基于网络药理学和分子对接探究健脾益肾方治疗糖尿病肾病的作用机制

目的 采用网络药理学方法和分子对接技术探讨健脾益肾方治疗糖尿病肾病(DN)的分子机制。方法 检索TCMSP获取健脾益肾方组方药物的活性成分及靶点;检索GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD、DisGeNET数据库获取DN相关靶点,利用Venny2.1获取药物与疾病靶点的交集靶点;利用Bisogenet构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,并提取交集网络获得健脾益肾方治疗DN的关键靶点;利用Metascape数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,利用Cytoscape3.9.1软件构建“活性成分-靶点-信号通路”网络,挖掘健脾益肾方治疗DN的主要活性成分与核心靶点。运用AutoDock Vina进行分子对接。结果 获得健脾益肾方组方药物活性成分197个,对应靶点363个,DN相关靶点1 347个。健脾益肾方治疗DN的核心靶点包括TUBB、HNRNPK、NCL、PABPC1、DHX9等。GO功能富集结果显示,生物过程主要涉及对激素的反应、细胞迁移的正调控等;细胞组分主要影响膜筏、囊泡腔、内质网腔、细胞外基质等;分子功能包括蛋白激酶结合、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合转录因子结合、信号受体激活剂活性等多种蛋白、酶、脂结合。KEGG通路富集分析获得211条通路,主要涉及癌症通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、癌症中的蛋白聚糖、活性氧化物通路和HIF-1信号通路等。结论 健脾益肾方可通过TUBB、HNRNPK、NCL、PABPC1、DHX9等多靶点,作用于癌症通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE等信号通路,发挥抗炎、抗氧化,调节代谢紊乱,调控细胞凋亡及自噬作用。

通络益肾方对UUO大鼠肾间质纤维化及piezo1的影响

目的探讨通络益肾方对单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾脏纤维化及压电式机械敏感离子通道组件1(piezo-type mechanosensitive ion channel component 1,piezo1)的影响。方法以UUO大鼠为模型,以通络益肾方为干预手段,以缬沙坦为阳性药,连续给药14天。观察大鼠血肌酐和尿素氮变化。采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,观察大鼠肾脏病理形态学变化。采用Ⅲ型胶原免疫组化评估大鼠肾间质纤维化程度。采用CD34免疫荧光观察大鼠肾脏肾小管周毛细血管(peritubular capillary,PTC)变化。采用免疫组化、免疫蛋白印记法和转录PCR观察大鼠肾脏piezo1及其下游分子mRNA以及蛋白表达改变。结果与假手术组相比,模型组血清肌酐和尿素氮水平升高(P<0.05),与模型组相比,缬沙坦组和通络益肾方组血清肌酐(P<0.05)和尿素氮(P>0.05)较低。与假手术组相比,模型组镜下观察肾间质纤维化改变明显,PTC明显减少,piezo1表达增加,经通络益肾方和缬沙坦干预后UUO大鼠肾脏间质纤维化程度改善,PTC增多,piezo1表达减少。与假手术组相比,模型组piezo1蛋白表达显著增加(P<0.05),通络益肾方和缬沙坦干预均能降低piezo1蛋白表达(P<0.05);与假手术组相比,模型组大鼠肾组织胎盘生长因子(placental growth factor,PlGF)表达增多(P<0.05);与模型组相比,缬沙坦组和通络益肾方组PlGF表达增多(P<0.05);模型组PlGF的受体血管内皮生长因子受体1(FMS-like tyrosine kinase 1,flt1)表达较假手术组减少(P<0.05),缬沙坦组与通络益肾方组与模型组相比flt1表达水平的升高。结论通络益肾方能明显改善UUO大鼠肾间质纤维化进展,其机制可能是通过下调piezo1蛋白表达,上调ADM、PlGF及其受体flt1表达,减轻PTC损伤,起到拮抗肾间质纤维化的作用。

舒肝益肾方联合内分泌疗法对激素依赖型乳腺癌患者的作用效果

目的观察舒肝益肾方与内分泌疗法联用治疗激素依赖型乳腺癌(HDBC)的效果。方法选择2020年1月至2023年1月医院收治的70例HDBC患者,根据随机数字表法分为西药组、联合组,各35例。西药组接受内分泌疗法,联合组在西药组基础上联用舒肝益肾方。比较两组治疗前与治疗后3个月中医证候积分、免疫能力(T抑制淋巴细胞、T辅助淋巴细胞及T辅助淋巴细胞/T抑制淋巴细胞)、凝血指标[纤维蛋白原(Fib)与活化部分凝血活酶时间(APTT)]及肿瘤标志物[糖类抗原(CA)153与CA125]、生活质量。结果治疗后,联合组中医证候积分、T抑制淋巴细胞水平均较西药组降低,T辅助淋巴细胞及T辅助淋巴细胞/T抑制淋巴细胞水平高于西药组(P<0.05)。治疗后,两组Fib及APTT水平均增加,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,联合组CA153及CA125水平均低于西药组(P<0.05)。治疗后,联合组生活质量评分高于西药组(P<0.05)。结论舒肝益肾方与内分泌疗法联用治疗HDBC能提高患者免疫力,改善肿瘤标志物及生活质量。

FOLFOX6化疗方案联合补气益肾方对结直肠癌患者免疫功能及肿瘤标志物的影响

目的:探讨FOLFOX6化疗方案联合补气益肾方对结直肠癌(CRC)患者免疫功能及肿瘤标志物的影响。方法:选取我院2021年6月—2022年7月收治的83例CRC患者,按患者入院单尾号进行分组,单号纳入对照组(42例)、双号纳入研究组(41例);对照组予FOLFOX6化疗方案治疗,研究组予FOLFOX6化疗方案联合补气益肾方治疗;对比两组疗效、免疫功能指标、肿瘤标志物水平及毒副反应。结果:研究组总有效率(ORR)较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平较对照组高,CEA、CA125、CA199水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);研究组毒副反应总发生率较对照组低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CRC患者采用FOLFOX6化疗方案联合补气益肾方治疗效果较好,可改善免疫功能,降低肿瘤标志物水平,且可在一定程度上减少毒副反应发生。

基于外泌体miR-27a-3p探究疏肝益肾方治疗乳腺癌内分泌耐药患者的临床研究

目的探究血浆外泌体miR-27a-3p及其靶基因BAK1血浆蛋白表达水平对内分泌耐药乳腺癌患者预后及治疗效果的评价作用;探究疏肝益肾方对乳腺癌内分泌耐药患者血浆外泌体miR-27a-3p、靶基因BAK1血浆蛋白的影响。方法采用非随机对照的临床研究方法,纳入内分泌治疗(ET)耐药和ET敏感的乳腺癌患者各10例,观察2组患者血浆外泌体miR-27a-3p及其靶基因BAK1血浆蛋白表达的差异;ET耐药患者使用氟维斯群+CDK4/6抑制剂+疏肝益肾方加减治疗2周,比较治疗前后血浆外泌体miR-27a-3p、靶基因BAK1血浆蛋白水平、中医证候积分总分、生活质量评分的变化。结果治疗前,ET耐药组患者血浆外泌体miR-27a-3p的表达低于ET敏感组患者(P>0.05);血浆BAK1蛋白显著低于ET敏感组患者(P<0.01);中医证候积分总分和生活质量评分高于ET敏感组(P<0.01)。治疗后,ET耐药组血浆外泌体miR-27a-3p表达及BAK1蛋白与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);ET耐药组中医证候积分总分、生活质量评分较治疗前降低(P<0.05,P<0.01)。结论血浆外泌体miR-27a-3p及其靶基因BAK1血浆蛋白表达水平是评价乳腺癌内分泌治疗反应的潜在标志物;疏肝益肾方可以改善内分泌耐药患者的生活质量和中医证候评分,可能通过调控血浆外泌体miR-27a-3p及其靶基因BAK1的水平发挥作用。

健脾益肾方联合水飞蓟宾安对脾肾两虚型艾滋病的应用效果

目的探讨健脾益肾方联合水飞蓟宾安对脾肾两虚型艾滋病的应用效果。方法选取2021年5月—2023年5月常州市第三人民医院诊治的80例艾滋病患者作为研究对象,应用随机数表法将其分为观察组与对照组,每组40例。对照组采取常规抗逆转录病毒联合水飞蓟宾安治疗,观察组在常规抗逆转录病毒治疗基础上增加健脾益肾方联合水飞蓟宾安治疗,比较两组患者治疗前后中医证候积分变化、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD8^(+)CD38^(+)淋巴细胞数量变化以及肝肾功能变化。结果治疗前两组患者腰膝酸软、腹泻、纳差、乏力相关中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者腰膝酸软、腹泻、纳差、乏力相关中医证候积分均降低,观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD8^(+)CD38^(+)淋巴细胞数量比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者CD3^(+)CD4^(+)淋巴细胞数量均升高,且观察组高于对照组,CD3^(+)CD8^(+)、CD8^(+)CD38^(+)数量均降低,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前谷丙转氨酶(Glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Glutamic transaminase,AST)、血肌酐(Blood creatinine,Scr)、尿素氮(Urea nitrogen,BUN)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者ALT、AST、SCr、BUN水平均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾益肾方联合水飞蓟宾安对脾肾两虚型艾滋病治疗效果显著,可减轻患者临床症状,改善免疫功能与肝肾功能,值得临床应用。

健脾益肾方联合左甲状腺素钠片治疗分化型甲状腺癌术后临床观察

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)术后采用健脾益肾方联合左甲状腺素钠片治疗的临床效果。方法:依据随机数字表法将医院2021年10月-2023年10月152例完成甲状腺切除术治疗的DTC患者分为对照组(n=76,术后常规治疗+左甲状腺素钠片)和观察组(n=76,术后常规治疗+左甲状腺素钠片+健脾益肾方),两组均持续治疗3个月。比较两组中医证候评分、炎症反应、免疫功能及不良反应情况。结果:治疗3个月,观察组中医证候评分、炎症反应指标均较低于对照组,免疫功能指标改善优于对照组(P<0.05);两组治疗期间心悸、手震颤、多汗、失眠、恶心呕吐、口干的总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DTC术后采用健脾益肾方联合左甲状腺素钠片治疗可有效减轻临床症状,降低炎症反应,改善免疫功能,且未明显增加不良反应。

基于Klotho/FGF23轴研究益肾方对慢性肾衰竭早期大鼠的影响

目的:观察益肾方对腺嘌呤所致的慢性肾衰竭早期大鼠血清FGF23和肾组织Klotho mRNA值表达的影响,从而探讨益肾方延缓慢性肾衰竭进展的作用机制。方法:90只大鼠随机分为空白组、模型组、尿毒清组和益肾方低、中、高剂量(0.675、1.35、2.7 g/kg)组,每组各15只;除空白组外,其余各组采用腺嘌呤(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃4周造模,造模成功后,除空白组和模型组外,其余各组给药干预8周。测定Scr、BUN、UmAlb、24 h UTP;HE、Masson染色镜下观察大鼠肾组织的病理变化;用ELISA检测血清FGF23蛋白含量、RT-PCR法检测肾组织Klotho mRNA的表达。结果:给药8周后,与模型组相比较,尿毒清组和益肾方组Scr、BUN、24 h UTP、UmAlb水平降低(P<0.05),血清FGF23的表达量均有下降(P<0.05),益肾方高剂量组下降更为明显(P<0.05),肾组织Klotho mRNA表达量增多,以益肾方高剂量组增加的更明显(P<0.05)。结论:益肾方能明显延缓慢性肾衰竭早期大鼠的进展,其作用机制可能与Klotho/FGF23轴有关。

雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效及对氧化应激和足细胞损伤指标的影响

目的:探讨雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效及对氧化应激和足细胞损伤指标的影响。方法:收集92例脾肾气虚型糖尿病肾病患者分为对照组(n=46)和观察组(n=46)。对照组予西药治疗,观察组在对照组基础上联合雪莲益肾方治疗。比较疗效、24 h尿蛋白、24 h尿微量白蛋白、中医证候积分、氧化应激指标、足细胞损伤指标和不良反应。结果:观察组治疗总有效率高于对照组(93.5%vs 78.3%,P<0.05)。治疗后,观察组24 h尿蛋白、24 h尿微量白蛋白水平和中医证候积分低于对照组,氧化应激指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组,丙二醛(MDA)水平低于对照组,足细胞损伤指标尿Nephrin和Podocin蛋白水平低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效确切,其机制可能与减轻氧化应激和足细胞损伤有关。

补肺益肾方联合呼吸肌功能锻炼治疗老年慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者的疗效观察

目的:观察用补肺益肾方联合呼吸肌功能锻炼治疗老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压(PH)的临床效果。方法:将116例老年COPD合并PH患者随机分为对照组和观察组,各58例。两组患者均给予西医常规治疗,对照组在此基础上给予呼吸肌功能锻炼;观察组在对照组的基础上给予补肺益肾方口服,连续治疗2周。比较两组中医证候积分、肺功能、平均肺动脉压(mPAP)、Borg呼吸指数、6 min步行测试(6MWT)距离、血清因子水平。结果:观察组的临床总有效率、肺通气功能指标高于对照组;中医证候积分、mPAP、Borg呼吸指数及血清红细胞压积、C反应蛋白、脑钠肽、血浆D-二聚体水平低于对照组,6MWT距离长于对照组(P<0.05)。结论:补肺益肾方联合呼吸肌功能锻炼利于减轻老年COPD合并PH患者的临床症状,改善肺功能、运动耐力和血液流变学,降低肺动脉压和炎症反应。

通络益肾方联合非奈利酮治疗糖尿病肾病的临床效果

目的研究通络益肾方联合非奈利酮治疗糖尿病肾病(DKD)的临床效果。方法选择2023年1月至5月在我院诊治的40例DKD患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组20例。对照组给予非奈利酮治疗,观察组采用通络益肾方联合非奈利酮治疗。比较两组的肾功能指标、炎症因子、氧化应激指标、临床疗效及用药安全性。结果治疗后,观察组的血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿微量白蛋白(mALB)、尿白蛋白与肌酐比值(UACR)、24 h尿蛋白定量(UP-24 h)水平明显低于对照组,估算肾小球滤过率(eGFR)显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组的白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平低于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组(P<0.05)。观察组的治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论通络益肾方联合非奈利酮治疗DKD患者可以有效控制尿蛋白、减轻炎性反应、改善氧化应激水平。

缩泉益肾方对秀丽隐杆线虫的降脂作用及机制研究

目的:以N2野生型秀丽隐杆线虫为研究对象,探究缩泉益肾方(SQYSP)对线虫脂质代谢的影响及作用机制。方法:SQYSP以醇提和水提两种不同方式提取,并分别以20、50、100 μg/mL的剂量作用于秀丽隐杆线虫,观察SQYSP对线虫运动能力和生殖能力的影响。采用油红O染色法对线虫肠道脂滴进行染色,观察线虫体内脂肪沉积的变化;同时,通过RT-PCR检测线虫体内与脂质代谢相关基因skn-1、sbq-1、fasn-1、fat-7的表达水平。结果:SQYSP醇提物在50 μg/mL和100 μg/mL浓度下均可以提高线虫寿命(P P P P P P P P < 0.01)。结论:SQYSP的醇提物和水提物在不损害线虫正常生理功能的情况下,对秀丽隐杆线虫有降脂的作用,其作用机制可能与skn-1、sbq-1、fasn-1和fat-7的调节有关。

健脾益肾方治疗脾肾两虚浮肿

慢性肾炎、肾病综合征、过敏性紫癜性肾炎、肾盂肾炎、乙肝肾炎等病临床症见浮肿久治不愈,小便短少,面黄,乏力,身体虚弱,尿中蛋白久不消退,舌质淡,苔薄白,脉沉弱。中医辨证属脾肾两虚,治宜健脾益肾、解毒化瘀。治疗方法如下:处方:黄芪、鱼腥草、白花蛇舌草、益母草、石韦各15克,熟地、山药、茯苓各10克,地龙、党参、丹参各6克。

穴位温灸联合健脾益肾方治疗脾肾阳虚证维持性腹膜透析患者临床研究

目的:观察穴位温灸联合健脾益肾方对脾肾阳虚证维持性腹膜透析(CAPD)患者肾小球滤过率(eGFR)、残余肾功能(RRF)及微炎症状态的影响。方法:选取106例接受CAPD治疗的慢性肾脏病患者为研究对象,采用随机数字表法均分为2组各53例。2组均在CAPD基础上进行对症支持治疗,同时给予健脾益肾方口服,观察组另取中脘、神阙和关元3个穴位分别以艾条温灸30 min,疗程均为6个月。比较2组临床疗效,比较2组治疗前后中医证候积分、GFR、RRF及微炎症状态。结果:观察组治疗总有效率89.13%,高于对照组72.34%(P<0.05)。治疗前,2组畏寒肢冷、腰膝酸软、倦怠乏力、气短懒言、食少纳呆等中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组上述中医证候积分均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组尿素清除率(Kt/V)、总肌酐清除率(TCCr)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,对照组Kt/V、TCCr明显降低(P<0.05),观察组Kt/V、TCCr无明显变化(P>0.05),且观察组Kt/V、TCCr高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组24 h尿量、eGFR、RRF比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组24 h尿量、eGFR、RRF及对照组24 h尿量无明显变化(P>0.05),对照组eGFR、RRF降低(P<0.05),且观察组eGFR、RRF高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组血清C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组血清CRP、IL-6、TNF-α水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:穴位温灸联合健脾益气方治疗脾肾阳虚证CAPD患者,可促进症状缓解并增强疗效,同时还有利于提升透析充分性,减轻肾功能损害并改善机体微炎症状态。

健脾益肾方对肺癌恶病质模型小鼠肌肉消耗及生存期的影响及机制研究

目的 建立C57小鼠肺癌恶病质模型,观察健脾益肾方对其肌肉消耗及生存期的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 取10只C57BL/6小鼠为正常对照组;剩余小鼠给予腋下注射lewis肺腺癌肿瘤细胞制备肺癌恶病质模型,随机分为模型组、健脾益肾组、甲地孕酮组,各16只。肺癌细胞接种第2天,健脾益肾组以5倍临床等效剂量给予2.3 g/mL健脾益肾方灌胃,0.3 mL/次;甲地孕酮组给予甲地孕酮溶液灌胃,0.3 mL/次;模型组与正常对照组给予同等体积的生理盐水灌胃。各组均1次/d,灌胃直至第60天。给药14 d后每组取10只小鼠以断颈法处死,其余小鼠留存进行生存期观察。对比各组生化指标[白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白球比(ALB/GLB),谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),血糖(GLU),血钙(CA)],脾脏、肝脏质量及腓肠肌质量,血清TNF-α、激活素A (Activin-A)水平,生存期,肌萎缩相关基因(Activin-A、Myostatin、MuRF-1 mRNA)表达,自噬相关基因(AMPK、beclin mRNA)表达。结果 各组体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,健脾益肾组、甲地孕酮组肿瘤最大径、瘤重小(P<0.05),且健脾益肾组肿瘤最大径、瘤重小于甲地孕酮组(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组GLU、ALB、ALB/GLB低,AST、AST/ALT、CA高(P<0.05);与模型组比较,健脾益肾组GLU、ALB、ALB/GLB高,AST、AST/ALT、CA低(P<0.05),甲地孕酮组GLU高(P<0.05);与甲地孕酮组比较,健脾益肾组ALB/GLB高(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组脾脏、肝脏质量高,腓肠肌质量低(P<0.05);与模型组比较,健脾益肾组肝脏质量低(P<0.05),腓肠肌质量高(P<0.05);与甲地孕酮组比较,健脾益肾组肝脏质量低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组血清TNF-α、Activin-A水平高(P<0.05);与模型组比较,健脾益肾组、甲地孕酮组血清Activin-A水平低(P<0.05)。与模型组比较,健脾益肾组生存期长(P<0.05);与模型组比较,甲地孕酮组生存期长,但差异无统计学意义(P>0.05);与甲地孕酮组比较,健脾益肾组生存期长,但差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组Activin-A、Myostatin、MuRF-1 mRNA表达高(P<0.05);与模型组比较,健脾益肾组、甲地孕酮组Activin-A、Myostatin、MuRF-1 mRNA表达低(P<0.05);与甲地孕酮组比较,健脾益肾组ActivinA mRNA表达低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组AMPK、beclin mRNA表达高(P<0.05);与模型组比较,健脾益肾组、甲地孕酮组AMPK、beclin mRNA表达低(P<0.05);与甲地孕酮组比较,健脾益肾组AMPK mRNA表达低(P<0.05),beclin mRNA表达高(P<0.05)。结论 健脾益肾方能够改善肺癌恶病质小鼠体内炎症环境,抑制其骨骼肌萎缩,延长生存期;其作用机制可能与自噬-溶酶体途径(autophagy-lysosomal pathway,ALS)和泛素-蛋白酶体(ubiquitin-proteasome,UPS)信号途径有关。

基于网络药理学和分子对接的补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病机制研究

目的:利用网络药理学方法联合分子对接探索补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的分子机制。方法:运用TCMSP及BATMAN-TCM数据库筛选补肺益肾方中12味中药的主要活性成分及有关靶点,与从GeneCards数据库获取的COPD疾病靶点取交集,通过STRING平台进行蛋白互作(PPI)网络分析,采用Cytoscape 3.9.1筛选核心靶点,随后利用Mestascape数据库对核心靶点进行GO、KEGG富集分析,并运用AutoDockTools 1.5.7对补肺益肾方治疗COPD的药物活性成分及相应核心靶点蛋白进行分子对接初步验证。结果:获得138个补肺益肾方药物有效成分,548个潜在靶点,主要包括槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇等活性成分以及TP53、SRC、MAPK3等22个核心靶点。GO富集分析得到768个GO条目,包含692个生物进程条目、32个细胞组分条目、44个分子功能条目:KEGG通路分析共得到149条信号通道,大多是与AGE-RAGE、TNF、MAPK信号通道等相关。分子对接结果表明补肺益肾方中药物活性成分与核心靶点间的靶向结合性能均较好。结论:该研究从分子层面揭示了补肺益肾方通过多种药物活性成分、多个作用靶点以及多条信号通路来联合治疗COPD的作用机制,为后续研究提供了一定的方向及理论依据。

黄芪益肾方联合西医常规疗法对慢性肾脏病2~4期患者临床疗效及促血管生长因子、肾功能的影响

目的:探究黄芪益肾方联合西医常规疗法对慢性肾脏病(CKD)2~4期患者临床疗效及血管内皮生长因子(VEGF)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及肾功能的影响。方法:选取80例CKD 2~4期中医证型为脾肾气虚、浊毒瘀阻型患者作为研究对象,随机分为对照组和治疗组,每组40例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在常规治疗基础上采用黄芪益肾方治疗,两组患者均治疗28 d。比较两组患者治疗前后中医证候积分变化情况,治疗前、治疗14 d、治疗28 d时促血管生长因子VEGF和HIF-1α水平,以及血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)的变化。结果:治疗组治疗28 d后中医证候积分较治疗前显著下降(P<0.01),且低于同期对照组(P<0.05)。两组患者治疗14 d后与治疗28 d后比较,治疗组较对照组Scr、BUN显著降低(P<0.05),eGFR显著升高(P<0.05),HIF-1α、VEGF显著升高(P<0.05);与治疗前比较,治疗组治疗后Scr、BUN显著降低(P<0.05),eGFR显著升高(P<0.05),同时HIF-1α、VEGF显著升高(P<0.05);对照组治疗后HIF-1α、VEGF无显著改变(P>0.05),治疗28 d后,Scr、BUN、eGFR较治疗前及治疗14 d后改善明显(P<0.05)。结论:黄芪益肾方可通过上调CKD 2~4期患者HIF-1α、VEGF水平,改善肾小管间质血供,抑制肾小管间质纤维化,从而改善患者肾功能,疗效显著。

熵权法-层次分析法结合Box-Behnken响应面法优化雪莲益肾方的提取工艺

目的 优选雪莲益肾方的提取工艺。方法 以雪莲益肾方中总黄酮、松果菊苷、毛蕊花糖苷含量及出膏率为考察指标,采用熵权法-层次分析法确定各指标的综合权重系数;以提取时间、料液比和提取次数为考察因素,上述各指标的综合评分为评价指标,基于Box-Behnken响应面法设计实验,优化雪莲益肾方的提取工艺。结果 雪莲益肾方的最优提取工艺为提取时间2 h、料液比1∶12、提取次数3次。3次验证实验的平均综合评分为96.40分(RSD为0.28%),与模型预测值的偏差为0.98%。结论 本研究优化后的工艺稳定可行、重复性好,可为雪莲益肾方的提取工艺提供参考。

自拟补肺健脾益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的临床疗效及对血清TGF-β1、bFGF、SOD水平的影响

【目的】探讨自拟补肺健脾益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的临床疗效及对血清转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。【方法】将86例COPD稳定期肺脾肾虚证患者随机分为对照组和观察组,每组各43例。对照组给予布地奈德吸入剂吸入治疗,并予以常规戒烟、预防呼吸道感染和呼吸功能锻炼。观察组在对照组的基础上联合自拟补肺健脾益肾方治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后临床症状评分、慢性阻塞性肺疾病评估测量表(CAT)评分、肺功能指标以及血清TGF-β1、bFGF、SOD水平的变化情况,评价2组患者的临床疗效,并采用改良呼吸困难量表(m MRC)评估患者治疗后的呼吸困难改善情况。【结果】(1)治疗3个月后,观察组的总有效率为95.35%(41/43),对照组为81.40%(35/43),组间比较,观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的中医临床症状评分(包括主症评分和次症评分)、CAT评分和急性加重次数均较治疗前降低(P<0.05),且观察组的降低作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(3)治疗后,2组患者的1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC等肺功能指标均较治疗前改善(P<0.05),且观察组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)治疗3个月后,观察组患者的呼吸困难改善程度明显优于对照组(P<0.05)。(5)治疗后,2组患者血清SOD水平均较治疗前升高(P<0.05),血清TGF-β1、b FGF水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对血清SOD水平的升高作用及对血清TGF-β1、bFGF水平的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。【结论】自拟补肺健脾益肾方对COPD稳定期患者疗效显著,可有效改善患者呼吸困难等临床症状与肺功能,降低急性加重发作次数,提高患者生活质量,其机制可能与清除自由基、降低气道炎症反应及纤维化有关。

滋膵益肾方治疗2型糖尿病肾病Ⅳ期患者蛋白尿的随机对照研究及机制探讨

目的:观察滋膵益肾方治疗2型糖尿病肾病IV期患者蛋白尿的临床疗效,同时利用网络药理学以及分子对接技术探讨滋膵益肾方治疗2型糖尿病肾病的作用机制。方法:收集于2019年12月—2021年12月至上海市嘉定区中医医院就诊的诊断为2型糖尿病肾病IV期患者86例。采用随机、对照的临床研究设计分为治疗组和对照组,观察患者症状评分、实验室指标、疾病疗效等指标变化;同时运用网络药理学及分子对接技术探讨滋膵益肾方治疗2型糖尿病肾病的作用机制。结果:本研究最终纳入统计分析的治疗组39例、对照组38例。治疗后,治疗组的中医证候、蛋白尿疗效优于对照组(P<0.05);治疗组24 h尿蛋白定量、血肌酐、胰岛素抵抗指数较治疗前明显下降,肾小球滤过率较治疗前明显上升(P<0.05);而尿酸、尿素氮较治疗前有下降趋势(P>0.05)。对照组经治后,患者24 h尿蛋白定量较治疗前明显下降(P<0.05);肾小球滤过率、肌酐、尿酸、尿素氮、胰岛素抵抗指数较治疗前变化幅度不大(P>0.05)。治疗组患者的24 h尿蛋白定量、肌酐、胰岛素抵抗指数的下降水平较对照组明显,而治疗组肾小球滤过率上升水平较对照组高(P<0.05);两组患者治疗前后血尿酸、血尿素氮的变化幅度相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗前后的HbA1c、血脂的变化不明显(P>0.05);两组均未见不良反应。通过网络药理学分析滋膵益肾方治疗2型糖尿病肾病的GO分析的生物过程主要富集在对异生素刺激的反应、对类固醇激素的反应等;细胞成分集中在膜筏、膜微区等;分子功能主要富集在核受体活性、转录因子活性等。KEGG通路富集分析主要为AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路等。通过分子对接技术显示HIF1A、CASP3、PPARG、EGFR和CCND1与quercetin、kaempferol、Stigmasterol、beta-sitosterol、Formononetin有较好的结合能力。结论:滋膵益肾方能够降低患者蛋白尿、保护肾功能、改善胰岛素抵抗。其潜在作用机制可能是通过作用于HIF1A、CASP3、PPARG、EGFR和CCND1等关键治疗靶点,参与调控AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路等途径。