益气化瘀化痰养阴剂对肝纤维化模型大鼠肝脏上皮间质表型的影响

目的探讨益气化瘀化痰养阴剂对肝纤维化大鼠肝脏上皮间质表型的影响。方法将30只SD大鼠随机分为益气化瘀化痰养阴剂组、肝纤维化模型组和正常对照组,益气化瘀化痰养阴剂组及肝纤维化模型组用CCl4和高脂低蛋白饮食建立肝纤维化大鼠模型,益气化瘀化痰养阴剂组每日用益气化瘀化痰养阴剂灌胃,肝纤维化模型组和正常对照组则用等体积生理盐水。12 w后,采用Masson染色及电镜观察大鼠肝脏纤维化程度。采用荧光定量PCR检测大鼠肝脏FSP1、TGF-β1、α-SMA及E-cad mRNA的表达,采用Western印迹法检测大鼠肝脏成纤维细胞特异蛋白(FSP1)、转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)及E-钙黏附蛋白(cad)蛋白的表达。结果与模型组相比,益气化瘀化痰养阴剂组肝组织Masson染色及电镜下均可见纤维化程度明显改善;益气化瘀化痰养阴剂组FSP1、TGF-β1、α-SMA mRNA及蛋白的表达较模型组明显降低(P<0.05),而E-cad mRNA及蛋白的表达较模型组明显升高(P<0.05)。结论益气化瘀化痰养阴剂对大鼠肝纤维化具有一定干预作用,该作用可能与其抑制肝组织上皮间质转化的发生有关。

益气化瘀化痰养阴剂对肝纤维化大鼠FSP1、PAR-2表达的影响

目的:观察益气化瘀化痰养阴剂对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠成纤维细胞特异性蛋白1(fibroblast-specific protein 1,FSP1)和蛋白酶激活受体-2(protease activated receptor,PAR-2)表达的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、益气化瘀化痰养阴剂低、中、高剂量组(分别简称为中药低、中、高剂量组)。正常对照组、模型组灌服生理盐水;秋水仙碱组灌服秋水仙碱0.1 mg/(kg·d);中药低、中、高剂量组分别灌服益气化瘀化痰养阴剂[相当于生药30、60、120 g/(kg·d)]。连续给药12周后,观察各组动物的肝组织病理学变化,并检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、透明质酸(hyaluronan,HA)及Ⅳ型胶原(collagenⅣ,CⅣ)含量,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝组织FSP1和PAR-2的基因和蛋白表达。结果:(1)模型组大鼠与正常组大鼠相比,前者肝组织纤维化程度明显,血清中ALT、AST、HA、CⅣ含量明显增高(P<0.05),肝组织中FSP1和PAR-2的mRNA和蛋白表达亦明显增高(P<0.05)。(2)各治疗组与模型组相比,前者肝组织炎性细胞浸润少,肝纤维化程度轻,血清中ALT、AST、HA、CⅣ含量仅轻度升高(P<0.05),肝组织中FSP1和PAR-2的mRNA和蛋白表达亦轻度升高(P<0.05)。结论:益气化瘀化痰养阴剂能保护肝脏,延缓大鼠肝组织纤维化进程,其机制可能与调控大鼠肝组织FSP1和PAR-2的基因和蛋白表达有关。