皱皮木瓜中CsFPS基因的克隆及原核表达分析

目的对皱皮木瓜三萜生物合成途径中法尼基焦磷酸合酶基因进行克隆及生物信息学、原核表达分析,并考察其在皱皮木瓜果实中的表达规律。方法通过RT-PCR法进行扩增,从皱皮木瓜果实中克隆获得CsFPS1、CsFPS 2基因。采用生物信息学软件预测编码蛋白的特征,通过DNAman和Mega 6软件进行同源氨基酸比对和系统进化树的绘制,构建原核表达载体并转化至大肠杆菌中诱导表达,通过qRT-PCR法分析基因表达模式。结果CsFPS1、CsFPS 2基因的ORF长度分别为1182、1029 bp,分别编码393、342个氨基酸。两者均为稳定的酸性蛋白,无跨膜结构,二级结构显示其均由α-螺旋结构占主导。皱皮木瓜的CsFPS1蛋白与苹果的FPS蛋白单独聚成一支,CsFPS2蛋白与黄龙胆的FPS蛋白亲缘关系较高。荧光定量分析结果表明,2条CsFPS基因的表达都随果实发育而呈下降趋势,CsFPS 1基因具有更高表达。重组蛋白pET-28a-CsFPS1经SDS-PAGE电泳分析,在42 kDa处出现蛋白条带。结论本研究首次从皱皮木瓜中克隆CsFPS1、CsFPS2基因,成功构建CsFPS1重组蛋白的大肠杆菌原核表达体系,为皱皮木瓜三萜生物合成途径中FPS基因的功能验证奠定基础。

中微量元素钙、镁、硼叶面肥对皱皮木瓜果实产量和品质的影响

【目的】探究叶面喷施不同浓度钙、镁、硼肥对皱皮木瓜果实产量和品质的影响,探索最佳浓度,为皱皮木瓜合理喷施叶面肥提供科学依据。【方法】以3年生皱皮木瓜长俊为试验作物,于果实发育期分别喷施0.1%、0.2%、0.3%的Ca Cl2(C1、C2、C3),0.5%、1.0%、1.5%的Mg SO4(M1、M2、M3)和0.1%、0.2%、0.3%的硼砂(B1、B2、B3)溶液肥,以清水(CK)为对照。在果实成熟后对果实产量和品质进行测定和分析。【结果】叶面肥各处理都能在不同程度上提高果实产量和品质。处理M1提高产量效果最佳;处理B3在改善品质方面效果最好,果实纵径、横径、单果质量、固酸比最大,可溶性固形物、齐墩果酸含量最高。C1处理果实含水量最高,C2单宁含量最低,C3氨基酸、类黄酮、蛋白质含量最高;M1淀粉含量、超氧化歧化酶活性最高;B1果胶含量最高;B2可滴定酸含量最低,维生素C、可溶性糖含量最高。主成分分析结果显示,各处理得分从高到低排序依次为B3>M1>C2>C3>B1>M3>B2>M2>C2>CK。【结论】综合产量和品质因素考虑,在皱皮木瓜果实发育期间叶面喷施0.3%硼砂、0.5%MgSO4、0.2%CaCl2溶液肥效果较好。

Box-Behnken响应面法优化超声提取皱皮木瓜总黄酮工艺

以蔷薇科中的皱皮木瓜为研究对象,以其叶片为试验材料,分别进行料液比、提取时间、提取温度、乙醇浓度单因素试验探究总黄酮提取最适范围,通过响应面法(RSM)和Box-Behnken试验设计结合二次回流优化超声辅助提取总黄酮工艺。结果表明,不同因素对木瓜叶片总黄酮提取率的影响顺序为提取时间>乙醇浓度>料液比;最佳工艺条件为提取时间52 min、乙醇浓度74%、料液比1∶41(g∶mL)时,总黄酮为156.65 mg/g,提取率达到15.67%。

皱皮木瓜关键栽培技术

皱皮木瓜(Chaenomeles speciosa)是集食用、药用和观赏等多用途为一体的重要经济树种。从木瓜生长习性、栽培方法、田间管理、病虫害防治以及采收等方面系统总结了皱皮木瓜的主要栽培技术,供种植者参考。

皱皮木瓜鲜果挥发油成分及脂肪酸组成分析

本研究以巴东县皱皮木瓜为试验材料,用水蒸气蒸馏法提取成熟期干燥条件下皱皮木瓜的挥发油和脂肪酸,用GC-MS获得其挥发油和脂肪酸各成分的总离子流图谱,结合计算机检索技术对化合物进行结构鉴定,分离鉴定了挥发油70个化合物,结果表明,其相对含量≥5%的成分为L-抗坏血酸-2,6-二棕榈酸酯、α-金合欢烯、3-辛基-顺式环氧己烷基甲酯、亚油酸乙酯;分离鉴定脂肪酸成分15个,其相对含量≥5%的成分为14-甲基-十五酸甲酯、邻苯二甲酸二异丁酯、十八酸甲酯、顺-别香橙烯、[1S-(1α,3Aβ,4α,8Aβ)]-十氢-4,8,8-三甲基-9-亚甲基-1,4-亚甲基奥-长叶烯。试验证明皱皮木瓜中所含的高级不饱和脂肪酸在降血脂、抗氧化、抗炎等多个方面显示出显著的药理活性。

皱皮木瓜中三萜化合物的分离鉴定

目的：通过对皱皮木瓜中化学成分的研究，阐明其药理活性及临床作用的化学基础。方法：采用有机溶剂提取，硅胶柱层析或薄层层析分离，理化性质和波谱数据鉴定结构。结果：分离并鉴定了３个五环三萜类化合物，分别为乙酰熊果酸、３Ｏ乙酰坡模醇酸和桦木酸。结论：木瓜中的化学成分以五环三萜类化合物为主。

皱皮木瓜多糖的提取及其抗氧化活性研究

以皱皮木瓜为原料,采用水煮醇沉法研究了提取温度、提取时间、料液比、醇液比对水溶性木瓜多糖得率的影响,考察了木瓜多糖的抗氧化能力.通过正交试验确定了皱皮木瓜多糖的最佳提取工艺条件:温度96℃、提取时间3 h、醇液比3∶1、料液比1∶40,其中提取温度是影响提取工艺的显著因素,在最佳工艺条件下多糖得率达到5.0%,多糖含量为63.29%.皱皮木瓜多糖对.O2-具有显著的清除能力.

皱皮木瓜化学成分的研究

从皱皮木瓜中分得4个单体化合物，由其理化性质和波谱数据分别鉴定为10-廿九烷醇、β-谷甾醇、齐墩果酸、β-谷甾醇-β-D-葡萄糖甙。

皱皮木瓜的化学成分

目的对皱皮木瓜（Chaenomeles speciosa（Sweet．）Nakai）果实的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分进行化学成分研究。方法利用多种色谱方法进行成分分离；根据物理化学性质和波谱学手段对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果分离得到7个化合物，分别鉴定为齐敦果酸（oleanolic acid，1）、白桦酸（betulinic acid，2）、3-O-乙酰坡模酸（3-O—acetyl pomolic acid，3）、绿原酸乙酯（ethyl chlorogenate，4）、原儿茶酸（protocatechuic acid，5）、没食子酸（gallic acid，6）、曲酸（kojic acid，7）。结袷化合物4～7为未瓜屠中首精件离得刊的化舍物．

皱皮木瓜果实中有机酸成分的GC-MS分析

The constituents and contents of esterifing derivatives of organic and aqueous phases in extracts from Chaenomeles speciosa(Sweet) Nakai fruits were analysed by GC-MS.The results indicated that there were 15 and 17 compounds in organic and aqueous phases,respectively.Besides there were common fatty acids,there were a lof of binary acids and ternary acids.The contents of malic acid and citric acid in aqueous and organic phases reached to 64.007%,70.492% and 30.305%,22.121% respectively.Therefore,malic acid and citric acid are the major constituents of organic acids in C.speciosa fruits.

皱皮木瓜皮渣齐墩果酸和熊果酸提取工艺优化研究

优化利用皱皮木瓜鲜果皮渣进行齐墩果酸和熊果酸最佳提取工艺条件。在单因素实验基础上,通过正交实验设计优化皱皮木瓜鲜果皮渣齐墩果酸和熊果酸提取的最佳工艺条件,利用高效液相色谱法进行目标性成分指标检测。实验结果表明,皱皮木瓜鲜果皮渣齐墩果酸和熊果酸的最佳工艺为95%乙醇,料液比1∶15g/m L,提取时间50min,提取温度70℃,此条件下齐墩果酸和熊果酸的总提取率为1.607%。本实验所得工艺方法稳定可靠、操作简单,可以为皱皮木瓜皮渣进行齐墩果酸和熊果酸工业化生产提供参考数据。

皱皮木瓜的化学成分研究Ⅱ

目的:研究皱皮木瓜的化学成分。方法:利用多种色谱法对皱皮木瓜的化学成分进行系统研究,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从皱皮木瓜的乙酸乙酯萃取部位分离鉴定了9种化合物,分别为绿原酸甲酯(Ⅰ),5-O-咖啡酰基-奎宁酸丁酯(Ⅱ),奎宁酸丁酯(Ⅲ),5-羟甲基-2-糠醛(Ⅳ),三十烷酸(Ⅴ),(-)-表儿茶素(Ⅵ),7,8-二羟基香豆素(Ⅶ),3,4-二羟基苯甲酸乙酯(Ⅷ),原儿茶酸(Ⅸ)。结论:化合物Ⅲ～Ⅷ均为从本属植物中首次分离得到。

皱皮木瓜质量与土壤理化性质的相关性研究

目的:通过探究重庆地区撂荒多年皱皮木瓜地土壤养分与皱皮木瓜指标成分含量之间的相关性,为提高皱皮木瓜的规范化栽培技术和开展质量控制提供科学依据。方法:参照中国药典2015年版方法测定皱皮木瓜熊果酸和齐墩果酸含量,采用常规方法测定皱皮木瓜种植区土壤理化性质。结果:撂荒多年皱皮木瓜熊果酸和齐墩果酸含量普遍偏低,且样地间差异显著。熊果酸与土壤有效氮、有效磷呈极显著正相关,与pH呈极显著负相关,与速效钾呈显著正相关;其中土壤pH的影响最大,其次是有效氮和有效磷。齐墩果酸与有效氮呈极显著正相关,与有机质和pH呈极显著负相关,而与有效磷和速效钾相关性不显著;其中有机质的影响最大,其次是pH和有效氮。回归方程系数分别为0.931和0.781,表明各土壤理化性质指标可以较好地解释熊果酸含量,但不能完全用来预测齐墩果酸指标的水平。结论:土壤理化性质是影响皱皮木瓜质量的重要因素,各影响因子具有协同效应,其中土壤有效氮和pH可能是影响其药材品质的土壤主导因子。

皱皮木瓜果实发育后期品质变化及其成熟阶段的划分初探

以湖北长阳产皱皮木瓜为材料,测定果实发育后期果实鲜质量、果长、果径、果色、果实硬度以及果肉干物质量、可溶性糖含量、总酸含量和总黄酮含量等品质指标的动态变化,划分不同成熟阶段,为判断果实适宜采收期、实现优质生产提供理论参考。结果表明：（1）皱皮木瓜果实发育后期果实鲜质量、果长、果径、果肉干物质量和可溶性糖含量均呈现上升趋势;果色由绿色、黄绿色渐变为淡黄色到黄色;果实硬度、果肉总酸和总黄酮含量呈先上升后下降趋势。（2）各品质指标快速变化的时间区域存在差异,果实鲜质量在花后105-150d增加较快,果色在150d后逐渐变黄,果实硬度在花后135-165d快速下降,果肉总酸、总黄酮含量则在花后105-120d快速增加至峰值。（3）根据主成分分析结果和各品质指标的变化特点,可初步将皱皮木瓜果实发育后期划分为未成熟（花后105d之前）、早期成熟（花后120-150d）和成熟（花后165-180d）3个阶段。研究表明,随着果实成熟度的提高,皱皮木瓜果实鲜质量、果色、果肉干物质量、可溶性糖含量等指标不断升高,果实硬度逐渐下降,其食用加工品质不断提升,而在早期成熟阶段（花后120-150d）果实的药用品质则相对较高。

皱皮木瓜化学成分研究

目的：研究皱皮木瓜的化学成分。方法：利用多种色谱方法分离纯化皱皮木瓜的化学成分，并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果：从皱皮木瓜的乙酸乙酯萃取部位分离鉴定了7个化合物，分别为肉桂酸（Ⅰ）、2＇-methoxyaucuparin（Ⅱ）、2-羟基-丁二酸4-甲酯（Ⅲ）、七叶内酯（Ⅳ）、对羟基苯甲酸（Ⅴ）、绿原酸（Ⅵ）和咖啡酸（Ⅶ）。结论：化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从木瓜属中分离得到。

反相高效液相色谱测定不同品种皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量

采用反相高效液相色谱法测定鲜皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量,并进行方法学考察。采用AgilentC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-1%HAc水溶液(85:15);流速:0.6ml/min;柱温:35℃;检测波长:210nm。齐墩果酸在0.162～6.48μg范围内线性良好,回归方程为y=512802x+19211(R2=0.9997),平均回收率分别为100.2%,RSD为0.9%(n=6);熊果酸在0.391～15.62μg范围内线性良好,回归方程为y=50865x-5090.4(R2=0.9998),平均回收率为100.0%,RSD为1.1%。该方法简便准确,重现性好,适用于鲜皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸的定量分析。

皱皮木瓜 前景美好

木瓜，为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠（Chaenomeles speciosa（Sweet）Nakai）的近成熟果实，皱皮木瓜是其果实加工而形成的产品。木瓜有“百益之果”之称，被列为卫生部2003年首批认定的药食兼用食品之一。木瓜属植物5种，2005年版国家药典规定：皱皮木瓜是药用木瓜的正品，光皮木瓜不再作为药用木瓜。

皱皮木瓜真空冻干工艺优化及基于LF-NMR技术的复水特性研究

目的:对皱皮木瓜片的真空冷冻条件进行优化,研究木瓜片复水过程中水分状态变化。方法:采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法,分别以复水比和色差值为指标,考察木瓜片厚度,真空冷冻干燥机的隔板温度以及真空度3个因素对冻干工艺的影响,优化皱皮木瓜片冻干工艺;利用低场核磁共振技术比较真空冷冻干燥和热风干燥的木瓜片成品复水过程中水分状态的变化情况。结果:确定皱皮木瓜真空冷冻干燥的复水比最佳工艺条件:木瓜片厚度4mm,隔板温度40℃,真空度2.4mbar;色差值最优的组合为:木瓜片厚度7.45mm,隔板温度28.37℃,真空度2.02mbar。NMR试验表明,复水过程中进入木瓜片中的水很快转化为不易流动水,结合水和自由水变化不大,且真空冷冻干燥的木瓜片中不易流动水增加较快,说明冻干比热风干燥的木瓜片品质好。结论:本研究结果为优化的皱皮木瓜真空冷冻干燥工艺参数,低场核磁共振技术可用于表征皱皮木瓜复水过程中水分状态的变化。

不同培养条件和贮藏方法对皱皮木瓜花粉萌发率的影响

采用离体培养法探讨了温度及蔗糖、H3BO3、CaCl2溶液浓度对皱皮木瓜花粉萌发率的影响,以及不同贮藏及解冻方法对花粉活力的影响.结果表明:皱皮木瓜花粉萌发的最适温度为20℃,最适蔗糖、H3BO3、CaCl2溶液浓度分别为150g/L、20mg/L和50mg/L.在上述最佳单因子组合条件下,花粉萌发率高于任一单因子的促进作用.4℃预冷3h,-83℃超低温冷冻保存,37～40℃水浴快速解冻(4～5min)后立即放于20℃水浴中的方法较有效地保持了花粉的活力.