制剂在皮革工业的推广,本文研究了醇类、糖类和有机溶剂作为保护剂对皮革用蛋白酶热稳定性的影响。结果表明,添加山梨醇、葡萄糖和甘油可显著提高蛋白酶的热稳定性,并通过响应面试验优化得到复合保护剂配方为13%山梨醇和25%葡萄糖,综合考虑应用于皮革脱毛后的操作与成本问题,最终选择添加25%葡萄糖作为皮革用蛋白酶的保护剂。添加25%葡萄糖的蛋白酶在50℃保存6 h,酶活保存率为85.73±1.28%,较对照提高了61.83%。且蛋白酶的半衰期显著提高,当温度大于40℃时添加保护剂与不添加保护剂的蛋白酶相比半衰期分别提高了1.00倍、2.60倍、1.25倍和2.13倍。

1种快速检测乳及乳制品中皮革水解蛋白的方法

在乳及乳制品中添加皮革水解蛋白对乳及乳制品的生产和消费产生很大负面影响,引起社会各方关注,为保证乳及乳制品的质量安全,急需快速、简便的民用检测乳及乳制品中是否含有皮革水解蛋白。本研究建立了乳及乳制品中皮革水解蛋白检测方法,该方法中样品无需进行前处理,2 mL乳及乳制品中加入2 mL硫酸,100℃水浴6.5 min进行显色反应。结果表明,该方法对乳及乳制品中皮革水解蛋白最低检测限为0.25 mg/mL,满足简便、快速的定性分析要求。

沸水浴辅助水解比色法快速定性检测生鲜乳中添加皮革水解蛋白

比色法检测皮革奶中的皮革水解蛋白具有快速简便.本文利用沸水浴辅助水解比色法水解皮革蛋白,样品经试验在3mol/L的硫酸水解下,5-15min内水解出的L-羟脯氨酸(L-Hyp)游离量大于2μg/mL,高于传统比色法检测L-Hyp的最低检出限。本文利用该方法对满足蛋白标准的皮革奶自制奶样进行了检测,试样在短时间水解所得L-Hyp经过氧化显色后所得化合物显出的红色非常明显,定性检测效果良好.

生鲜乳中添加皮革水解蛋白的测定方法研究

L-羟脯氨酸是皮革水解蛋白构成的特征氨基酸,因此鉴定L-羟脯氨酸就是鉴定皮革水解蛋白。建立UV法测定生鲜乳中皮革水解蛋白,L-羟脯氨酸浓度在0μg/mL～2.0μg/mL范围呈良好的线性关系,R=0.9998。L-羟脯氨酸平均回收率为100.2%,猪皮粉平均回收率为98.1%,皮革粉平均回收率为99.9%。该方法回收率高,检出限低,工作曲线稳定,重复性好。

乳及乳制品中皮革水解蛋白检测方法的研究进展

本文介绍了乳及乳制品中皮革水解蛋白的几种检测方法,主要包括比色法、氨基酸自动分析仪测定法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法、毛细管电泳法,并对各种方法的原理及其研究情况进行了详细阐述。

生鲜乳中皮革水解蛋白(L-羟脯氨酸)检测方法的探讨

在原卫生部指定的检测方法《乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定方法》基础上,探讨了一种较为简便快捷的检测方法,即减少样品量,并进行充分稀释,省去了调节p H值和反复移取、定容等步骤。试验结果表明,该方法的准确度、检测限和重复性均能够满足检测要求。

利用氨基酸分析仪对酱油中皮革水解蛋白标志物羟脯氨酸的鉴定

[目的]建立一种利用氨基酸分析仪分析鉴定酱油中皮革水解蛋白标志物羟脯氨酸的方法。[方法]选用4-羟基-α-吡咯甲酸为参考物质,利用氨基酸自动分析仪法和紫外分光光度计法对酱油中L-羟脯氨酸的含量进行测定,比较这2种检测方法测定羟脯氨酸的优劣点。[结果]紫外分光光度法在羟脯氨酸的质量浓度为1~6 mg/L与吸光度之间线性关系良好(R 2=0.9980),RSD为0.91%,分别添加0.5、2.0、6.0 mg/L羟脯氨酸标准溶液的加标回收率为90.0%~93.8%。氨基酸分析仪法在羟脯氨酸质量浓度为0.5~30.0 mg/L与峰面积之间线性关系良好(R 2=0.9993),RSD为0.75%,分别添加0.5、10.0、20.0 mg/L羟脯氨酸标准溶液的加标回收率为96.8%~99.7%。[结论]氨基酸分析仪法自动化程度好,重现性和准确度较好,适用于酱油中是否添加动物皮革水解蛋白的鉴定和检测,为食品安全监管提供可靠的技术支持。

生鲜乳中皮革水解蛋白快速检测方法的建立

本研究依据卫生部指定的《乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定方法》,对该方法的检测步骤和所用仪器进行了优化,建立了生鲜乳中皮革水解蛋白的酶标快速检测方法。试验结果表明,浓度在50~250μg/g范围内的阳性添加回收率为72.0%~89.2%;含量为100μg/g时的重复性验证的RSD值为2.9%。应用该方法对陕西省的11批生鲜乳与卫生部指定方法进行了比对试验,结果表明两种方法检测结果相同。与其他方法相比,该方法操作简单、成本低、污染少,检测速度快,适用于质检单位和乳品企业对生鲜乳中皮革水解蛋白的快速检测。

生鲜乳中皮革水解蛋白的检测及应用

为测定生鲜乳中皮革水解蛋白,采用UV法检测农业部生鲜乳比对盲样和2011-2015年兵团9个师的生鲜乳收购站及生鲜乳运输车的生鲜乳,按3：1比例进行抽检样品的L-羟脯氨酸。结果显示：L-羟脯氨酸的浓度在0-1.5 mg/L范围呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9993,L-羟脯氨酸的回收率为96.16%-104.84%,相对标准偏差为3.32%,农业部生鲜乳盲样比对结果全部通过,检测634批次生鲜乳均未检出皮革水解蛋白。此检测方法对兵团生鲜乳中皮革水解蛋白的测定提供重要的科学依据。

高效液相色谱柱后衍生方法测定乳制品中皮革水解蛋白

本文使用岛津氨基酸柱后衍生系统锂型分析柱建立了24种氨基酸的高效液相色谱柱后衍生分析方法。5个不同浓度标准品进样（10,50,100,250,1000ug/L）,对于大多数目标物校准曲线相关系数可达0.9999;对于L（-）-羟脯氨酸,方法的检测限（S/N=3.3）为20ug/L,定量限（S/N=10）为50ug/L。连续7针进样（250ug/L,10uL）保留时间相对标准偏差为0.01-1.38,峰面积相对标准偏差为0.01-0.83。市售某两种品牌牛奶样品检测结果表明均含有L-羟脯氨酸,为皮革水解蛋白阳性样品。

SDS-PAGE凝胶电泳在鉴别水解蛋白掺假液态乳中的应用

将不同水解度的水解蛋白按不同比例添加到液态乳中,总蛋白质量分数保持不变,其SDS-PAGE凝胶电泳图中相应电泳条带颜色较空白液态乳浅,宽度较空白液态乳窄,表明SDS-PAGE凝胶电泳法能对以水解蛋白代替乳蛋白进行有效鉴别。将水解蛋白按不同比例添加到合格液态乳中以提高其蛋白质量分数,其电泳图的相应电泳条带颜色深浅与宽度均与空白液态乳一致,表明SDS-PAGE凝胶电泳法能对添加水解蛋白以提高乳蛋白质量分数进行有效鉴别。

亲水性相互作用色谱-四极杆串联线性离子阱质谱测定蛋白食品中L-羟脯氨酸残留

建立了亲水性相互作用色谱-四极杆串联线性离子阱质谱检测含蛋白食品中的皮革水解蛋白标示物L-羟脯氨酸(L-HYP)的同时定性与定量分析方法。样品中的L-HYP经酶解后用乙腈沉淀蛋白,HLB小柱除去部分脂溶性干扰物,采用液相色谱-质谱进行测定。本方法采用IDA结合EPI模式对试样中的L-HYP进行定性分析,并建立L-HYP的二级子离子谱库。通过以MRM模式对L-HYP进行定量分析,L-HYP在12种蛋白食品中平均回收率在73.4%～114.2%(n=6)之间,相对标准偏差在2.5%～14.4%(n=6)之间,可对试样中的L-HYP在定性确证的同时进行定量分析。

“皮革奶”检测方法研究进展

在乳及乳制品中添加皮革水解蛋白,对乳品的生产和消费产生很大负面影响。对乳制品中添加皮革水解蛋白的各种不同检测分析方法进行了系统分析,以期为今后食品安全与检测提供参考。

乳及乳制品中添加皮革水解物的检测

本试验采用紫外分光光度计法测定生鲜乳L-羟脯氨酸的含量来确定是否添加皮革水解物,在前处理过程中用硫酸溶液代替了传统中氯化亚锡盐酸溶液水解样品。结果表明,L-羟脯氨酸浓度在0～2.0μg/ml呈良好的线性关系(r=0.9989),L-羟脯氨酸的回收率为92.8%～100.8%,相对标准偏差为3.02%。本方法测定皮革奶中L-羟脯氨酸的含量可操作强,重复率好,稳定性高,适合乳及乳制品中皮革水解物的测定。

柱前衍生高效液相色谱法测定乳与乳制品中羟脯氨酸的含量

本实验建立了羟脯氨酸含量的柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定乳与乳制品中皮革水解蛋白特征性成分。样品经酸水解后采用异硫氰酸苯酯(PITC)衍生后采用高效液相色谱-紫外可见检测器进行测定。采用AgelaVenusil-AA氨基酸分析专用色谱柱(4.6 mm×150 mm,i.d.5μm),柱温40℃,检测波长254 nm,梯度洗脱,流速1.0mL/min,进样量50μL。方法定量限为0.046μg/mL(S/N=10),高中低不同浓度加标回收率为98.2%～99.0%。该法具有样品处理简单,灵敏度高,回收率高,分析时间短等优点,适用于乳及乳制品中羟脯氨酸含量测定。

高效液相色谱法测定奶粉中羟脯氨酸含量

建立了柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定奶粉中羟脯氨酸含量的方法。以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,采用Elite AAK C18色谱柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm);0.05mol/L乙酸钠,乙腈/水(50:50,V:V)为流动相梯度洗脱;流速1.2mL/min;检测波长360nm;柱温27℃。结果表明:羟脯氨酸标准品在0.04～10.00mg/L范围内线性相关系数为0.9999;方法检出限为30mg/kg(S/N=10);加标浓度为0.05,8.0mg/L的平行5次测试结果相对标准偏差分别为9.64%和0.36%;0.05,0.1,0.25,0.5,1.0,2.0,8.0mg/L 7个加标水平测试,加标回收率在95.94%～114.87%之间,加标线性曲线的线性相关系数为0.9998。该方法定量结果准确,满足奶粉中羟脯氨酸含量测定的要求,可以作为判断奶粉中是否违禁添加皮革水解蛋白的依据。