目的探讨内质网膜蛋白Herpud1在盆底肌萎缩模型中的表达与作用。方法分别各取10只4月龄未生产过的野生型C57BL/6J小鼠(WT组)和盆底肌萎缩模型基因小鼠(T型钙离子通道编码基因CACNA1H敲除小鼠:Cacna1h-/-mice/TH-null组),异氟烷麻醉小鼠...目的探讨内质网膜蛋白Herpud1在盆底肌萎缩模型中的表达与作用。方法分别各取10只4月龄未生产过的野生型C57BL/6J小鼠(WT组)和盆底肌萎缩模型基因小鼠(T型钙离子通道编码基因CACNA1H敲除小鼠:Cacna1h-/-mice/TH-null组),异氟烷麻醉小鼠后,电生理记录仪对小鼠进行尿动力学指标的检测;处死小鼠后取盆底肌行免疫组化染色和Western-blot实验,分析Herpud1蛋白和mRNA水平的表达变化。选择鼠源C2C12成肌细胞分化4d形成肌管后,予以T型钙离子通道抑制剂NNC55-0396水合物(NNC)处理24h和48h,构建肌管萎缩细胞模型,Western-blot法检测Herpud1蛋白表达。结果小鼠尿动力学检测结果显示,与WT组小鼠相比,TH-null组小鼠膀胱漏尿点压(bladder leak point pressures,BLPP)值[(46.54±1.102)cmH_(2)O vs(31.55±2.177)cmH_(2)O]、最大膀胱容量值(0.1145±0.003023 vs 0.0691±0.004423)均显著降低,差异有统计学意义(P<0.0001);免疫组化染色、Western-blot检测结果均显示TH-null组小鼠盆底肌中Herpud1表达下降。C2C12分化肌管萎缩模型显示NNC处理以时间依赖的方式降低了Herpud1蛋白的表达水平。结论①Cacna1h-/-基因小鼠盆底肌萎缩模型中存在尿动力学指标的异常,说明盆底肌萎缩与压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)等盆底功能障碍病症发生相关;②Cacna1h-/-基因小鼠盆底肌萎缩模型和肌管细胞萎缩模型中Herpud1表达水平均下降,Herpud1在盆底肌萎缩过程中可能具有重要调节作用。展开更多
文摘目的探讨内质网膜蛋白Herpud1在盆底肌萎缩模型中的表达与作用。方法分别各取10只4月龄未生产过的野生型C57BL/6J小鼠(WT组)和盆底肌萎缩模型基因小鼠(T型钙离子通道编码基因CACNA1H敲除小鼠:Cacna1h-/-mice/TH-null组),异氟烷麻醉小鼠后,电生理记录仪对小鼠进行尿动力学指标的检测;处死小鼠后取盆底肌行免疫组化染色和Western-blot实验,分析Herpud1蛋白和mRNA水平的表达变化。选择鼠源C2C12成肌细胞分化4d形成肌管后,予以T型钙离子通道抑制剂NNC55-0396水合物(NNC)处理24h和48h,构建肌管萎缩细胞模型,Western-blot法检测Herpud1蛋白表达。结果小鼠尿动力学检测结果显示,与WT组小鼠相比,TH-null组小鼠膀胱漏尿点压(bladder leak point pressures,BLPP)值[(46.54±1.102)cmH_(2)O vs(31.55±2.177)cmH_(2)O]、最大膀胱容量值(0.1145±0.003023 vs 0.0691±0.004423)均显著降低,差异有统计学意义(P<0.0001);免疫组化染色、Western-blot检测结果均显示TH-null组小鼠盆底肌中Herpud1表达下降。C2C12分化肌管萎缩模型显示NNC处理以时间依赖的方式降低了Herpud1蛋白的表达水平。结论①Cacna1h-/-基因小鼠盆底肌萎缩模型中存在尿动力学指标的异常,说明盆底肌萎缩与压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)等盆底功能障碍病症发生相关;②Cacna1h-/-基因小鼠盆底肌萎缩模型和肌管细胞萎缩模型中Herpud1表达水平均下降,Herpud1在盆底肌萎缩过程中可能具有重要调节作用。
