益气清热膏对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用

目的 :探讨益气清热膏对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用。方法 :术后第 2周对正常大鼠及阿霉素肾病大鼠分别灌服生理盐水、益气清热膏及福辛普利钠 (蒙诺 ) ,治疗前及治疗后Ⅳ 6周分别测定 2 4h尿蛋白定量、血清白蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血肌酐及尿素氮结果 ;治疗后第 6周取肾组织 ,用自动图像分析系统测定了各组系膜细胞的定量指数、肾小球系膜基质指数 ,对肾组织标本进行了Ⅳ型胶原、层黏连蛋白及纤维连接蛋白白的免疫组织化学染色。结果 :益气清热膏可明显降低阿霉素肾病大鼠尿蛋白排出量、提高血清白蛋白、抑制系膜细胞增殖及降低系膜基质成分的合成 ,其作用与福辛普利钠组相似。结论 :益气清热膏对阿霉素肾病大鼠的肾脏具有一定的保护作用。

益气清热膏通过内质网应激途径保护氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型足细胞损伤的机制研究

目的:研究益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型(PAN)蛋白尿水平、足细胞损伤的作用,并从调节内质网应激途径的主要分子伴侣:糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)和GRP94的表达探讨益气清热膏的作用机制。方法:24只雄性Wistar大鼠按随机数字表分为假手术组、PAN模型组、益气清热膏组、蒙诺组,每组各6只。除假手术组予等量生理盐水外,其余各组均采用颈静脉插管注射嘌呤霉素氨基核苷(PA)(40 mg/kg)法制备PAN肾病大鼠模型。分别于造模前(0天)、造模后第9天和第14天检测大鼠24 h尿蛋白定量,第15天处死各组大鼠,取肾组织行电镜检查;Western Blot和实时定量逆转录多聚酶链反应(real time-PCR)法检测大鼠肾组织中GRP78和GRP94表达。结果:(1)与假手术组比较,益气清热膏可以降低造模后第9天和第14天大鼠24 h尿蛋白定量(P<0.01)。(2)超微病理:模型组出现广泛足突融合、消失,足突基底部肿胀,足细胞内线粒体肿胀,内皮窗孔凌乱。益气清热膏可以明显改善大鼠足细胞损伤。(3)real-time PCR法和Western blot检测肾皮质GRP78和GRP94的表达。模型组GRP78和GRP94的mRNA水平和蛋白水平显著升高,益气清热膏可以显著降低两者mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:益气清热膏可显著降低PAN模型大鼠尿蛋白水平,修复足细胞损伤,其机制可能与益气清热膏降低肾组织GRP78和GRP94表达,从而抑制内质网应激,修复肾组织蛋白质合成有关,具体机制需要进一步研究证实。

益气清热膏通过肌动蛋白骨架重排保护嘌呤霉素氨基核苷大鼠足细胞损伤机制

目的:观察益气清热膏对嘌呤霉素氨基核苷大鼠模型(PAN)的作用机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组和环孢素组。通过单次静脉注射PAN(40mg/kg体质量)建立PAN损伤模型。测定血清生化指标和24h尿蛋白定量。观察肾脏病理改变和超微结构变化,RT-PCR及Western Blot检测细胞骨架调控蛋白(α-actinin-4、Synaptopodin、Desmin和uPAR)mRNA和蛋白的定量表达。结果:与模型组比较,益气清热膏可降低PAN大鼠24h尿蛋白定量、改善肾功能(P<0.05);还可减轻肾小球病理损伤,减少足突宽度,改善足突融合,恢复部分足突正常结构;下调肾组织中α-actinin-4、Synaptopodin、Desmin和uPAR的mRNA表达和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:益气清热膏能显著改善足细胞损伤,减轻PAN导致的肌动蛋白细胞骨架重组,其作用机制可能与下调肌动蛋白细胞骨架相关调控蛋白表达有关。

益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素肾病综合征大鼠模型肾组织Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的:探讨益气清热膏对氨基嘌呤霉素肾病综合征模型Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的影响。方法:采用RT-PCR法及Western Blot法检测PAN模型造模后第3、10、15天大鼠肾组织中wnt4、wnt5a、β-catenin、GSK-3β、FEN的基因和蛋白表达情况。结果:造模后第15天,与模型组比较,益气清热膏可以抑制PAN大鼠模型wnt4、β-catenin、GSK-3β和FEN蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),并且随着治疗时间延长,益气清热膏作用靶点逐渐增多。结论:益气清热膏可以降低PAN大鼠模型肾组织wnt4、β-catenin、GSK-3β、FEN的基因和蛋白表达,这可能是其降低蛋白尿、修复足细胞损伤的作用机制之一。

益气清热膏联合厄贝沙坦治疗慢性肾炎临床观察

目的探讨益气清热膏联合厄贝沙坦治疗慢性肾炎的临床疗效。方法选择慢性肾炎患者80例,随机分成两组。对照组仅用厄贝沙坦单独治疗,治疗组使用益气清热膏联合厄贝沙坦进行治疗。12周后观察疗效。结果治疗者总有效率明显优于对照组(P<0.01),尿蛋白水平下降也更明显(P<0.01)。结论使用益气清热膏联合厄贝沙坦来治疗慢性肾炎具有良好的疗效,能够有效降低患者尿蛋白水平,达到治愈慢性肾炎或者延缓肾功能不全进展的目的,并不影响肝功能,没有不良反应发生。

基于LC/MS技术的益气清热膏冻干粉及含药血清成分鉴定

目的:采用LC/MS技术对益气清热膏冻干粉及含药血清的化学成分进行鉴定,探寻其起效的物质基础。方法:通过超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS)技术对益气清热膏冻干粉及其含药血清进行主要成分鉴定,采用Xcalibur、Metworks和Mass Frontier 7.0软件进行数据采集和分析,利用成分裂解数据库对质谱峰进行指认,最终确定鉴定成分,并结合文献检索,确定化合物的药理活性。结果:益气清热膏冻干粉中共鉴定出24个化学成分,其中黄酮类14个(升麻素苷、黄芩苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、木犀草苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、木犀草素、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷-O-乙基、芒柄花苷、5-O-甲基维斯阿米醇、毛蕊异黄酮、汉黄芩素、芒柄花素、芒柄花素-7-O葡萄糖苷-O-乙基)、苯丙素类2个(连翘酯苷A、连翘酯苷B)、有机酸类3个(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸)、内酯类3个(白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ)和甾体类2个(麦角甾苷、薯蓣皂苷),其中有10个成分在血清中可检测到。其中来源于金银花的主要成分6个、黄芪6个、防风3个、连翘3个、白术3个、茯苓1个、白花蛇舌草1个及穿山龙1个。结论:基于LC/MS的方法成功鉴定了益气清热膏主要有效成分和入血成分,为揭示益气清热膏疗效的物质基础及作用机制奠定了基础。