基于网络药理学探讨益气化痰活血方治疗甲状腺功能减退症的作用机制

目的:基于网络药理学探讨益气化痰活血方治疗甲状腺功能减退症的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、化学专业数据库、本草组鉴平台筛选出益气化痰活血方的活性成分,利用Swiss Target Prediction数据库预测活性成分的潜在靶点。利用Gene Cards数据库、Dis Ge NET数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索甲状腺功能减退症的相关靶点。利用STRING数据库对药物与疾病交集靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用网络构建,获得益气化痰活血方治疗甲状腺功能减退症的关键靶点。利用Metascape对关键靶点进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路与基因本体论(GO)功能富集分析。结果:得到药效成分46个、药物靶点266个、甲状腺功能减退症靶点1 294个,最终获得关键靶点69个、KEGG通路2条。益气化痰活血方治疗甲状腺功能减退症主要成分为槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚等,关键靶点为白细胞介素(Interleukin,IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt Serine/Threonine Kinase,Akt)、血管内皮生长因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A,VEGFA),关键的信号通路可能包括磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3-kinase-Akt,PI3K-Akt)信号通路、晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)信号通路等。结论:本研究初步揭示了益气化痰活血方多成分、多靶点、多途径治疗甲状腺功能减退症的机制,为益气化痰活血方的临床开发利用提供了依据。

益气化痰活血方治疗中低危肺血栓栓塞症20例

国内针对肺血栓栓塞症(PTE)相关流行病学研究较少,其发生率随着年龄增长而上升,65岁及以上的老年人PTE的发生率为每10万人中18.6人^([1])。PTE危险分层主要基于患者血流动力学状态,心肌损伤标志物及右心室功能等进行综合评估。低危PTE血流动力学稳定,不存在右心功能不全及心脏生物学标志物升高^([1])。笔者主要研究中低危组肺血栓栓塞症。

益气化痰活血方联合噻托溴铵治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病疗效观察

目的:观察益气化痰活血方联合噻托溴铵治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的临床效果。方法:80例随机分为对照组和观察组各40例,对照组用噻托溴铵治疗,观察组用益气化痰活血方联合噻托溴铵治疗。结果:治疗后两组肺功能指标均提高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。血清炎性因子指标均降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组中医证候积分优于对照组(P<0.05)。两组急性发作次数、住院次数、持续时间均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:益气化痰活血方联合噻托溴铵治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病可提高疗效。

益气化痰活血方对AIT小鼠甲状腺Ets-1、IL-17基因表达的影响

目的:研究益气化痰活血方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺Ets-1、IL-17基因表达的影响,从分子水平说明其影响AIT的部分机制。方法:60只8周龄NOD.H-2h4小鼠,随机分为正常组(NG),模型组(MG),西药组(SeG),益气化痰活血方高、中、低剂量组(YG-1、YG-2、YG-3),每组10只,正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含高碘化钠水(浓度0.05%)。8周后分别以蒸馏水,阳性对照药硒酵母混悬液,益气化痰活血方高、中、低剂量的水煎液给各组小鼠灌胃。8周后取小鼠甲状腺,RT-PCR法检测E26transformation-specific-1(Ets-1)、白细胞介素-17(IL-17)mRNA表达。结果:①与模型组比较,益气化痰活血方组均能使Ets-1 mRNA的表达水平上调(P<0.01);②与模型组比较,益气化痰活血方组均能使IL-17 mRNA的表达水平下调(P<0.01)。结论:益气化痰活血方能上调Ets-1基因表达水平,进而使IL-17炎症水平下降,这可能是其改善AIT小鼠免疫失常的机制之一。

益气化痰活血方治疗中风先兆30例

目的观察益气化痰活血方治疗中风先兆证的疗效。方法中风先兆证患者60例分为2组,治疗组和对照组各30例。对照组口服阿司匹林片100mg,每日1次,治疗组在此基础上予益气化痰活血方水煎服,每日1剂,分两次服用。2组疗程均为6月,观察2组治疗前后临床疗效。结果益气化痰活血方与阿司匹林片联用后,总有效率为96.67%,优于阿司匹林片组的80%(P<0.05)。结论益气化痰活血方配合阿司匹林口服能有效控制中风先兆。

自拟益气化痰活血方治疗急性缺血性脑卒中的临床观察

目的观察自拟益气化痰活血方治疗急性缺血性脑卒中的临床疗效。方法将80例急性缺血性脑卒中患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组各40例,两组均给予基础治疗(包括改善侧支循环、抗血小板聚集、调脂等),治疗组在西医常规治疗方案的基础上加用益气化痰活血方,治疗疗程为14 d。观察其治疗前后中医证候总积分、主要证候单项积分、神经功能缺损程度(NIHSS)、运动功能(Fugl-Meyer)评分、C反应蛋白以及安全性指标(血常规、肝肾功、心电图、大小便常规)。结果治疗后两组患者的疗效指标均较治疗前有所改善,且治疗组的改善程度大于对照组(P<0.05),治疗组临床总有效率优于对照组(P<0.05)。结论自拟益气化痰活血方可提高急性缺血性脑卒中患者的临床疗效,对炎症因子指标有下调作用。

益气化痰活血方对自身免疫性甲状腺炎小鼠肠道菌群的影响

目的从肠道菌群角度探讨益气化痰活血方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠的影响。方法选取6~8周龄CBA/J雌性小鼠15只适应性喂养1周后,随机分为对照组(DZ)、模型组(MX)、益气化痰活血方组(ZY),每组各5只,DZ组小鼠给予皮下多点(背部皮下、颈部皮下、腹部皮下)注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)+完全弗氏佐剂(CFA),其余各组经皮下多点(同DZ组)注射200μg猪甲状腺蛋白(pTg)+CFA进行初次免疫,4周后,DZ组经皮下多点注射PBS+不完全弗氏佐剂(IFA),其余各组经皮下多点注射200μg pTg+IFA进行加强免疫,第8周成模。成模后ZY组小鼠灌服益气化痰活血方(18.20g/kg/d),其余各组小鼠予等量蒸馏水,每日灌服1次,8周后处死小鼠,取材。应用HE染色技术检测CBA/J小鼠甲状腺淋巴细胞浸润情况;应用ELISA法测定小鼠血清TGAb水平情况;应用16S rDNA测序观察小鼠肠道菌群结构与组成情况。结果与DZ组相比,MX组小鼠甲状腺细胞淋巴浸润明显,TGAb显著升高(P<0.001);与MX组相比,ZY组小鼠甲状腺淋巴细胞浸润情况明显减轻,TGAb水平下降(P<0.001)。与DZ组相比,MX组小鼠肠道菌群结构及组成发生改变,软壁菌门水平显著降低(P<0.05),厚壁菌门、拟杆菌门比例升高(P>0.05),厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)比值升高(P>0.05);与MX组相比,ZY组小鼠肠内厚壁菌门水平显著降低(P<0.05),拟杆菌门比例升高(P>0.05),F/B比值下降(P>0.05),放线菌门比例升高(P>0.05)。结论益气化痰活血方可减轻AIT小鼠甲状腺淋巴细胞炎症浸润程度、降低TGAb水平,可能与改变肠道菌群的结构及组成有关。

基于高通量测序结果的益气化痰活血方干预CBA/J小鼠甲状腺免疫机制研究

目的探讨益气化痰活血方干预CBA/J小鼠甲状腺免疫机制。方法采用异源性甲状腺抗原免疫法注射CBA/J小鼠,建立ATT模型小鼠,随机分为模型组(MG)、益气化痰活血方低(YG-1)、中(YG-2)、高(YG-3)剂量组、亚硒酸钠组(SeG),每组10只。另设正常组(NG)。分别给予不同处理因素连续灌胃给药8周。8周后取材,Elisa检测小鼠血清TG-A6浓度;HE染色检测小鼠甲状腺淋巴浸润情况;PT-PCR检测各组小鼠甲状腺组织基因表达水平。结果与NG组相比,MG组小鼠间质可见淋巴细胞浸润,TG-Ab显著升高(P<0.05);与MG组相比,YG-2组小鼠甲状腺组织淋巴细胞浸润情况明显减轻,TG-Ab水平显著降低(P<0.05)。与NG组比较,MG组IL-21、IL-23R、JAK2、RoRα和IL-17mRNA表达上调(P<0.05);与MG组比较,YG-1组IL-21、IL-23R、JAK2、STAT3和IL-17mRA表达下调(P<0.05);YG-2组IL-1β、IL-21、IL-23R、RORYt和IL-17mRNA表达下调(P<0.05);YG-3组IL-1β、IL-21、IL-23R、RORα、RORYt和IL-17mRA表达下调(P<0.05)。结论益气化痰活血方可减轻ATT小鼠甲状腺淋巴细胞炎症浸润,降低TG-Ab水平,可能与下调IL-1β、IL-21、IL-23R、JAK2、STAT3、RoRYt、RoRα和IL-17mRNA基因表达有关。

益气化痰活血方对NOD.H-2^h4小鼠甲状腺Th17细胞分化影响的研究

目的探讨益气化痰活血方对NOD.H-2^(h4)小鼠甲状腺白细胞介素-23(IL-23)/白细胞介素-17(IL-17)炎症轴的影响。方法选雌性8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠,随机分成正常组、模型组、益气化痰活血方低剂量组(20.8 g/kg)和高剂量组(62.4 g/kg)。正常组饲以双蒸水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水,8周后制成自身免疫性甲状腺炎(AIT)动物模型,再处理因素8周后麻醉处死小鼠。放射免疫分析法(RIA)检测血清总T3(TT3)、总T4(TT4),固相化学发光酶免疫法(IRMA法)检测血清促甲状腺激素(TSII);光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化方法测定甲状腺间质细胞CD68及小鼠甲状腺IL-17、IL-23蛋白表达;RT-PCR法检测小鼠甲状腺IL-17、IL-23 mRNA表达;流式细胞仪分析小鼠脾细胞Th17细胞比例。结果各组间血清IT3、TT4及TSH值比较无明显差异(P>0.05);与正常组比较,模型组AIT的发生率、CD68、IL-17、IL-23表达及Th17细胞比例显著升高(P<0.01);与模型组比较,益气化痰活血方不同剂量组CD68、IL-17、IL-23表达显著下降(P<0.01),Th17细胞比例降低(P<0.01或P<0.05)。结论益气化痰活血方治疗AIT的机制可能与其抑制IL-23/IL-17炎症轴,下调Th17细胞比例有关。

益气化痰活血方对SCH大鼠海马记忆能力及ERK1/2-CREB信号通路的影响

目的:研究益气化痰活血方对亚临床甲状腺功能减退症(SCH)大鼠记忆影响并探讨可能机制。方法:Wistar大鼠采用'甲状腺全切+左旋甲状腺素(L-T4)皮注'建模,随机分假手术组、模型组、中药组(益气化痰活血方13.7g/kg)、西药组(L-T4 4.5μg/kg)、中西药组。给药6周后行水迷宫测试,后处死取标本检测,放射免疫(RIA)测血清总甲状腺素(TT4),免疫化学发光(ICMA)测血清促甲状腺激素(TSH),RT-PCR测海马ERK1/2、RSK、CREB mRNA表达。结果:模型组巡航时间及探索次数、海马ERK1/2、RSK、CREB mRNA积分光密度值,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组巡航时间减少、探索次数增加、ERK1/2、RSK、CREBmRNA积分光密度值显著增加(P<0.01,P<0.05),中西药组优于中药组及西药组(P<0.01,P<0.05)。结论:益气化痰活血方能改善SCH大鼠学习记忆能力,可能与上调海马ERK1/2-CREB通路有关。

基于心肺同治理论应用益气化痰活血方治疗慢性肺源性心脏病合并冠心病气虚痰瘀互结证的临床观察

目的:基于心肺同治理论观察益气化痰活血方治疗慢性肺源性心脏病(CPHD)合并冠心病(CHD)气虚痰瘀互结证的临床疗效。方法:将符合纳入标准的CPHD合并CHD患者60例随机分为治疗组30例和对照组30例,治疗组在西医综合治疗基础上给予益气化痰活血方,对照组30例给予单纯西医综合治疗,7d为1个疗程,2个疗程后比较两组综合临床疗效、中医证候积分及实验室检查相关指标。结果:治疗组中医综合临床疗效、中医证候积分、血气分析、血流变、肺功能及心功能相关指标改善均优于对照组(P<0.05)。结论:益气化痰活血方治疗CPHD合并CHD气虚痰瘀互结证疗效较好,作用肯定,值得临床推广。

益气化痰活血方治疗糖尿病胃轻瘫1例报告

糖尿病胃轻瘫是糖尿病常见的消化道慢性并发症，是继发于糖尿病的以胃自主神经功能紊乱而引起的胃动力低下为特点的临床症候群。临床表现为慢性胃炎、胃弛缓与胃潴留。

益气化痰活血方治疗甲功正常自身免疫甲状腺炎临床疗效观察

目的评价益气化痰活血方治疗甲功正常自身免疫甲状腺炎(AIT)的临床疗效。方法选取2016年10月-2019年12月就诊于我院门诊的甲功正常AIT患者80例,随机分为治疗组(40例)和对照组(40例);对照组予低碘饮食,生活方式干预;治疗组在对照组基础上予益气化痰活血方中药汤剂口服,疗程12周。分别于治疗前后评价患者甲状腺功能、甲状腺自身抗体水平以及中医症状积分。结果治疗前两组基线水平及疗效性指标均具有可比性,治疗后结果显示,治疗组甲状腺自身抗体水平、中医症状积分均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气化痰活血方在改善AIT患者临床症状,降低甲状腺自身抗体水平方面疗效显著。

益气补肾活血化痰方联合常规治疗对肾虚血瘀、痰浊阻滞型血管性痴呆认知功能障碍患者的临床疗效

目的探讨益气补肾活血化痰方联合常规治疗对肾虚血瘀、痰浊阻滞型血管性痴呆认知功能障碍患者的临床疗效。方法106例患者随机分为对照组和观察组,每组53例,对照组采用常规治疗(尼莫地平、吡拉西坦),观察组在对照组基础上加用益气补肾活血化痰方,疗程8周。检测临床疗效、BDNF、NGF、Hcy、Hs-CRP、SOD、CCL-2、HDS-R评分、MMSE评分、Barthel指数、中医证候评分变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组BDNF、NGF、SOD、HDS-R评分、MMSE评分、Barthel指数高于对照组(P<0.05),Hcy、Hs-CRP、CCL-2、中医证候评分更低(P<0.05)。结论益气补肾活血化痰方联合常规治疗可减轻肾虚血瘀、痰浊阻滞型血管性痴呆认知功能障碍患者炎症反应,调节氧化应激反应,促进神经功能修复,提高临床疗效。

补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对血清E2、T、Aβ、BNP的影响

目的研究补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对患者血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、Tβ-淀粉样蛋白(Aβ)、脑钠肽(BNP)的影响。方法选择医院2017年10月—2018年9月诊治的老年全身麻醉后认知障碍96例作为研究对象,遵照知情同意原则并按照随机数字表法分为两组,每组48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗基础上采用补肾益气活血化痰方治疗。比较两组患者的治疗效果,简易精神状态量表(MMSE)与蒙特利尔认知评估量表(MoCA),患者血清E2、T、Aβ、BNP水平以及不良反应发生情况。结果观察组总有效率显著高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后1周、2周MMSE、MoCA评分均有改善,治疗后1周两组间MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组MMSE、MoCA评分显著优于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP差异无统计学意义(P>0.05),治疗后1周、2周两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP均有改善,但治疗后1周两组间各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组的血清E2、T显著高于对照组,血清Aβ、BNP显著低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为12.5%(6/48),对照组为10.4%(5/48),组间无显著性差异(P>0.05)。结论补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍可获得满意的临床效果,能够降低患者的血清Aβ、BNP水平、升高血清E2、T水平,改善患者的认知功能,是有效安全的治疗方案。

化痰活血益气方对异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的:探讨化痰活血益气方的抗心肌肥厚作用及对心肌间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法:采用异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚模型(1 mg/kg,sc,连续10 d),48只大鼠随机分为6组:正常组、模型组、化痰活血益气方组(4.88 g/kg、9.77 g/kg、19.53 g/kg)和卡托普利组(0.02 g/kg)。14 d相应药物干预后,测定左心室重量指数(left ventricle mass index,LVMI)、全心重量指数(heart mass index,HMI),行HE染色测量心肌细胞表面积、行Masson染色测量胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF),免疫组化法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,实时荧光定量RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,Western blot检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组的LVMI、HMI、心肌细胞表面积、CVF以及Ⅰ、Ⅲ型胶原在形态学、mRNA、蛋白质层面的表达均明显升高;与模型组比较,化痰活血益气方组(4.88 g/kg、9.77 g/kg、19.53 g/kg)和卡托普利组的LVMI、HMI、心肌细胞表面积、CVF以及Ⅰ、Ⅲ型胶原在形态学、mRNA、蛋白质层面的表达均有不同程度的降低,化痰活血益气方9.77 g/kg组的上述各项指标始终存在显著性差异。结论:化痰活血益气方可以有效改善异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚并降低Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。

补气健脾法改善自身免疫甲状腺炎小鼠免疫失常机制研究

目的：观察益气化痰活血方对自身免疫甲状腺炎（AIT）小鼠甲状腺miR-155/SOCS1/STAT3信号通路的影响,探讨中医补气健脾法干预AIT部分免疫学机制。方法：60只8周龄NOD.H-2h4小鼠随机分为6组。正常组（NG）饲以蒸馏水,模型组（MG）、西药组（硒酵母片,Se G）、益气化痰活血方高剂量组（YG-1,36.40 g·Kg-1·d-1）、益气化痰活血方中剂量组（YG-2,18.20 g·Kg-1·d-1）、益气化痰活血方低剂量组（YG-3,9.10 g·Kg-1·d-1）饲以含0.05%碘化钠水8周成模,再灌胃给药8周。光镜下观察甲状腺细胞形态;RT-PCR法检测小鼠甲状腺miR-155、白细胞介素-17（IL-17）mRNA表达;Western blot法测定小鼠甲状腺细胞因子信号抑制因子（SOCS1）、p-STAT3蛋白表达。结果：（1）与NG组比较,MG组甲状腺淋巴细胞浸润明显;与MG组比较,各给药组甲状腺炎均有不同程度改善。（2）与NG组比较,甲状腺IL-17、miR-155mRNA表达显著上调（P〈0.01）,甲状腺p-STAT3蛋白显著升高（P〈0.01）;与MG组比较,Se G、YG-1、YG-2组甲状腺IL-17mRNA表达均显著下调（P〈0.01）;与Se G组比较,YG-2组IL-17mRNA下调更明显（P〈0.01）;与MG组比较,各给药组miR-155mRNA均显著下调（P〈0.01）,其中Se G、YG-2组无统计学差异（P〉0.05）;各给药组p-STAT3均显著下调（P〈0.01）,与Se G组比较,YG-2组下调更明显（P〈0.05）。（3）与NG组比较,MG组甲状腺SOCS1蛋白明显下降（P〈0.01）,与MG组比较,Se G、YG-2、YG-3组SOCS1蛋白水平显著升高（P〈0.01）,YG-1组SOCS1蛋白上调（P〈0.05）。结论：中医补气健脾法可能通过调控miR-155/SOCS1/STAT3信号通路改善AIT免疫失常。