基于网络药理学的益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的免疫治疗效果及机制

目的基于网络药理学探讨益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(MG)大鼠免疫治疗的效果及机制。方法运用中医药分子机理生物信息学分析软件(BATMAN-TCM)筛选益气解毒复方相关靶点信息,利用在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以及Genecards数据库查询MG疾病有关靶点的信息;通过注释、可视化和综合发现数据库(DAVID)、Metascape数据库对益气解毒复方治疗MG的潜在靶点进行蛋白-蛋白互作网络(PPI)分析、基因本体(GO)功能富集及京都基因组百科全书(KEGG)相关信号通路分析;制备鼠源性乙酰胆碱受体(AChR)Rα97-116肽段抗原乳剂并皮下注射至30只无特定病原体(SPF)级雌性Lewis大鼠的尾基部、后肢垫部及背部(第1次免疫注射),分别于第30天和第45天时进行加强免疫(第2、3次免疫注射),第3次免疫注射结束后1周判断实验性自身免疫性MG(EAMG)大鼠模型是否成功,造模成功后EAMG大鼠随机均分为模型组、0.945 g/(kg·d)益气解毒复方(低剂量)组、1.890 g/(kg·d)益气解毒复方(中剂量)组、3.780 g/(kg·d)益气解毒复方(高剂量)组及5.400 mg/(kg·d)醋酸泼尼松片剂组,另取6只SPF级雌性Lewis大鼠作为正常组,各药物组大鼠分别予对应药物、正常组和模型组大鼠分别予等体积纯净水,连续灌胃干预30 d,采用电子天平和Lennon评分检测各组大鼠灌胃干预前和干预第30天时的体质量和肌力,同时采用酶联免疫吸附试剂盒检测各组大鼠血清AChR抗体(AChR-Ab)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用流式细胞术方法检测各组大鼠灌胃干预第30天时外周血中白细胞分化抗原4(CD4^(+))T细胞、白细胞分化抗原8(CD8^(+))T细胞的百分比及T淋巴细胞亚群CD4^(+)/CD8^(+)比率;灌胃干预30 d后处死各组大鼠,取骨骼肌组织,采用苏木精-伊红染色(HE)评估骨骼肌组织的形态学特征。结果筛选到益气解毒复方治疗疾病相关基因168个,PPI分析预测IL-6、TNF、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤蛋白(TP53)等可能是其治疗MG的重要靶点;GO功能富集结果表明,细胞组成(CC)、生物过程(BP)及分子功能(MF)涉及354个、4365个及61个条目,KEGG富集分析搜集到有关作用通路257条;灌胃干预第30天,与模型组相比,低、中、高益气解毒复方剂量组及醋酸泼尼松组大鼠体质量增加(P<0.01),Lennon评分降低(P<0.01),血清AChR-Ab、IL-1β、IL-6及TNF-α水平降低(P<0.05);EAMG大鼠血清中CD4^(+)T细胞分布及CD4^(+)/CD8^(+)比值减少(P<0.01),CD8^(+)T细胞分布增高(P<0.01),骨骼肌组织改善,肌纤维恢复,细胞核排列更规则,炎性细胞减少,其中益气解毒复方高剂量组效果较为明显。结论益气解毒复方可减轻EAMG大鼠炎症反应、减轻骨骼肌组织的损伤及促进免疫系统恢复,其机制与血清AChR-Ab水平降低及平衡CD4^(+)、CD8^(+)T细胞两者的比例有关。

益气中药复方对电离辐射小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的从若干个益气中药验方和古方中筛选出能够抗辐射的药味少、疗效好的中药复方。方法将110只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、人参汤组、芎归汤组、贞元饮组、当归补血汤组、四物汤组、经验方组、芪归升血片1组、芪归升血片2组、芪归升血片3组。除空白组外其余各组进行4.0Gy的X射线照射1次,次日空白组和模型组给予生理盐水灌胃,其余相应药物灌胃,每只0.2 ml/d,1次/d,连续7 d。第8天取小鼠外周血和脾脏,检测T淋巴细胞亚群和血清Il-2水平。结果四物汤、经验方、芪归升血片2、芪归升血片3能够提高电离辐射模型小鼠脾脏T淋巴CD+4/CD8+比例,同时能够提高电离辐射小鼠血清IL-2水平。结论四物汤、经验方、芪归升血片2、芪归升血片3可对辐射小鼠的T淋巴细胞亚群起到抗辐射的作用。

益气康复方结合西医常规疗法对乳腺癌术后早期康复的影响

目的观察益气康复方结合西医常规疗法对乳腺癌术后患者早期康复的临床疗效。方法将76例病例随机分为治疗组(38例)和对照组(38例),两组术后均予西医常规治疗措施,治疗组于术后第1天加服益气康复方。两组疗程均为10天,观察中医证候疗效、卡氏评分(KPS)疗效及伤口引流量、C反应蛋白(CRP)水平变化情况。结果治疗组中医证候及卡氏评分总有效率分别为89.5%、86.9%,对照组分别为76.3%、71.0%;治疗组中医证候疗效及卡氏评分疗效均优于对照组(P<0.05)。治疗组切口引流量少于对照组(P<0.05)。两组治疗后CRP水平均明显降低(P<0.05),组间治疗后差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气康复方能显著改善乳腺癌患者术后早期临床症状,降低手术应激反应,促进术后体力恢复和切口愈合。

益气强心中药复方对压力超负荷性心肌肥厚的干预作用

目的探讨益气强心中药复方对压力超负荷性心肌肥厚模型大鼠的干预作用。方法将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、卡托普利组、益气强心中药小剂量组与大剂量组。采用大鼠腹主动脉缩窄法复制压力超负荷性心肌肥厚模型,于术后第6周予药物干预,第8周测定心脏重量指数及血液生化指标,包括血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)、醛固酮(ALD)、心房钠尿肽(ANP)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果模型对照组与假手术组比较,心脏重量指数显著增加(P<0.01);AngⅡ、ALD、ET、ANP显著升高,而NOS、NO、SOD显著降低。卡托普利组、益气强心中药干预组分别与模型对照组比较,心脏重量指数显著降低(P<0.01);AngⅡ、ALD、ET、ANP显著降低,而NOS、NO、SOD显著升高。结论益气强心中药可明显抑制压力超负荷性心肌肥厚大鼠心肌肥厚的发展,可能通过肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)以及NO系统而发挥作用。

益气补肾复方联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床观察

目的:建立中西医联合治疗非小细胞肺癌患者的优化方案,达到更好的临床疗效,提高病人生活质量,尽量延长其生存周期。方法:按照单中心、随机、平行对照、单盲的方法,把符合纳入标准的患者分为试验组和对照组。试验组:西医常规化疗+协定方,服用益气补肾复方4个月,同时化疗4个疗程;对照组:同试验组相同的化疗方案,不服用中药,连续化疗4个疗程。并在预计时间评价RECIST标准评分、KPS评分来统计分析。结果:按照RECIST标准评价,两组在缩小瘤体疗效方面无统计学差异(P>0.05);按KPS评分评价,两组在KPS评分的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:从观察指标的总有效率来讲,中西医结合治疗IIIb-IV期NSCLC的总体疗效相对于单纯的西医化疗,具有一定优势,益气补肾法在治疗中晚期NSCLC中有减毒增效的功效。

益气解毒活络中药复方对糖尿病大鼠肾脏病理组织结构的影响

目的:探讨益气解毒通络中药复方(YQJDHL)对糖尿病(DM)大鼠肾脏结构的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠72只,注射链脲佐菌素造成糖尿病及痰浊瘀毒中医证候模型。应用YQJDHL分别在造模成功及成模后2周灌胃给药,观察大鼠肾脏病理组织学变化。结果:YQJDHL能够减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾小球肥大、系膜细胞增生等病理改变,中药预防组疗效优于中药治疗组。结论:YQJDHL能够预防和治疗大鼠早期DN,其机制可能与延缓肾脏病理组织损害有关。

益气止血中药复方对脾不统血证大鼠脑组织POMC mRNA表达的影响

目的,观察益气止血中药对脾不统血证模型大鼠前阿黑皮素(POMC)基因表达的影响。方法:以原位杂交结合图像分析的方法检测大脑皮层、海马、下丘脑前阿黑皮素信使核糖核酸(POMC mRNA)的积分光密度和面积。结果:脾不统血证模型大鼠脑组织POMC mRNA的积分光密度和面积均较正常显著增强,益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有下调作用。结论:益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有较好的调节作用,表现出单纯用药的协同作用,且其作用也略强于阳性对照药归脾丸。

益气康复方在乳腺癌患者围手术期中的应用效果分析

目的观察益气康复方对乳腺癌围术期患者的临床疗效。方法将100例乳腺癌患者随机分为治疗组(50例)和对照组(50例),两组术后均给予西医常规治疗,治疗组于术后第1天加服益气康复方。两组疗程均为10 d,观察中医证候变化、切口引流量、愈合时间、拔管时间以及术后并发症发生率。结果治疗组中医证候总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗组切口引流量少于对照组,拔管时间及愈合时间均短于对照组(P<0.05)。治疗组术后皮瓣坏死、皮下积液及上肢水肿发生率均低于对照组(P<0.05)。结论益气康复方能显著改善乳腺癌患者术后早期临床症状,提高患者免疫力,促进伤口愈合,降低并发症发生率。

健脾益气通络复方对早期糖尿病肾病大鼠血清脂联素与血清超敏C-反应蛋白影响的实验研究

目的通过观察健脾益气通络复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠血清脂联素(ADPN)与血清超敏C-反应蛋白(hsCRP)表达的影响,以探讨健脾益气通络复方防治早期糖尿病肾病的效果及其作用机制。方法将实验用大鼠分为正常对照组、模型空白组(高糖高脂饲料+STZ)、中药预防组、中药低剂量组、中药高剂量组及阳性西药对照组,采用高糖高脂饲料喂养结合一次尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的造模方法,复制出糖尿病肾病模型,各药物组干预4周后,将大鼠处死取血,用ELISA方法测试各组血清hs-CRP与血清ADPN的表达情况,最后进行组间比较。结果模型空白组大鼠的血清hs-CRP含量比正常组明显上升(P<0.01),其它各组经药物干预后,均可以显著降低其表达水平(P<0.01),但以中药预防组效果最佳;模型空白组大鼠的血清ADPN比正常组明显下降(P<0.01),其它各组经药物干预后,均可以显著升高其表达水平(P<0.01),以中药低剂量组效果最佳。结论 DN的发病机制可能与血清hs-CRP和血清ADPN的表达异常密切相关;健脾益气通络复方防治DN发生发展的药理机制可能是通过调节血清hs-CRP和血清ADPN的异常表达来实现。

益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠CXCL13、IL-21的影响

目的：研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠B细胞趋化因子（CXCL13）、白细胞介素-21（IL-21）在血清及胸腺表达水平的影响。方法：100只Lewis大鼠中随机选取10只为正常组,其余采用对Lewis大鼠皮下注射鼠源性AchR-a亚基97-116肽段方法建立重症肌无力的实验模型,经评估造模成功的49只大鼠随机分为益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组、模型组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法及免疫组化检测CXCL13、IL-21在EAMG大鼠血清及胸腺中的水平。结果：益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组血清及胸腺中CXCL13、IL-21水平明显降低,相比模型组有明显差异性（P〈0.01）,但益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组之间比较无明显差异性（P〉0.05）。结论：益气解毒复方能明显改善EAMG大鼠肌无力症状,可降低EAMG大鼠血清及胸腺中CXCL13、IL-21水平,这可能是该方治疗MG的作用机制之一。

益气解毒复方对EAMG大鼠胸腺IFNγ、IL17蛋白表达的干预作用研究

目的:从胸腺中γ干扰素(IFNγ)、白介素17(IL17)蛋白表达变化探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠发病的免疫机制并观察益气解毒复方干预作用,为益气解毒复方治疗MG提供理论及实验依据。方法:从100只Lewis大鼠中随机选取10只为正常组,其余采用对Lewis大鼠皮下注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段建立EAMG大鼠模型,经评估造模成功的大鼠随机分为益气解毒高、中、低剂量组、泼尼松组、模型组,连续灌胃给药30 d。采用免疫组化法检测各组大鼠胸腺中IFNγ、IL17蛋白表达。结果:(1)皮下注射R97-116复制EAMG大鼠模型的方法有效,总造模成功率54.4%。(2)与正常组比较,模型组大鼠胸腺细胞IFNγ、IL17蛋白阳性表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组、益气解毒复方各剂量组EAMG大鼠胸腺细胞中IFNγ、IL17蛋白阳性表达显著下降(P<0.01)。结论:益气解毒复方可能通过纠正胸腺慢性炎症反应,恢复机体异常免疫功能而发挥治疗重症肌无力的作用。

益气解毒复方对重症肌无力患者中医证候影响及Th17/Treg细胞免疫调节作用

目的观察益气解毒复方对重症肌无力患者中医证候影响及外周血Th17/Treg细胞免疫调节作用。方法随机将63例重症肌无力患者分为对照组(n=31)和治疗组(n=32),对照组给予溴吡斯的明和糖皮质激素等基础治疗,治疗组在对照组给药基础上加用益气解毒复方干预,连续治疗12周。观察临床疗效,统计分析治疗前后两组患者中医证候积分,检测治疗前后两组患者外周血中Th17/Treg细胞、Foxp3/RORγt基因和IL-6、IL-17细胞因子表达水平。结果治疗12周后,与对照组相比,治疗组可显著降低患者的中医证候积分(P<0.05),能促进外周血中Foxp3、Treg基因的表达(P<0.05),降低外周血中Th17、Treg细胞和IL-6、IL-17细胞因子的表达(P<0.05)。结论益气解毒复方可能通过影响外周血Th17、Treg细胞分化及转录因子RORγt、Foxp3基因的表达水平和相关细胞因子的表达,进而调节Th17/Treg细胞免疫平衡,达到治疗重症肌无力的作用。

益气解毒中药复方对急性电离辐射小鼠骨髓损伤的防护作用

目的研究益气解毒中药复方对急性电离辐射小鼠骨髓损伤的防护作用。方法将40只雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、小檗胺组、中药复方组。正常组和模型组灌胃去离子水,小檗胺组和中药复方组灌胃相应药物,灌胃14 d后,除正常组外,予其他3组给予3.5 Gy 60Coγ射线全身照射。照射后第4天检测指标,包括外周血细胞计数、骨髓病理切片、骨髓的CD34+细胞百分比、骨髓细胞周期、骨髓细胞凋亡以及血清TNF-α含量。结果中药复方能明显升高外周血白细胞数、红细胞数及血红蛋白浓度,保护骨髓细胞,降低脂肪化程度,降低外周血中TNF-α的含量,但对骨髓CD34+细胞百分比、骨髓细胞周期及骨髓细胞总凋亡率作用不明显。结论益气解毒复方对急性电离辐射小鼠骨髓损伤具有一定的防护作用。

益气解毒复方对Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者的临床疗效及免疫调节作用

目的观察益气解毒复方对Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者的临床疗效及血清Tfr、Tfh、IL-21、AChRAb的影响。方法收集Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者共60例,按随机数字表分为益气解毒复方组(常规西药+益气解毒复方)和对照组(常规西药),每组各30例,治疗12周,观察治疗前后QMG评分变化,评估临床疗效,采用流式细胞术、ELISA法检测并观察治疗前后血清Tfr、Tfh细胞比例及IL-21、AchR-Ab水平变化,观察治疗期间不良反应情况。结果治疗12周后,两组患者QMG评分均有下降(P<0.01),但益气解毒复方组在降低QMG评分上较对照组更明显(P<0.01),在愈显率及有效率方面也较对照组更明显(P<0.05);两组MG患者血清Tfh细胞比例及IL-21和AchR-Ab水平均明显降低(P<0.01),Tfr细胞比例及Tfr/Tfh比值均明显升高(P<0.01),但与对照组相比,益气解毒复方组在降低Tfh细胞比例、AchR-Ab水平及升高Tfr细胞比例上更明显(P<0.05),在升高Tfr/Tfh比值,降低IL-21水平上也更明显(P<0.01)。结论在常规西医治疗的基础上联合益气解毒复方治疗MG近期疗效显著,可协同增效,安全性好,其机制可能与升高血清Tfr细胞比例、降低血清Tfh细胞比例,上调Tfr/Tfh比值及减少IL-21,降低AchR-Ab水平有关。

益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠胸腺中Aire及ROR-γt/Foxp3相关炎症因子表达的影响

目的研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠胸腺中自身免疫调节因子(Aire)及转录因子维甲酸相关核孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)相关炎症因子表达的影响。方法通过免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,分为正常组、模型组、阳性对照组(强的松)及益气解毒复方高、中、低剂量组,每组10只。观察大鼠行为学及Lennon评分,检测血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot检测EAMG大鼠胸腺组织中Aire和Foxp3的表达,RT-PCR检测各组大鼠胸腺组织中RORγt的表达情况。结果与治疗前相比,各药物组Lennon分级评分显著降低;与强的松组相比,益气解毒复方各剂量组Lennon评分无明显差异(P>0.05)。RT-PCR结果,模型组胸腺内RORγt mRNA相对表达量明显高于正常组(P<0.05),各药物组胸腺中RORγt mRNA相对表达量明显低于模型组(P<0.05)。Western blot结果,与正常组比较,模型组Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠胸腺中Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著升高(P<0.01)。ELISA结果,模型组大鼠血清IL-6含量明显高于正常组(P<0.01),而TGF-β1含量明显低于正常组(P<0.01);给药后,各药物组IL-6含量明显降低,TGF-β1含量明显升高(P<0.01)。结论益气解毒复方能改善EAMG大鼠肌无力症状,其作用机制可能通过上调Aire蛋白表达,调节免疫炎症反应,影响Th17/Treg分化,从而调控ROR-γt/Foxp3免疫平衡发挥调节自身免疫反应的作用,可能是其治疗MG的作用机制之一。

补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质及血清生化指标的影响

试验旨在研究补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质及血清生化指标的影响。选取18只体细胞数相近(大于100万个/mL)的哺乳期圭山山羊,随机分为2组,每组3个重复,每个重复3只羊。对照组为精料补充料,试验组在精料补充料中添加3%的补中益气汤加减复方中药制剂。试验期8 d。结果显示,试验组山羊鲜乳体细胞数极显著低于对照组(P<0.01)。试验组的乳脂率极显著高于对照组(P<0.01);乳蛋白率显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,圭山山羊日粮中添加3%补中益气汤复方加减中药制剂可有效改善乳品质,预防隐性乳房炎的发生。

益气补血中药复方对原发性卵巢功能不全小鼠卵巢TGF-β超家族信号通路的影响

目的:探究益气补血中药复方对原发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢TGF-β超家族信号通路的影响。方法:取30只SPF级雌性BABL/c小鼠采用腹腔注射VCD溶液建立POI小鼠模型,并随机分为模型组及益气补血中药复方低、高剂量组,另取10只不予任何处理作为正常对照组。益气补血中药复方低、高剂量组分别按1.0、2.0 g/kg灌胃益气补血中药复方,正常对照组和模型组按10 mL/kg灌胃蒸馏水,造模结束后采集小鼠阴道脱落细胞,光镜下观察小鼠动情周期进行模型评价。给药结束后当天,观察动情周期变化;检测小鼠血清E;、LH、FSH、AMH水平;比较小鼠体质量、卵巢质量和子宫质量;观察小鼠卵巢组织病理学变化;检测小鼠颗粒细胞凋亡情况;Western blotting检测TGF-β超家族通路蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的动情周期紊乱率和血清LH、FSH水平及卵巢颗粒细胞凋亡率显著升高,血清E;、AMH水平及子宫质量、卵巢质量和卵巢组织中TGF-β、GDF-9、BMP15蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,益气补血中药复方低、高剂量组小鼠的动情周期紊乱率及血清LH、FSH水平和卵巢颗粒细胞凋亡率显著降低,血清E;、AMH水平及子宫质量、卵巢质量和卵巢组织中TGF-β、GDF-9、BMP15蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:益气补血中药复方能改善POI小鼠动情周期和血清激素水平,降低卵巢颗粒细胞凋亡率,其可能通过TGF-β超家族信号通路发挥对POI小鼠的治疗作用。

益气化瘀解毒复方联合超低频电磁场处理水对内毒素诱发大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨益气化瘀解毒复方联合超低频电磁场处理水(简称频谱水)对内毒素诱发大鼠急性肺损伤的影响及可能作用机制。方法 104只SD大鼠随机分为13组,每组8只。预防实验:预防频谱水组、预防频高组、预防频低组、预防普通水组、预防普高组、预防普低组分别给予相应水溶液2 ml灌胃,每日1次。14天后,除预防对照组外各组以5 mg/kg内毒素腹腔注射制备急性肺损伤模型。治疗实验:除对照组外,其余各组造模同预防实验,造模后频高组、普高组分别给予高剂量中药频谱水和普通水2 ml灌胃1次,血必净组予血必净注射液4.5 ml/kg腹腔注射1次。两个实验均进行大鼠肺大体病理、病理组织学光镜观察,并检测血清白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果预防实验中,与预防对照组比较,预防模型组IL-8、TNF-α水平升高(P<0.05);与预防模型组比较,预防普低组、预防普高组、预防频谱水组、预防频低组、预防频高组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05);与预防频低组比较,预防频高组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05)。治疗实验中,与对照组比较,模型组IL-8、TNF-α水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,频高组、普高组、血必净组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05);与频高组比较,普高组IL-8、TNF-α水平均升高(P<0.05)。结论益气化瘀解毒复方对内毒素致急性肺损伤具有一定的防治作用,可能与降低大鼠血清中IL-8、TNF-α水平有关,并且高剂量效果好;频谱水与中药复方合用有增强抗炎、抗肺损伤作用的趋势。

益气解毒复方含药血清对胸腺增生型重症肌无力mTEC和Treg细胞增殖的影响

目的:探讨益气解毒复方含药血清对胸腺增生型重症肌无力(MG)患者胸腺髓质上皮细胞(mTEC)和调节性T细胞(Treg)增殖的影响。方法:采用血清药理学方法,将35只SD大鼠适应性喂养1周后随机分为益气解毒复方低、中、高剂量组,空白组,强的松组,每组7只。大鼠连续灌胃1周,制备上述各组含药血清。利用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法观察不同浓度益气解毒复方含药血清对mTEC和Treg细胞增殖的作用,并通过共同培养方式观察mTEC及益气解毒复方含药血清对Treg细胞增殖的作用。结果:胸腺细胞经培育,使用mTEC特征性标记荆豆凝集素Ⅰ(UEAI)做流式检测阳性率均值为92.54%。采用磁珠分选Treg细胞,多次磁珠分选后的Treg细胞纯度高达92%,mTEC和Treg细胞均呈较高阳性率表达,细胞为mTEC和Treg细胞,细胞纯度符合后续实验的要求。益气解毒复方含药血清体积分数2.5%~15%时,对mTEC和Treg细胞均有抑制作用,益气解毒复方含药血清浓度≥20%时对细胞的增殖有促进作用,且随作用的时间延长,含药血清对细胞的增殖的促进作用越为明显。培养48 h后的结果显示,与空白组比较,强的松组和益气解毒复方低剂量组差异无统计学意义,中、高剂量组细胞增殖抑制率显著降低(P<0.01)。与mTEC共同培养的Treg细胞,与空白组比较,强的松组、益气解毒复方低剂量组Treg细胞增殖抑制率差异无统计学意义,中、高剂量组细胞增殖抑制率显著降低(P<0.01)。结论:益气解毒复方含药血清能够影响胸腺增生型MG患者mTEC和Treg细胞的增殖,独立培养MG患者的Treg细胞相比,与mTEC共同培养的MG患者Treg细胞增殖具有促进作用,提示mTEC能够调控Treg细胞的增殖,且这种作用在予以益气解毒复方含药血清干预之后更为明显,说明益气解毒复方对Treg细胞的干预,可以通过对mTEC的治疗作用产生,这可能是益气解毒复方治疗MG的作用机制之一。

AGEs-RAGE信号通路在糖尿病肾病中的作用机制及中医药研究进展

糖尿病肾病是临床常见的糖尿病并发症,是导致终末期肾脏病的主要原因之一,也是糖尿病患者致死的重要因素之一。晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)-糖基化终末产物受体(receptor of AGEs,RAGE)信号通路是糖尿病肾病发生发展的重要一环,在糖尿病肾病中的作用机制主要有激活核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB),刺激产生血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF),刺激转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的产生,诱导单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)表达的增强,激活P21肾素-血管紧张素导致细胞功能紊乱,激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶引起氧化应激等。中医药治疗糖尿病肾病具有整体调节和多通道、多靶点的优势,可通过阻断AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病进展。目前研究存在的问题主要有:AGEs-RAGE下游机制复杂,未完全阐明,其与一些关键因子如NF-κB、VGEF、TGF-β1、MCP-1基因的关系还有待进一步研究证实;单味中药和中药复方的活性成分治疗糖尿病肾病的临床研究和动物实验较多,但针对AGEs-RAGE信号通路的研究较少;目前实验大多于体外进行,其机制和作用靶点尚未明确。今后的研究中,需进一步完善实验设计,深入了解AGEs-RAGE信号通路的作用机制,以期为糖尿病肾病的中西医结合治疗提供一定参考。