益肺解毒颗粒防治新型冠状病毒感染的作用机制研究

本文研究益肺解毒颗粒防治新型冠状病毒感染的作用机制。通过TCMSP数据库收集益肺解毒颗粒中11味药材所含化学成分及对应靶点,利用数据库OMIM和GeenCards查找“novel coronavirus”的相关靶点,通过R语言进行GO功能和KEGG通路富集分析,利用Cytoscape3.7.2软件构建“药材-成分-疾病-靶点”网络图,采用计算机软件AutoDock4.2.1进行分子对接分析。拓扑学分析表明,益肺解毒颗粒防治新型冠状病毒感染的活性成分主要有柚皮素、β-谷甾醇、汉黄芩素和木犀草素等10个,关键靶点有RELA、MAPK3和IL6等12个,通过KEGG分析及文献报道,筛选出IL-17、PI3K-Akt和NF-kB等相关通路20条;分子对接结果表明,益肺解毒颗粒主要药效成分与SARS-CoV-23CL水解酶具有良好的结合能力。益肺解毒颗粒可能通过调控多条信号通路,并与SARS-CoV-23CL水解酶结合,从而发挥防治新型冠状病毒感染的作用。

基于网络药理学和动物实验探讨益肺解毒颗粒对急性肺损伤小鼠炎症反应及免疫功能的影响

目的:通过网络药理学和动物实验探讨益肺解毒颗粒对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)小鼠的影响及保护作用。方法:利用Swiss Target Prediction等平台,对药物的靶点进行筛选;利用Gene Cards数据库以“acute lung injury”为关键词整理疾病靶点;利用STRING平台进行蛋白互作分析,Cytoscape 3.7.2可视化交集靶点网络图并对核心靶点筛选;微生信平台进行KEGG通路富集和GO分析,Cytoscape 3.7.2构建成分-靶点-通路网络图。将30只C57小鼠随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量组,模型及给药组采用LPS气管内滴注的方法建立ALI模型。记录小鼠体重变化;测定胸腺与脾脏指数;测定血清和肺泡灌洗液(BALF)中白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;HE染色法观察肺组织病理变化。结果:筛选后获得药物靶点277个,成分与疾病的交集靶点146个,关键靶点有CASP3、EGFR、ESR1等,GO功能结果共1766个,KEGG富集结果有178条通路,PI3K-Akt信号通路为关键通路。相较空白组,模型组的胸腺与脾脏指数显著下降(均P<0.05);血清与BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著增加(均P<0.05);肺组织明显出现炎性细胞浸润和出血。与模型组相比,给药组的胸腺指数显著增加(均P<0.05);高剂量组血清和BALF中炎症因子含量显著降低(均P<0.05)。结论:益肺解毒颗粒能改善因LPS所致的ALI小鼠肺组织病理损伤,其机制可能与增强免疫功能和抑制炎症因子分泌有关。

基于UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS的益肺解毒颗粒化学成分分析

目的 建立一种快速鉴定益肺解毒颗粒的化学成分的高分辨质谱分析方法。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)对益肺解毒颗粒的成分进行快速鉴别,色谱柱为Thermo Accucore aQ C18色谱柱(2.1 mm×150 mm, 2.6μm),流动相为甲醇(A)-体积分数0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~3 min, 1%A;3~7 min, 1%~2%A;7~35 min, 2%~95%A;35~37 min, 95%~2%A;37~39 min, 1%A),柱温35℃,进样量3μL,流速0.3 mL·min-1。采用加热电喷雾离子源(HESI),在正、负离子同时扫描模式下采集益肺解毒颗粒的质谱数据,扫描范围m/z 100~1 500,碰撞能量30 eV。利用Xcalibur 4.1软件并结合对照品和文献信息,对益肺解毒颗粒的化学成分进行鉴定。结果 共鉴定出186个化学成分,包括三萜皂苷类38个、黄酮类34个、苯乙醇苷类17个、酚酸类14个、萜类16个、木脂素类11个、色原酮类11个、香豆素类10个、酚酸甘油酯类9个、挥发油类3个、核苷类3个、糖类2个、酚类2个、氨基酸类1个、其他类15个。其中10个化合物通过对照品比对进行了确证。结论 该方法可对益肺解毒颗粒中化学成分进行快速、准确地鉴定和分析,为其质量评价、药效物质及作用机制等研究奠定了基础。