补肾益精法调控AhR通路治疗硬皮病的机制:基于网络药理学及分子对接

目的通过网络药理学方法、分子对接方法分析芳香烃受体(AhR)信号通路在补肾益精法治疗硬皮病中的作用及其机制。方法通过TCMSP等数据库及LC-MS分析结果获取补肾益精法中药复方的有效活性成分及其靶点基因、AhR信号通路基因和硬皮病疾病基因,构建补肾益精法活性成分-AhR信号通路-硬皮病交集靶点网络图;使用STRING数据库构建蛋白互作网络;进行GO、KEGG富集分析;最后通过分子对接验证有效活性成分与AhR结合能力。结果阿魏酸、槲皮素、山奈酚、异阿魏酸、木犀草素在补肾益精法靶向AhR信号通路治疗硬皮病中发挥关键作用;其机制可能与调控参与硬皮病发病机制的IL-6、CTNNB1、HSP90AA1、TNF、PTGS2等AhR信号通路分子有关;分子对接显示阿魏酸、山奈酚、槲皮素、异阿魏酸、木犀草素等活性成分与AhR结合能均低于-6.0 kcal/mol,具有较好结合活性。结论补肾益精法治疗硬皮病的机制可能与阿魏酸、槲皮素、山奈酚、异阿魏酸、木犀草素等多种关键活性成分,靶向AhR信号通路,调控IL-6、CTNNB1、HSP90AA1、TNF、PTGS2等核心靶点相关。

补肾益精法治疗免疫性血小板减少症的现代机制探讨

基于文献分析阐释“肾精”与免疫性血小板减少症(ITP)发病的关联,探究补肾益精法在ITP现代病理机制中的作用与物质基础。补肾益精法是上海市名中医姚乃中教授临证治疗ITP的重要方法,从肾出发遣方用药可有效改善ITP患者的临床症状与生活质量,提升血小板计数并减少出血表现。ITP发病的现代医学机制复杂,包括巨核细胞成熟障碍导致的血小板生成不足、细胞/体液免疫异常导致的血小板破坏增加以及出凝血平衡异常等;而补肾益精类药物具有促进巨核细胞成熟与分化、调控细胞/体液免疫、维持出凝血稳态等作用。补肾益精法治疗ITP的疗效机制可能与促进血小板生成、减少血小板破坏以及维持出凝血稳态等有关;中医学中“肾精”的概念可能涵盖了现代医学的骨髓造血干细胞、免疫细胞、凝血因子等。深入探究补肾益精法的现代机制内涵,将有助于提高ITP临床遣方用药的精确性与实效性。

补肾益精法对硬皮病成纤维细胞表型的影响及其表观遗传学意义

目的:研究补肾益精法对硬皮病成纤维细胞表型的影响。方法:体外培养建立硬皮病成纤维细胞系,制作补肾益精法含药血清干预硬皮病成纤维细胞,使用实时定量RT-PCR技术,检测胶原表达相关因子及甲基化相关基因的表达情况,比较补肾益精法与5-氮杂-2-脱氧胞苷对硬皮病成纤维细胞的作用。结果:补肾益精法可抑制硬皮病成纤维细胞Ⅰ型胶原α_2(Col1α_2)、转化生长因子β(TGF-β)基因的表达,与5-氮杂-2-脱氧胞苷均可提高胶原抑制因子F1i1与Smad7的表达,补肾益精法可减少DNA甲基转移酶1的表达。结论:补肾益精法可改善硬皮病成纤维细胞促纤维化的表型,其过程可能有表观遗传调控机制参与。

姚乃中运用温肾益精法治疗慢性特发性血小板减少性紫癜经验

介绍姚乃中教授运用温肾益精法治疗慢性特发性血小板减少性紫癜经验。认为慢性特发性血小板减少性紫癜反复出血仅是表象,主要病机是肾精亏虚、肾阳不足为本,瘀血停滞为标,属本虚标实证,病位在肾;治疗当从肾着手,强调温补肾阳、益精填髓,辅以活血消瘀止血。

补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化的影响

目的:研究补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化表型的影响。方法:使用博来霉素诱导建立硬皮病小鼠模型,分别采用补肾益精法中药复方(中药复方组)、生理盐水(模型组)处理硬皮病模型小鼠,共3周,并设正常对照组。HE染色观察皮肤病理改变;使用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定各组小鼠I型胶原α2(COLⅠα2)基因表达情况。结果:成功建立硬皮病小鼠模型,皮肤病理HE染色显示,中药复方组小鼠皮肤纤维化有不同程度改善。模型组小鼠COLⅠα2基因表达较正常对照组高(P<0.01);经补肾益精法处理后,中药复方组小鼠COLⅠα2基因表达减少,与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补肾益精法中药复方可改善硬皮病模型小鼠皮肤纤维化程度。

补肾益精法对硬皮病成纤维细胞SMAD3/FLI1平衡的影响

目的:初步研究补肾益精法中药复方对硬皮病成纤维细胞SMAD3/FLI1"平衡"的影响。方法:体外培养建立硬皮病组和正常对照组皮肤成纤维细胞系;使用补肾益精法中药复方含药血清与对照血清处理两组细胞;采用实时定量RT-PCR技术测定I型前胶原COLⅠ-α2与TGF-β途径中SMAD3、FLI1等因子的基因转录水平。结果:补肾益精法可不同程度地减少硬皮病成纤维细胞COLⅠ-α2、SMAD3表达,上调FLI1基因表达,使SMAD3/FLI1比值趋向健康对照组水平。结论:补肾益精法对硬皮病成纤维细胞表型的影响可能与TGF-β途径中SMAD3/FLI1"平衡"有关。

补肾益精法治疗骨质疏松症117例

骨质疏松症是老年人的一种常见病,其发病机理与内分泌功能有密切关系。根据中医“肾主骨”的理论和目前对肾职能的研究结果,作者采用补肾益精法治疗骨质疏松症117例,效果良好,现将临床观察结果报告如下。资料和方法(一)117例中,男45例,女72例。年龄60～76岁,平均67岁。患者通过检查均排除因甲状旁腺机能亢进、多发性骨髓瘤等引起的继发性骨质疏松。(二)骨质疏松症的诊断标准采用 Bar-nett 的腰椎指数测量法。取第三腰椎为测量椎体,腰椎指数=(AB/CD)×100,其中 AB

补肾益精法治疗骨质疏松症84例

目的 :观察补肾壮骨类中药治疗骨质疏松症的疗效 ,采用补肾壮骨丸 (巴戟天、仙灵脾、紫河车、刺五加、丹参、黄芪等 )治疗骨质疏松 84例 ,并设对照组。结果 :治疗组较对照组的肾虚症候积分均值 ,腰痛积分均值均有明显下降 ( P<0 .0 1 ) ,前臂骨矿含量 ,骨密度值均明显升高 ( P<0 .0 5 )。提示

补肾益精法治疗更年期妇女骨质疏松的临床观察

目的:观察补肾益精中药治疗更年期妇女骨质疏松的临床疗效。方法:将120例骨质疏松的更年期妇女随机分为治疗组和对照组,分别给予补肾益精中药和阿仑膦酸钠治疗,然后比较两组患者治疗后临床疗效,观察治疗前后腰椎正侧位骨密度、雌二醇水平、血碱性磷酸酶、血钙、骨钙素水平及肾虚证症状积分。结果:治疗6个月后,两组患者治疗后疗效比较无显著性差异,治疗前后组内比较肾虚证状积分、腰椎正位骨密度、雌二醇水平、血碱性磷酸酶、骨钙素水平有显著性差异(P<0.05),治疗后组间比较肾虚证状积分、雌二醇水平有显著性差异(P<0.05),表明补肾益精中药临床疗效优于阿仑膦酸钠。结论:补肾益精中药能够防治更年期妇女的骨质丢失,对治疗更年期骨质疏松有较好的疗效。

补肾益精法防治原发性骨质疏松症的疗效机制和推广应用

骨质疏松症及其引起的骨折患病率高,危害性大,严重威胁着中老年人的健康与生命。该项目组1986年率先提出＂补肾益精法治疗骨质疏松症＂,历经28年的不断努力,形成了多项科技创新：1.完成了原发性骨质疏松症（POP）高危人群6447例临床流行病学调查,证明肾阳虚和肾阴虚为POP主证（83%）,

补肾益精法经外泌体途径对系统性硬皮病的血管保护作用研究

【目的】观察经补肾益精法处理后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)来源的外泌体对系统性硬皮病血管损伤的治疗作用。【方法】(1)体外研究:制备大鼠补肾益精中药复方含药血清,通过血管内皮细胞成管实验观察含药血清与对照血清对HUVEC成管的影响,细胞免疫荧光染色法检测血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)表达。采用超速离心法提取HUVEC细胞上清液中外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Nano Analyzer法检测外泌体径粒与浓度,Western Blot法检测外泌体标志物的表达。设置对照血清干预HUVEC来源的外泌体组(对照血清-外泌体组)和含药血清干预HUVEC来源的外泌体组(含药血清-外泌体组),用外泌体处理HUVEC后,通过成管实验观察HUVEC成管能力,细胞免疫荧光染色法检测CD31表达。(2)体内研究:设置正常组、模型组及外泌体组。采用皮下注射博来霉素(100μL·mg^(-1)·d^(-1))28 d构建硬皮病小鼠模型。此外,模型组及外泌体组小鼠在造模第1、7天分别额外给予外泌体悬液及含药血清-外泌体局部皮下注射。4周后,观察小鼠皮肤组织病理变化,免疫组织化学法检测小鼠皮肤组织血管生成素1(ANG-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管性假血友病因子(vWF)、CD31表达水平。【结果】与对照组比较,含药血清组与含药血清-外泌体组的HUVEC成管能力及CD31表达均显著增强。电镜下可见类圆形高亮膜性微囊泡,外泌体的标志物表达增强。HE染色结果显示,与模型组比较,外泌体组小鼠皮肤胶原纤维含量有所减少,胶原间隙增宽,血管数量增多;免疫组织化学结果显示外泌体组小鼠皮肤ANG-1、VEGF、v WF、CD31表达水平显著高于模型组,较正常组有所降低。【结论】补肾益精法可通过HUVEC来源的外泌体途径发挥对系统性硬皮病的血管保护作用。

滋肾降火益精法治疗精液常规异常症

由精液常规异常所致之男性不育,是临床常见病。笔者近年来依中医肾病理论自拟定“滋肾降火益精法”,用以治疗精液常规异常症,其疗效尚属满意,现将此法介绍如下。 1 治疗方法 1.1 方药组成 山茱萸 怀山药 枸杞子 熟地 茯苓菟丝子 覆盆子 淫羊藿 黄柏 甘草 此为自拟之方,其药用量可随证因人而异。

补肾益精法联合生物反馈调控肠神经递质改善老年性STC的临床研究

观察补肾益精法联合生物反馈疗法对老年性STC脾肾阳虚证患者肠神经递质NO、NPY、结肠传输的影响。方法:选取60例老年性脾肾阳虚型STC患者随机分成对照组30例和试验组30例。试验组口服济川煎加味辅以生物反馈治疗,对照组口服枸橼酸莫沙必利分散片。观察两组患者治疗前后血清 NO、NPY 值临床证候积分、肛管直肠测压以及结肠传输试验钡剂排空率。结果:补肾益精法联合生物反馈疗法可以降低慢传输型便秘( 脾肾阳虚型) 患者临床症状积分、清血清中NPY,增强肛管最大收缩压,改善72h钡剂排出率并能一定程度改善患者的临床症状。结论:补肾益精法联合生物反馈疗法对老年性STC脾肾阳虚证治疗效果显著,在一定程度上改善患者排便困难等症状,副作用小,临床推广有良好利民效益。

基于Fli1调节的补肾益精法对硬皮病小鼠EndMT的影响

目的研究补肾益精法中药复方通过干预Fli1表达调控TGF-β信号,抑制系统性硬皮病血管内皮细胞内皮间质转化(endothelial to mesenchymal transition,End MT)的机制。方法采用博来霉素构建硬皮病小鼠模型,分为正常组、模型组、黄芪甲苷组、中药复方组、Fli1 siRNA+中药复方组,其中正常组不予造模。分别采用HE、Masson染色检测小鼠皮肤血管与胶原,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组小鼠皮肤组织Fli1、VE-cadherin和FSP-1 mRNA表达水平;采用蛋白印迹法(Western Blot)检测各组小鼠皮肤组织Fli1、VE-cadherin、FSP-1蛋白表达水平。结果成功建立硬皮病小鼠模型,HE染色与Masson染色结果显示:中药复方组显著降低小鼠皮肤厚度(P<0.01),胶原纤维减少,血管增多,提示中药复方能改善小鼠皮肤纤维化程度及保护血管; QPCR结果显示:补肾益精中药复方能提高Fli1 mRNA、VE-cadherin mRNA表达,降低FSP-1 mRNA表达。Western Blot结果显示:补肾益精中药复方能提高Fli1、VE-cadherin蛋白表达,降低FSP-1蛋白表达。结论补肾益精法中药复方通过上调Fli1表达,抑制血管内皮间质转化。

陈欣运用补肾益精法治疗育龄期月经过少肾虚证经验

月经过少是妇科常见疾病,初发症状不明显而不易被重视,久之则会导致闭经甚至不孕。陈欣教授根据"肾为先天之本""经水出诸肾""精血同源"等基础理论,采用补肾益精法治疗育龄期月经过少肾虚证,应用毓麟珠加味以恢复肾-天癸-冲任-胞宫轴生理功能,并以月经周期序贯调经,随症加减,临床疗效显著。

中医补肾益精法联合西医疗法治疗少弱畸精子综合征的临床疗效观察

目的观察中医补肾益精法联合西医疗法治疗少弱畸精子综合征的临床疗效。方法选取2013年12月至2014年12月郑州市中医院收治的少弱畸精子综合征患者160例为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和试验组,各80例。对照组患者给予促卵泡生成激素联合人绒毛膜促性腺激素治疗,其中尿卵泡刺激素75 U,每周3次;人绒毛膜促性腺激素4000 U,每周1次。试验组患者在此基础上口服增精丸6 g,每日3次。3个月为1个疗程,共1个疗程。观察比较两组患者血性激素及男性精子情况。结果试验组患者治疗后精子密度、活率与（a＋b）级精子百分率显著高于对照组[（49±12）×10~9/L比（42±11）×10~9/L,（48±12）%比（43±12）%,（64±12）%比（56±13）%],畸形率显著低于对照组[（22±4）%比（26±6）%],差异有统计学意义（P〈0.05）。试验组患者治疗后血卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮水平显著高于对照组[（14.8±1.9）U/L比（12.6±1.7）U/L,（48.6±12.1）U/L比（6.9±1.4）U/L,（21±3）U/L比（19±3）U/L],差异有统计学意义（P〈0.05）。试验组患者治疗后绿色荧光精子百分率显著高于对照组[（69±12）%比（62±13）%],红色荧光精子百分率显著低于对照组[（16±5）%比（22±7）%],差异有统计学意义（P〈0.05）。结论中医补肾益精法联合西医疗法可以有效治疗少弱畸精子综合征患者,具有较为显著的临床疗效。

补肾益精法治疗远端肾小管酸中毒致低钾血症31例

目的观察补肾益精法治疗远端肾小管酸中毒(distal renal tubular acidosis,dRTA)致低钾血症的疗效。方法将62例dRTA患者随机分为观察组31例和对照组31例,对照组仅给予常规西医补钾治疗,观察组加用补肾益精中药进行综合治疗。比较两组的临床疗效及血清钾浓度的变化。结果两组临床疗效的分布比较,差异具有统计学意义(P<0.05),观察组临床疗效显著优于对照组;随着治疗时间延长,两组血钾浓度均较前一时点显著升高(P<0.05);治疗48h和72h后,观察组血钾浓度显著高于对照组(P<0.05)。结论补肾益精法联合西医补钾治疗能提高dRTA致低钾血症患者血钾水平,提高临床疗效。

基于肾精与干细胞的关系阐释补肾益精法在视网膜变性治疗中的作用机理

干细胞作为一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,在视网膜变性治疗领域展现出广阔的前景。中医学肾精与干细胞在繁衍生殖、生长发育、生髓化血、濡养脏腑等生理功能及先天与后天来源等方面存在诸多相似性,尤其是先天之精与干细胞之间可能存在着理论同一性的关系。视网膜变性的中医病机归结于肾虚精亏,目窍失养,治宜补肾益精为法。间充质干细胞属于干细胞的一类,补肾益精法对骨髓来源间充质干细胞的迁移、归巢、分化及旁分泌有明显的促进作用。本文以此为切入点,探讨补肾益精法在视网膜变性治疗中的潜在机理,为今后开展相关研究提供新的思路及理论依据。