基于JAK2/STAT3信号通路探究益正方调控肺脾气虚型反复呼吸道感染模型大鼠免疫功能的实验研究

目的:基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路探究益正方对肺脾气虚型反复呼吸道感染(RRTI)模型大鼠免疫功能的影响。方法:60只SD大鼠分为对照组,RRTI组,低、中、高剂量益正方组(10、20和30 g/kg益正方生药灌胃),以及JAK2抑制剂AG490组(5 mg/kg AG490腹腔注射),每组各10只。除对照组外,其余组大鼠采用疲劳结合饮食失节法及刨花加烟叶烟熏法构建肺脾气虚型RRTI模型。观察大鼠一般状态;检测大鼠肺功能[1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)和呼气峰流速(PEF)];计算大鼠脾脏和胸腺指数;HE染色观察肺组织病理学改变;ELISA法检测血清中免疫球蛋白A(IgA)、IgM、IgG、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)和IL-17水平,以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中分泌型IgA(sIgA)水平;流式细胞术检测外周血中CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞比例;Western blot法检测肺组织中JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,RRTI组大鼠一般状态较差,且肺组织存在明显病理损伤,同时肺损伤评分,FEV1、FVC、FEV1/FVC和PEF水平,脾脏和胸腺指数,血清IgA、IgM、IgG和IL-4水平,BALF sIgA水平,以及外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞水平均显著降低,而血清TNF-α和IL-17水平,以及肺组织中p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3比值均显著升高(P<0.05);与RRTI组相比,低、中、高剂量益正方组和AG490组大鼠一般状态有所改善,肺组织病理损伤有不同程度减轻,同时肺损伤评分,FEV1、FVC、FEV1/FVC和PEF水平,脾脏和胸腺指数,血清IgA、IgM、IgG和IL-4水平,BALF sIgA水平,以及外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞水平均显著升高,而血清TNF-α和IL-17水平,以及肺组织中p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3比值均显著降低(P<0.05),且益正方各治疗组呈剂量依赖性。结论:益正方能够缓解肺脾气虚型RRTI大鼠肺损伤并改善免疫功能,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活、减轻全身炎症反应有关。

益正方治疗小儿肺脾气虚型反复呼吸道感染的临床观察

结合院内诊治儿童反复出现呼吸道感染的情况,观察采用中药方剂益正方的临床治疗效果,并采集数据进行分析,以期为益正方在临床治疗推广上提供数据支持。方法 本研究随机选取于本院2021年10月至2022年10月期间内进行呼吸道反复感染疾病治疗的86例患儿,并随机对半分组为观察组与对照组,每组含43例患儿。于对照组采用西药治疗方法,选用免疫调节剂脾氨肽口服冻干粉,而观察组则采用益正方进行治疗,从而对比中西药治疗儿童反复呼吸道感染的治疗效果。在研究过程中以反复呼吸道感染的临床症状以及反复感染情况、治疗有效率等为主要观察指标。结果 首先在进行治疗前对每位患儿进行数据搜集,经对比发现两组患儿之间的数据并不存在明显差异(P>0.05),可用于临床研究。而在临床治疗后,发现两组患儿的各种症状数据均显著降低,其中观察组降低水平高于对照组,且具有显著差异(P<0.05),具有统计学分析价值。此外,对患儿的治疗效果进行家长满意度调查,结果表明,观察组中家长满意度更高,可达93%,且经数据对比分析后可知,两组患儿治疗效果的家长满意度调查结果存在统计学差异(P<0.05)。结论 针对儿童反复呼吸道感染的中医药治疗方案中,采用益正方进行治疗能够取得较为理想的治疗效果,使患儿的各项症状得到有效缓解,且反复感染次数减少,因此,该临床观察可为益正方在儿童反复呼吸道感染的临床应用提供数据支持。

探究益正方对反复呼吸道感染模型大鼠肺泡上皮细胞焦亡的影响

目的基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路探究益正方对反复呼吸道感染(RRTI)模型大鼠肺泡上皮细胞焦亡的影响。方法SD大鼠首先分为正常组和模型组,模型组大鼠采用疲劳结合饮食失节法和刨花加烟叶烟熏法诱导脾气虚证和肺气虚证的RRTI大鼠模型。随后将模型组大鼠依次分为:RRTI模型组(灌胃生理盐水0.5 mL·100 g^(-1)·d^(-1))、玉屏风散对照治疗组(灌胃玉屏风散混悬液0.5 mL·100 g^(-1)·d^(-1))以及益正方高、中、低剂量组(灌胃益正方0.75、0.5、0.25 mL·100 g^(-1)·d^(-1)),正常组依旧为正常组(灌胃生理盐水0.5 mL·100 g^(-1)·d^(-1))。观察大鼠一般活动情况并通过AniRes2005动物肺功能分析系统检测大鼠肺功能;ELISA检测大鼠血清中炎症因子的表达情况;HE、PAS和TUNEL染色检测肺组织的病理学变化;Western blot检测细胞焦亡以及HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果与正常组比较,RRTI模型组肺功能被削弱;炎症反应升高,肺组织损伤、水肿及细胞凋亡均明显加重;同时,细胞焦亡加重,HMGB1/TLR4/NF-κB通路被激活(P<0.05)。与RRTI模型组比较,玉屏风散对照治疗组以及益正方高、中、低剂量治疗组肺功能均有不同程度的缓解;炎症反应降低,肺组织损伤、水肿和细胞凋亡减轻;同时细胞焦亡和HMGB1/TLR4/NF-κB通路受到抑制(P<0.05)。益正方高剂量治疗组与玉屏风散对照治疗组对RRTI模型大鼠的疗效相似(P>0.05);且益正方在治疗RRTI模型大鼠的过程中呈剂量依赖性(P<0.05)。结论益正方抑制RRTI模型大鼠肺泡上皮细胞焦亡,减轻炎症反应,进而保护肺组织免受损伤,此过程可能与HMGB1/TLR4/NF-κB通路有关。

田正鉴“宣-清-润”中西医结合治疗慢性咳嗽

田正鉴教授认为内因脏腑虚损,气血阴阳失于调和,肺脏虚弱,阴伤气耗,肃降无权,气逆,发为慢性咳嗽;提出"中西医结合,辨证论治,宣、清、润"的治疗大法,调护正气,自创润肺益气止咳方遣药配伍注意药味、剂量,联合西药,优势互补。