萎缩芽胞杆菌MQ19ST15鉴定及对甘蓝枯萎病的盆栽防效

为筛选用于甘蓝枯萎病的生防菌并明确其对病原菌的抑菌活性和盆栽防治效果,对从荒漠沙土中分离、筛选的细菌菌株MQ19ST15进行了对峙培养、抑菌活性物质测定、盆栽防效测定和种类鉴定。结果表明,菌株MQ19ST15能够显著抑制病原菌的菌丝生长,使菌丝出现膨大、变形扭曲及分支增多等畸变,抑菌率达54.95%。抑菌活性物质检测显示,该菌株能产生淀粉酶、蛋白酶、果胶酶及β-1,3-葡聚糖酶;抗菌脂肽物质合成相关基因扩增显示其基因组DNA中具有surfactin、iturin、fengycin和bacillomycin 4种抗菌脂肽物质的合成调控基因。盆栽试验结果显示,该菌株对甘蓝枯萎病的防控效果为53.03%。通过菌落形态、16S rRNA基因和gyrB基因序列分析将其鉴定为萎缩芽胞杆菌Bacillus atrophaeus。

长枝木霉菌T115D诱导大豆叶片防御酶活性及疫病盆栽防治效果

采用分光光度和盆栽方法,分别测定长枝木霉菌T115D对大豆叶片防御酶活性的影响及大豆疫病的防治效果。结果表明,菌株T115D发酵液的不同处理均可诱导大豆叶片PAL、POD、PPO、SOD和CAT的活性增强,并且比单独接种疫霉菌处理的酶活持续时间长、峰值高;提前接种木霉有孢子发酵液后,第2 d再挑战接种大豆疫霉菌的处理诱导效果最好,PAL、POD、PPO和CAT 4种酶的活性在处理后第5 d达到最大值,分别是Petri培养液对照处理的2.5、6.6、4.8和3.5倍。菌株T115D发酵液不同处理均可降低大豆疫病的发生。发酵液喷雾处理中,提前1d接有孢子发酵液,第2d接大豆疫霉菌处理的防效最好,其防效为73.3%,显著高于其他处理;发酵液灌根处理中发酵液和疫霉菌同时灌根处理的防效最好,其防效为51.8%,显著高于其他处理。菌株T115D发酵液不同接种量对大豆疫病的防治效果,以接有孢子的发酵液15 mL最高,防效为达70.9%。

贝莱斯芽孢杆菌对大豆根腐病盆栽防效及防御酶活性检测

大豆根腐病是较难防治的土传病害,本实验以前期研究工作中分离得到的生防菌HM3-3,经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌为研究对象,开展对此菌的生物防治探究具有十分重要的意义。探究生防菌对大豆根腐病盆栽防治效果、拮抗物质及防御酶活性。采用盆栽法、紫外分光光度计法、培养基检测法检验其盆栽防效、促生作用、防御酶活性及溶菌作用。结果显示,盆栽防效检验时,在接种生防菌HM3-324 h后接种大豆根腐病致病菌,接种7 d后计算其防效,盆栽防效为46%;促生作用检验时,喷施生防菌的植株叶绿素含量、株高、鲜重、茎粗均高于对照组,有较明显的促生作用;防御酶检测分为4个处理,其中喷洒生防菌后接种致病菌的处理在接种72 h后大豆叶片内的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均达到峰值,且生防菌处理防御酶活性均高于对照组。单独接种致病菌的植株在24 h内各种酶活性达到峰值;基于平板培养检验其溶菌作用,将HM3-3接种于蛋白酶,纤维素酶,几丁质酶及嗜铁素的培养基上,其中蛋白酶,纤维素酶,嗜铁素培养基上均出现透明圈,说明生防菌HM3-3具有以上3种酶。综上所述,HM3-3不仅具有促生作用,对于大豆根腐病还有防治作用,当病原菌侵染大豆时,生防菌HM3-3一方面可以诱导大豆体内防御酶的活性,另一方面,通过分泌相关溶解致病菌的酶类,破坏致病菌的细胞壁,以此对致病菌进行防御。

烟草西柏烷二萜对三七根腐病原真菌的抑制活性及盆栽防效

[目的]探究烟草西柏烷二萜在三七根腐病防治中的应用价值。[方法]采用菌丝生长速率法和盆栽试验测定烟草西柏烷二萜对三七根腐病致病真菌(人参链格孢菌、毁灭柱孢菌、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌)的抑制活性和防治效果。[结果]烟草西柏烷二萜对4种真菌均具有较好抑制活性,其EC_(50)值分别为34.6、36.2、26.2、33.3 mg/L;西柏烷二萜在150、300 mg/L处理下,对三七根腐病的防效均优于化学药剂(多菌灵与菌核净交替使用),其中150 mg/L处理时三七主根产量也显著优于化学药剂。[结论]烟草西柏烷二萜在三七根腐病绿色防控中具有应用潜力。

四株生防菌对大豆根腐尖镰孢菌及根腐病的作用效果

为筛选评价优良生防菌,本试验选取4株生防菌,通过平板扩散法对大豆根腐病优势致病菌尖孢镰刀菌进行平板抑菌试验测定及盆栽防效初探。结果表明:枯草芽孢杆菌HMGR-8和解淀粉芽孢杆菌NH2对靶标菌表现出较好的抑制作用,抑制率分别是46.52%和65.95%,木霉菌4-R-8以竞争方式对靶标菌产生强抑制作用。木霉菌MM2除了以重寄生方式抑制靶标菌外,其代谢产物对靶标菌菌丝生长起到了一定抑制作用。盆栽试验中,4株生防菌均有不同程度的促生作用,且经木霉菌MM2菌悬液和枯草芽孢杆菌HMGR-8发酵液单一菌剂处理以及两者混合处理的植株病情指数为25.33%、25.60%和24.17%,与化学药剂多菌灵处理组病情指数17%差异不显著,与只接病原菌处理组病情指数53.33%差异显著。筛选出的木霉菌MM2和枯草芽孢杆菌HMGR-8可有效降低大豆根腐病的危害程度。

防控烟草青枯病植物免疫诱抗剂的筛选及其防治效果测定

【目的】为了探索可用于烟草青枯病防治的植物免疫诱抗剂,对4种药剂的抑菌活性和防治效果进行筛选和测定。【方法】利用平板抑菌和盆栽防控效果测定分析,以及测定其最小抑菌浓度(MIC)值和最小杀菌浓度(MBC)值研究不同植物免疫诱抗剂对烟草青枯病的防治效果。【结果】氨基寡糖素和纳米NA NO ZnO显示了一定的平板抑菌效果,其中5000μg/mL的氨基寡糖素平板抑菌效果最佳,抑菌圈直径达35.2 mm,其MIC和MBC分别为1000、2000μg/mL;不同浓度智能聪和阿泰灵均没有显示平板抑菌效果;而盆栽防治效果显示,智能聪对青枯病的防治效果最好,接种后10 d进入发病高峰期,此时其防效可达57%,显著高于同一时期链霉素处理37%的防治效果,且可延缓病害发生;而平板抑菌效果显著的氨基寡糖素盆栽防效仅为13%,纳米NANO ZnO和阿泰灵防效分别为3%、15%,防治效果较差。【结论】植物免疫诱抗剂智能聪具有较大的生防潜力,可用于烟草青枯病的绿色防控。

根际细菌吡咯伯克霍尔德氏菌YZU-S377对棉花黄萎病的防效及其促生作用研究

吡咯伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pyrrocinia)YZU-S377(S377)是前期获得的1株水稻根际细菌,对植物病菌具有广谱抑制作用。为探究S377对棉花黄萎病的生防潜力,测定了菌株S377对棉花黄萎病的盆栽防效、在棉花植株内的定殖动态及其促生作用。结果表明,菌株S377对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)的相对抑制率为89.22%,盆栽防效为62.53%;经S377无菌滤液处理后,棉花种子发芽率提高了22.22个百分点,棉花幼苗根长增加了27.78 mm,地上鲜质量增加了0.73 g;菌株S377可以形成生物被膜,在OD 600等于0.15和0.25时形成生物被膜强度较显著,在棉花植株根部可以持续定殖21 d,其数量呈先增后减趋势。上述结果表明,菌株S377对棉花黄萎病具有良好的生防潜力。

香蕉枯萎病菌拮抗细菌的分离、鉴定及盆栽防治试验

采集并分离自广西发病香蕉园的土壤和香蕉组织表面及内生的细菌,筛选对尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusarium oxysprum f.sp.cubense race 4,FOC4)有拮抗作用的细菌菌株,并进行盆栽防治试验,以期探索香蕉枯萎病的生物防治方法。

生防菌组合防控精品西瓜枯萎病的效果初探

【目的】筛选出对精品西瓜枯萎病具有防效的生防菌组合。【方法】将实验室筛选的5种生防菌株23(Bacillus amyloliquefaciens)、25(Exiguobacterium acetylicum)、28(B.pumilus)、37(B.licheniformis)、156(B.cereus)分别进行复配获得31个组合,通过平板对峙试验和分隔平板研究生防菌及其菌源VOCs的平板抑菌效果,测定其对西瓜种子和幼苗生长的影响,以及通过盆栽试验测定其对西瓜枯萎病的效果。【结果】31个生防菌组合对西瓜枯萎病菌的平板颉颃具有显著差异,其中组合28(23+28+37+156)抑菌率达68.06%;组合13(28+37)的菌源VOCs抑菌率可达41.60%;各组合预处理的西瓜种子和幼苗出苗率与对照无显著差异,但随着组合的复配单菌数量增加,种子萌发率和子叶出土率呈现下降趋势;盆栽试验中,各组合对西瓜枯萎病的防治效果存在差异,其中组合22(25+28+37)的防治效果高达61.1%。【结论】生防菌组合对西瓜枯萎病菌的平板颉颃和盆栽防治效果存在差异,预测2个或3个单菌复配的效果可能最佳,且颉颃型组合更利于防病。

辣椒疫霉病菌拮抗菌的筛选鉴定及生防潜力

从湖南省长沙、衡阳、岳阳等地辣椒种植区土样中分离筛选出6株拮抗辣椒疫霉病菌的放线菌,采用含毒介质法检测,发现L57-60菌株发酵液的5倍稀释液对辣椒疫霉菌的抑制效果达到98.61%;通过形态学特征观察、生理生化特性鉴定以及16S rDNA、recA基因、atpD基因和rpo B基因联合建树分析,确定L57-60菌株为橄榄色链霉菌(Streptomycesolivaceus)。抗菌谱测定结果表明,L57-60菌株发酵液对辣椒枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、烟草炭疽病菌(Colletotrichummicotianae)、水稻纹枯病菌(Thanatephoruscucumeris)等12种病原菌均有拮抗作用。运用正交试验对L57-60菌株发酵培养基的碳源和氮源配比进行优化,结果最适培养基为高氏1号培养基,大米粉质量分数4%,黄豆粉质量分数0.5%。盆栽试验结果表明,L57-60菌株发酵液对辣椒疫霉的防效达到73.1%。

胡萝卜黑腐病生防放线菌G-1抑菌活性研究

为筛选出对胡萝卜黑腐病防治具有良好效果的放线菌,采用平板稀释涂布法、对峙培养法、生长速率法、盆栽试验和16S rRNA序列分析,对胡萝卜表层土中的放线菌分离、抑菌活性、盆栽防效和分类地位进行研究。结果表明,15株放线菌中仅菌株G-1对胡萝卜黑腐交链孢(Alternaria radicina)具有较好抑菌活性,其平板和发酵液抑菌率分别为77.2%、78.5%,显著高于其他菌株;经16S rRNA序列分析,将该菌株鉴定为微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus);盆栽防效以稀释50~100倍效果较好,可保持70%以上防效。综上所述,菌株G-1在胡萝卜黑腐病生物防治中具有良好应用价值。

马铃薯黑痣病生防芽孢杆菌的筛选与鉴定

马铃薯黑痣病是我国马铃薯主产区普遍发生、危害严重的一种土传病害。为筛选出对马铃薯黑痣病具有生防作用的芽孢杆菌,从河北省和内蒙古自治区马铃薯连作黑痣病发生严重的地块采集健康植株上的根际土,采用土壤稀释法和平板对峙法分离筛选出6株对黑痣病菌抑制效果较好的菌株(抑菌带宽度>6.0 mm),研究温度对生防菌株抑菌效果的影响。结果表明,温度降低,抑菌效果减小,温度为15℃时,菌株HN-Q-8抑菌效果显著高于其他菌株,当温度降为10℃时,无抑菌作用。以形态学特征为基础,结合gyrB序列系统发育分析,筛选出来的6个菌株经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。盆栽防效试验表明,贝莱斯芽孢杆菌HN-Q-8对马铃薯黑痣病的防效为52.72%~61.22%。

加工番茄叶霉病的防治药剂筛选及其品种抗性鉴定

本研究针对加工番茄叶霉病菌进行了药剂室内毒力测定和盆栽防效试验,并对14份加工番茄品种抗叶霉病进行了评价,目的是筛选出对加工番茄叶霉病具有良好防效的药剂和抗病品种。结果表明:30%烯酰·咪鲜胺SC抑菌效果最好,其EC50为0.006mg/mL。防效试验中,5种药剂均有一定的抑菌效果;22.5%异菌脲SC、56.7%氢氧化铜WG、47%春雷王铜WP和30%烯酰·咪鲜胺SC对叶霉病的防效均在60%以上。供试的14份加工番茄品种中,没有发现高抗品种,中抗品种4个,感病品种8个,高感品种2个。‘屯河9号’、‘石红666’、‘金红宝87-5’和‘737’为中抗品种,‘石红18’和‘石红45’为高感品种,其余为感病品种。

瓜类细菌性果斑病菌拮抗细菌的筛选及其抑菌作用

从土壤中筛选出抑制哈密瓜细菌性果斑病的拮抗菌株,明确其分类地位,测定其生长条件及防病效果。采用梯度稀释法及平板对峙法进行菌株的分离及筛选,综合形态学观察、生理生化测定以及分子鉴定等多方面对菌株进行鉴定,确定生防菌种属,并测定其最适生长条件,利用平板对峙法测定其抑菌作用,并分别采用针刺接种法、叶面喷施法对生防菌的离体叶片和盆栽防病试验进行测定。本研究从土样中共分离出196株细菌,经对峙筛选发现有20株细菌具有抑菌效果,其中编号为131、791的两株细菌对哈密瓜细菌性果斑病病原菌具有较好的平板拮抗效果,抑菌圈直径分别为(19.03±0.13)mm,(17.55±0.29)mm。经鉴定菌株131为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis),菌株791为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)。菌株131的最适生长条件为NB培养基,培养18 h,温度37℃,pH 7,接种量为2%。菌株791的最适生长条件为KB培养基,培养18 h,温度37℃,pH 6,接种量为1%。菌株131和791对哈密瓜细菌性果斑病的离体叶片防效分别为83.33%和87.53%,室内盆栽防效分别为69.86%和77.99%,同时也对多种病原真菌具有抑制作用。菌株131和791均为对哈密瓜细菌性果斑病具有较好防效的芽孢杆菌(Bacillus),对瓜类作物细菌性果斑病的防治提供了理论补充,奠定了果斑病害生物防治的基础。

马铃薯黑痣病菌拮抗细菌的筛选及鉴定

为分离筛选出对马铃薯黑痣病菌有较强拮抗作用的生防菌,采用平板对峙筛选拮抗细菌,盆栽试验测定其防治效果,通过形态特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列鉴定生防细菌。结果表明,通过筛选获得1株有明显拮抗效果的细菌KSD17,菌株平板对病菌抑菌率高达78.91%。该菌株具有产纤维素酶、蛋白酶、β-1,3-葡聚糖酶能力,盆栽防效为66.17%,且对马铃薯植株株高和匍匐茎数均有提高,分别增加了9.05%和22.0%。菌落呈不透明乳白色,无皱褶,粘稠,无色素产生,边缘不规则,结合16S rRNA基因序列和生理生化分析,将其鉴定为多粘类芽孢杆菌。拮抗菌株KSD17是具有较强生防潜能的菌株,对防治马铃薯黑痣病生物菌剂的开发具有良好的前景。

15%甲霜灵微胶囊缓释剂制备及对烟草黑胫病的防治效果

为明确15%甲霜灵微胶囊缓释剂配方及对烟草黑胫病的防治效果,采用原位聚合法制备并优化工艺,对获得的微胶囊进行释放规律研究及评价,并通过盆栽试验确定其防治效果。结果显示,微胶囊缓释剂最佳配方为(用质量分数表示):15%甲霜灵原药、27%二甲苯、2.5%农乳0203、2%氯化铵、4%乙二醇、0.2%黄原胶、2%NNO、47.3%水;制备优化工艺为:芯壁比例1∶1、搅拌速度400 r/min、调酸时间2 h、p H 4.5。所获得微胶囊制剂表面光滑致密无凹陷,大小均一,平均粒径12.93μm,包覆率93.58%。制剂有效成分在水相中缓慢释放,0~24 h为初期释放阶段,符合一级动力学方程,R2为0.9115,累计释放量达29.52%;24~360 h为匀速释放阶段,符合零级释放动力学方程,R2为0.9945,累计释放量为29.52%~93.22%;360 h后趋于稳定。施用所制备的15%甲霜灵微胶囊21 d后对烟草黑胫病的盆栽防治效果为82.2%,高于25%甲霜灵可湿性粉剂(75.7%)。表明制备的15%甲霜灵微胶囊具有良好的缓释性,对烟草黑胫病有较好的防治效果。

一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌的ARTP诱变与筛选

旨在利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术获得番茄枯萎病高效拮抗突变株。以一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌N为初始菌株进行诱变处理,通过检测抑菌圈进行突变株筛选,并通过盆栽实验初步研究防效。通过拮抗带筛选以及抑菌圈复筛选出5株正突变菌株,其中正突变幅度最高的菌株为62,较初始菌株的抑菌圈直径提高了31.43%。经过6次传代,证实该突变株具有良好的遗传稳定性。盆栽实验表明,突变株62对于番茄枯萎病的防效达到75.76%。通过ARTP诱变获得的突变株稳定性好、拮抗效果提高明显,在防治番茄枯萎病方面有很好的应用前景。