鸽源芽孢杆菌的分离鉴定及益生性能评价

研究旨在对来源于健康白羽王鸽肠道中7株芽孢杆菌进行分离鉴定并对其益生功能和安全性进行评价。通过菌落形态,染色特性、生化试验和16S rRNA进行鉴定,对其生长曲线、耐高温能力、耐酸碱能力、耐胆盐能力、产酶能力以及在人工模拟胃肠液环境下的存活率进行益生性能筛选,对其抗生素耐药性、菌株溶血性和小鼠安全试验进行安全性评价。结果共得到7株芽孢杆菌,筛选出3株耐受性、产酶能力和安全性较好的菌株,它们在pH 5~8液体培养基中生长良好;在65℃10 min存活率均在30%以上;在0.07%的胆盐环境下培养24 h后存活率均在84%以上;在模拟胃肠液中培养3 h后的存活率均在42%以上;均可产蛋白酶、α-淀粉酶和纤维素酶;对林可霉素不敏感;均不会产生溶血素;灌胃后的小鼠精神正常,脏器无病理性变化。由此可见,从健康家鸽肠道中筛选得到的3株芽孢杆菌具有良好的益生特性,可作为鸽用微生态制剂的备选菌株。

益生性酵母的分离鉴定与安全性评价

试验旨在筛选益生性酵母菌,为后续酵母菌作为饲料添加剂提供依据。试验从兰州醪糟和甜胚子中分离筛选酵母菌,并对其进行益生特性和安全性评价。结果表明,从兰州醪糟和甜胚子中获得到库德里阿兹威氏毕赤酵母2株、葡萄牙棒孢酵母1株、酿酒酵母1株、马克斯克鲁维酵母1株。其中,菌株JM-4发酵完成时间短,环境适应性强,生命力旺盛,可以在肠液胃液中生存,具有良好的生长特性和益生特性。同时,该菌株在小鼠体内无明显的毒性作用,安全性良好。研究表明,5种试验酵母菌株对小鼠具有良好的安全性,适合用于益生菌制剂的制备,为酵母菌作为饲料添加剂提供了参考。

黏豆包发酵液中乳酸菌分离鉴定及其益生性能

从农家自然发酵黏豆包谷物发酵液中分离乳酸菌,对菌株进行鉴定,并对益生性能进行研究。利用梯度稀释法从黏豆包中筛选获得6株乳酸菌,经形态学分析并结合16S rRNA序列分析分别为棒状乳杆菌(Lactobacillus coryniformis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、短杆菌(Levilactobacillus brevis)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentans)、清酒乳杆菌(Latilactobacillus sakei)和曲氏乳杆菌(Lactobacillus curvatus)。对菌株的益生性能评价结果表明:菌株HSDF3(曲氏乳杆菌)的抗逆性和耐酸性能较好,pH3.0的环境中存活率为100%;耐盐测试中,菌株HSDF9(清酒乳杆菌)的耐盐效果最好,在盐含量10%的MRS肉汤中仍可存活,活菌数可达8.93×106 CFU/mL;耐胆盐测试中,菌株HSDF12(棒状乳杆菌)存活率最高,在0.3%胆盐浓度的MRS肉汤培养基中培养3 h之后的存活率为7.171%;耐人工胃液测试中,经过3 h的模拟胃液培养之后,菌株HSDF3(曲氏乳杆菌)的存活率最高,达到82.91%;耐人工肠液测试中,经过6 h的模拟肠液培养之后,HSDF12(棒状乳杆菌)存活率最高,达到93.42%;抗生素敏感性试验中,菌株HSDF15(短杆菌)对四环素、羧苄西林、头孢氨苄、米诺环素、头孢唑啉、氨苄西林、头孢拉定等抗生素均敏感。

泡椒老卤水中乳酸菌筛选及益生性能分析

为给强化发酵生产泡椒提供性能优异的候选菌株,该研究以四川农家自制泡椒老卤水为原料,以总酸含量、耐辣椒素、耐盐能力和发酵特性为指标筛选具有改善泡椒品质的乳酸菌,并对筛选到的菌株进行了耐受人工胃肠液、自聚性、抗生素敏感性和抗氧化活性的益生性能分析。结果表明,菌株1Y-17、1Y-35和6Y-15的耐辣椒素、耐盐能力、发酵泡椒的总酸含量均高于商用菌株和自然发酵组,3株菌经16S rDNA聚类分析为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。在人工胃肠液中3株菌的活菌数均大于4×10^(6)CFU/mL,对6种抗生素均无耐药性,菌株6Y-15对DPPH自由基和羟自由基清除率最高,而菌株1Y-17对ABST阳离子自由基清除率最高。综上所述,筛选得到的3株乳酸菌具有良好的发酵性能和一定益生性能,可作为强化发酵候选菌株应用于泡椒工业生产。

降低α-乳白蛋白致敏性乳酸菌的安全性及益生性评价

通过体外模拟胃肠液试验、HT-29细胞黏附性试验及胆盐水解酶试验,分别测定了L.plantarum HM-22、L.plantarum AKS-WS 10、L.casein BD0383三株乳酸菌的益生性;通过溶血性试验、抗生素敏感性试验以及产生物胺试验判断其安全性。结果表明,L.plantarum HM-22在模拟胃液和肠液中的最高存活率分别为88.28%和89.05%;L.plantarum AKS-WS 10对HT-29细胞的黏附指数最高,为21.90。3株菌株均具有良好的产胆盐水解酶活性,不产生溶血环,不具有溶血性,对7种抗生素敏感,且均不产生生物胺,说明3株乳酸菌均具有安全性及益生性,具有较好应用潜力。

黄水多糖的分离纯化、结构表征及益生性研究

制备黄水多糖并进行表征结构及益生性研究,采用醇沉法、DEAE-52、Sephadex G-200柱层析法,从黄水中分离纯化得到主要组分HSP-3;利用高效液相色谱法、傅里叶红外光谱法、紫外扫描、X射线衍射、扫描电镜对其结构进行鉴定,并进行益生性研究。结果表明,HSP-3由甘露糖、核糖、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖组成,在3469 cm^(-1)、1639 cm^(-1)、1146 cm^(-1)、641 cm^(-1)处有较强吸收峰,在28°、34°、45°、58°、64°、75°、83°处有晶体结构存在,扫描电镜结果显示HSP-3以网状结构相互缠绕、有大量光滑片状结构存在;以葡萄糖为参照,HSP-3具有促进乳酸菌生长功能。综上所述,HSP-3是由黄水提取的天然均一杂多糖,为其在保健食品、日化品开发提供了依据。

传统发酵牦牛酸乳中益生性乳酸菌的体外筛选

为获得具有潜在益生特性的乳酸菌,实验以抗人工胃液、胆盐中生长效率和细胞表面疏水性为筛选指标,对羊八井地区传统发酵牦牛酸乳中分离出的38株乳酸菌进行体外筛选。最终通过测定结果综合比较得出菌株编号为YBJ-3、YBJ-11、YBJ-15、YBJ-17、YBJ-30和YBJ-33乳酸菌的益生特性较好,其中4株乳酸菌抗人工胃液能力大于90%,在胆盐中良好生长。通过16S r DNA序列分析鉴定,菌株编号YBJ-3为屎肠球菌(Enterococcus faecium)、YBJ-11为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、YBJ-15为耐久肠球菌(Enterococcus durans)、YBJ-17为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、YBJ-30为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、YBJ-33为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。

内蒙古奶豆腐中潜在益生性乳酸菌的筛选

对从内蒙古奶豆腐中分离的16株乳酸菌进行16S rDNA分子鉴定,其中9株鉴定为乳酸片球菌、5株为屎肠球菌、1株为植物乳杆菌、1株为鼠李糖乳杆菌。进一步对分离得到的菌株进行模拟人工胃液和胆盐耐受性、疏水性、体外降胆固醇和抗氧化特性研究。结果表明:植物乳杆菌M1-2和鼠李糖乳杆菌M6-1对模拟人工胃液有较高的耐受性;屎肠球菌M7-1、M8-1和M8-2具有较高的胆盐耐受性;植物乳杆菌M1-2和鼠李糖乳杆菌M6-1对甲苯和十六烷的疏水性显著高于其他菌株。体外功能性实验结果表明,屎肠球菌M1-1、植物乳杆菌M1-2、乳酸片球菌M1-3和M2-1的体外降胆固醇能力较高,胆固醇降解率均超过30%;鼠李糖乳杆菌M6-1对过氧化氢的耐受性、羟自由基(?OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的清除能力最高。综上所述,植物乳杆菌M1-2和鼠李糖乳杆菌M6-1具有较好的益生特性,可作为今后开发功能性产品的潜在益生菌株。

多粘芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价

为了探讨多粘芽孢杆菌的抗逆性与益生特性,通过5个试验评定多粘芽孢杆菌的抗热、抗酸、耐胆盐、抑菌性能和粘附性。85℃水浴对多粘芽孢杆菌分别处理2.5,5.0,7.5 min模拟制粒条件;利用pH分别为2、3、4的人工胃液模拟胃液环境;0.3%胆盐模拟肠液环境;抑菌试验测定多粘芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力;以蛋鸡肠道上皮细胞为模型测定多粘芽孢杆菌的粘附能力。结果表明:多粘芽孢杆菌高温处理7.5min活菌数较对照组减少1.17%(P>0.05)。在耐酸性试验中,pH3的试验组较对照组活菌数降低0.37%(P>0.05)。在耐胆盐试验中,试验组活菌数较对照组降低了0.74%(P>0.05)。多粘芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0,17.46 mm。粘附性试验结果显示,在每100个蛋鸡肠道黏膜上皮细胞上可以粘附30个多粘芽孢杆菌。因此,制粒温度、人工胃液、人工肠液不影响多粘芽孢杆菌活菌数;多粘芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有显著的抑制能力,基本不能在蛋鸡消化道内定植。

魔芋葡甘低聚糖毒理学及肠道益生性评价

目的:研究以半干法酶解制备的魔芋葡甘低聚糖(konjac oligosaccharides,KOS)的毒理学特性和肠道益生性。方法:以小鼠急性毒性实验,小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验对KOS急性毒性和遗传毒性进行研究、评价;通过小鼠盲肠内容物体外厌氧发酵评价KOS的肠道益生性。结果:KOS对雌、雄小鼠急性经口半致死量(LD50)均大于21 500 mg/kg,属无毒级;小鼠骨髓细胞微核实验及小鼠精子畸形实验均呈阴性;体外厌氧发酵实验表明KOS可被肠道菌群有效利用,明显增加肠道益生菌(双歧杆菌、乳酸菌)和短链脂肪酸的数量,而对大肠杆菌的增殖效果不明显。结论:KOS的安全性高,是一种功能显著的肠道益生元。

产β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选及其益生性研究

分析比较了实验室保存的13株乳酸菌β-半乳糖苷酶的活性,并对β-半乳糖苷酶活性较高的菌株进行耐受性、疏水性及凝乳效果的测定。结果表明,德氏乳杆菌保加利亚亚种ML12-2-2和嗜热链球菌KC4的β-半乳糖苷酶活性较高,对酸和胆盐耐受性较好,对碳氢化合物也表现出很好的疏水性,同时对脱脂乳具有较好的凝乳性能。这两株菌种具有作为益生菌用于乳品发酵的潜力。

魔芋葡甘聚糖及其衍生物肠道益生性的体外发酵评价

目的:评价魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)及其衍生物脱乙酰基魔芋葡甘聚糖(D-KGM)、魔芋葡甘露低聚糖(konjac oligosaccharide,KOS)的肠道益生性。方法:分别以1 g/100 m L的KGM、KOS和D-KGM为碳源,通过小鼠盲肠内容物体外厌氧发酵,测定发酵液的pH值、微生物和短链脂肪酸,评价肠道益生效果。结果:与阳性对照组(以葡萄糖作为碳源)相比,KGM和KOS发酵液pH值明显降低,短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)和乳酸菌、双歧杆菌的数量显著增加,肠道潜在致病菌(大肠杆菌、梭状杆菌、拟杆菌)的增殖不明显,而D-KGM发酵液中pH值、肠道微生物、SCFAs与阴性对照组(不含碳源)均无显著性差异。结论:KOS和KGM具有显著的肠道益生性,而D-KGM没有肠道益生性。

益生性乳酸菌黏附性研究进展

综述了益生性乳酸菌的功能作用,及乳酸菌在人体肠道中的黏附、定居、抑菌等与人体肠道黏膜组成的主要化学成分的相关性。详述了近些年来有关乳酸菌之所以能在人体内定居的黏附性的研究,如黏附素、黏附受体、影响黏附素的影响因子等,以期有助于高黏附益生性乳酸菌株的选育及其益生菌制剂制备。

枯草芽孢杆菌HY4体外益生性能的研究

试验对枯草芽孢杆菌HY4进行菌种筛选和体外益生性能研究。结果表明:枯草芽孢杆菌HY4经菌种筛选后,在相同培养时间内(24 h)芽孢形成率由原来的12%提高到92%,活菌数(30 h)也由3.6亿个/mL提高到28.3亿个/mL。体外益生性能研究表明:枯草芽孢杆菌HY4具有较强的耐热性能,在85℃水浴中作用7.5 min后,存活率为95.45%;与益生性枯草芽孢杆菌X1和X2相比,在pH为2时枯草芽孢杆菌HY4表现最好,存活率显著高于益生性枯草芽孢杆菌X1和X2(P<0.05)。在0.3%禽胆盐中枯草芽孢杆菌HY4的存活率显著高于益生性枯草芽孢杆菌X1和X2(P<0.05),枯草芽孢杆菌HY4表现出良好的胃肠道耐受性能,具有作为发酵菌种和微生态制剂开发的潜力。

饲用地衣芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价

为了探讨地衣芽孢杆菌的抗逆性与益生性,研究通过5个试验评定地衣芽孢杆菌的耐高温、耐酸性、耐胆盐、抑菌性和黏附性,于85℃水浴分别处理地衣芽孢杆菌2.5 min、5 min、7.5 min模拟制粒条件;利用pH值分别为2,3,4的人工胃液模拟胃液环境;用0.3%的胆盐模拟肠液环境;抑菌试验测定地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力;以蛋鸡肠道上皮细胞为模型测定地衣芽孢杆菌的黏附能力。结果表明:85℃处理地衣芽孢杆菌2.5 min后活菌数最高,与对照组相比提高了2.25%(P>0.05);用pH值为2,3,4的胃液分别处理,与对照组相比活菌数分别提高0.77%(P>0.05)、1.54%(P>0.05)、1.34%(P>0.05);地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0和16.16 mm;在黏附性试验中,每100个蛋鸡肠道黏膜上皮细胞上平均可以黏附27个地衣芽孢杆菌。说明制粒过程、人工胃液、人工肠液不影响地衣芽孢杆菌的活菌数,地衣芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,使金黄色葡萄球菌基本不能在蛋鸡消化道内定植。

2株地衣芽孢杆菌抗逆性及益生性的研究

对2株地衣芽孢杆菌(Bacillus clicheniformis)C10和C46进行耐酸性及耐胆盐等抗逆性试验,进而进行抑菌测定、产酸和产酶等益生性试验,对13种抗生素进行药敏性测定。结果表明,2株地衣芽孢杆菌C10和C46在pH2.0、3.0和4.0的人工胃液中处理2和6h,存活率均为94%,0.03%～0.3%胆盐溶液里存活率均超过91%,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌K88和鸡白痢沙门菌均有明显的抑制作用,有机酸总量分别达到1230.99和298.69mg/L,蛋白酶活力分别为256和291IU/mL,对10种抗生素有耐药性,对3种抗生素有药敏性。说明2株地衣芽孢杆菌具有很强的抗消化道生境及较好的益生功能。

藏猪源解淀粉芽孢杆菌的益生性、安全性和应用性研究

探讨1株来自藏猪粪便中具有一定体外益生潜力的解淀粉芽孢杆菌SWUN-TP23在动物体内的益生性、安全性及添加到饲料中的应用性。结果表明,按108CFU/m L饲喂小鼠对其生长性能影响最大,可促进小鼠胸腺和脾脏发育,日均增质量较对照组提高1倍左右,在肉眼和光学显微镜下观察小鼠心、肝、脾、肺、肾等内脏均未发现明显的病理变化;将解淀粉芽孢杆菌SWUN-TP23添加到发酵饲料中,可降解一定量的黄曲霉毒素B1。试验表明,该菌株能提高小鼠生长性能,增强小鼠的免疫力,安全无毒,且添加到发酵饲料中还能在一定程度上降低饲料中黄曲霉毒素B1的含量,具有一定的应用价值。

益生性唾液乳酸杆菌的筛选及其抑菌物质的初步探究

目的:在从健康人群口腔中筛选出具有益生潜能的唾液乳酸杆菌,对益生菌用于口腔疾病的防治进行初步探究。方法:取身体健康且无口腔疾病的志愿者非刺激性唾液并进行选择性培养,筛选得到乳酸杆菌,经革兰染色鉴定及16srDNA测序分析得到唾液乳酸杆菌,将菌株纯化培养后取其无菌的发酵液上清以变形链球菌为指示菌进行抑菌实验,进而筛选出具有显著抑菌效果的目标菌株,并对该菌株发酵液中的抑菌物质进行初步分析。结果:成功筛选出目标菌株唾液乳酸杆菌w22a,其抑菌物质的抑菌作用随着浓度的增大而增强,且对热稳定、对过氧化氢酶及多种广谱蛋白酶敏感并能抑制多种口腔常见的致病菌。结论:w22a是一株有口腔益生潜能的唾液乳酸杆菌,具有一定的研究价值及应用前景。

一株强抑菌活性植物乳杆菌的分离及益生性能研究

以健康黔北黑猪肠道黏膜内容物为原料,采用厌氧罐培养法分离出肠道细菌,结合抑菌试验筛选出其中具有强抑菌活性菌种进行分子生物学鉴定,并对其耐受性及抑菌物质的稳定性进行研究。结果表明,该菌株被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),对金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028等指示菌具有强抑制作用,其发酵上清液对3种指示菌的最大抑菌圈直径分别约为44.7 mm、23.1 mm和31.8 mm;菌株发酵上清液抑菌物质耐高温,120℃处理30 min抑菌活性无显著变化(P>0.05);胰蛋白酶处理后,上清液的抑菌圈直径显著减小(P<0.05),而过氧化氢酶和胃蛋白酶处理后抑菌圈直径无显著变化(P>0.05),表明主要抑菌物质为有机酸和活性肽;菌株经pH 2、0.3%猪胆盐或人工胃肠液处理6 h后存活率分别为0.06%、0.61%、40.80%和25.65%,显示出良好的益生性能。

益生性乳酸菌对抗生素敏感性的研究进展

为便于在生产中有效的利用益生菌类添加剂,研究益生菌能否全部或部分替代抗生素以及二者能否混合使用便具有了重要的现实意义,文章综述了益生性乳酸菌在饲料中的应用现状及其对抗生素敏感性的研究进展,并就开展益生性乳酸菌对抗生素敏感性研究的必然性进行了阐述。