益肾调经方调控PI3K/Akt通路对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢功能及凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨益肾调经方对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠的影响及相关机制。方法:在60只动情周期正常的SD大鼠中随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只大鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)诱导POI大鼠模型,建模成功后,随机分为模型组、对照组和中药低、中、高剂量组,连续给予相应药物灌胃14 d。灌胃结束后处死各组大鼠,观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、性激素水平,HE染色观察卵巢组织结构,RT-qPCR和免疫组化检测卵巢组织中PI3K、Akt、Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量明显下降(P<0.0001),动情周期延长(P<0.0001),卵巢指数明显下降(P<0.0001),E_(2)、AMH水平下降(P<0.0001,P<0.001)、FSH、LH水平升高(P<0.0001),模型组PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.0001,P<0.001),Bax mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.0001);与模型组比较,给药组大鼠一般状况明显改善,体质量出现不同程度增长(P<0.05,P<0.001,P<0.0001),动情周期缩短(P<0.0001),卵巢指数升高(P<0.0001),E_(2)、AMH水平升高(P<0.0001,P<0.01),FSH、LH水平降低(P<0.01,P<0.001,P<0.0001,),PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.001,P<0.0001),Bax mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.0001),且呈现明显的剂量依赖性,其中中药高剂量组改善效果最佳。结论:益肾调经方可能通过调控PI3K/Akt通路及凋亡相关蛋白从而达到改善POI模型大鼠卵巢功能的目的。

益肾调经方联合雌孕激素治疗中重度宫腔粘连分离术后的效果

目的:探讨中西医结合治疗宫腔镜下宫腔粘连分离术后预防再粘连的疗效。方法:选取广西医科大学附属南宁市妇幼保健院收治的中重度宫腔粘连患者81例为研究对象,随机分为研究组(n=40)与对照组(n=41)。两组均行B超监护下宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA),术后对照组予口服雌孕激素克龄蒙治疗3个月,研究组予口服雌孕激素克龄蒙+益肾调经方治疗3个月,比较术后月经改善情况、术后3个月行宫腔镜探查宫腔再次粘连情况,术后1个月及4个月B超检查子宫内膜厚度及术后1年妊娠率。结果:研究组术后月经改善占92.30%,对照组术后月经改善占85.71%,两组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.088,P>0.05);术后3个月研究组再次粘连率及再次中重度粘连发生率与对照组比较,均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.05);研究组术后1个月及4个月子宫内膜增厚与对照组比较,均更明显,差异有统计学有意义(P<0.05);研究组术后1年内妊娠率明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=5.512,P=0.019)。结论:益肾调经方联合雌孕激素克龄蒙治疗中重度宫腔粘连分离术后患者效果更佳,能够改善月经量,有利于促进子宫内膜增长,防止宫腔再粘连,显著提高患者妊娠率。

益肾调经方防治雷公藤多甙致女性慢性肾小球疾病患者性腺衰退的临床观察

目的观察益肾调经方对雷公藤多甙所致的女性慢性肾小球疾病患者性腺衰退的影响。方法将58例慢性肾小球疾病女性患者分为对照组24例,治疗组34例。对照组予雷公藤多甙片20 mg,每日3次,治疗组在对照组治疗基础上予益肾调经方,每日1剂;疗程均为3个月。治疗前后测定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)及尿蛋白定量、尿红细胞计数。结果治疗前后比较,对照组E2下降,FSH、LH增高(P<0.05),治疗组E2升高,FSH、LH无明显变化,两组患者治疗后尿蛋白均有减少(P<0.05);治疗后两组间上述指标比较均有统计学意义(P<0.05)。治疗组降低尿蛋白的作用优于对照组。结论益肾调经方能防治雷公藤多甙对女性肾病患者性腺的损害,并有利于原发的慢性肾小球疾病的治疗。

益肾调经方对雷公藤多苷致性腺抑制的肾病大鼠子宫内膜bcl-2／bax基因表达的影响

目的:观察益肾调经方(YSTJD)对雷公藤多苷致性腺抑制的肾病大鼠子宫内膜bcl-2、bax基因表达情况,探讨YSTJD防治性腺抑制的作用机理。方法:雌性SD大鼠50只,随机分为7组:正常对照组,肾病模型组,性腺抑制组,YSTJD高、中、低剂量组,西药对照组。8周用药结束后处死大鼠,取子宫,并用RT-PCR法测定bax/bcl-2mRNA的表达情况。结果:性腺抑制组bcl-2mRNA含量减少,与正常对照组比较P<0.05,YSTJD高、中剂量组和西药对照组较性腺抑制组升高(P<0.05)。性腺抑制组baxmRNA含量增高,与正常对照组比较P<0.05,YSTJD高、中、低剂量组和西药对照组较性腺抑制组降低(P<0.05)。YSTJD各剂量组随着剂量的增高baxmRNA的表达量有下降趋势,YSTJD高、中、低剂量组和西药对照组组间比较P>0.05。结论:YSTJD可以提高大鼠子宫内膜bcl-2mRNA的表达,降低baxmRNA的表达,通过调整bcl-2/bax比例而对由雷公藤多苷引起的性腺抑制有一定防治作用。

益肾调经方对阿霉素肾病伴雷公藤多苷致性腺抑制的雌性大鼠肾保护作用的实验研究

目的:在阿霉素尾静脉注射造成微小病变肾病动物模型的基础上,建立雷公藤多苷致雌性肾病大鼠性腺抑制的模型,并观察益肾调经方(YSTJF)对其的影响,探讨YSTJF对阿霉素肾病伴性腺抑制的雌性大鼠肾保护作用。方法:雌性SD大鼠50只,随机挑选6只作正常对照组。余用阿霉素5mg/kg一次性尾静脉注射造成微小病变肾病动物模型,并随机分为6组:(1)肾病模型组:再予蒸馏水灌胃。(2)性腺抑制组:再予雷公藤多苷80mg·kg-1·d-1。(3)YSTJF高、中、低剂量组:予雷公藤多苷80mg·kg-1·d-1、YSTJF水煎浓缩液(分别为含生药75、50、25g·kg-1·d-1)合用每日灌胃。(4)西药对照组:予雷公藤多苷片80mg·kg-1·d-1和结合雌激素倍美力0.02mg·kg-1.d-1合用每日灌胃。该实验共8周,实验结束后收集标本,24h尿蛋白、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),血肌酐(Scr),尿素氮(BUN);光镜下观察肾脏组织的病理。结果:肾病模型组的尿蛋白、尿NAG酶明显高于正常对照组;性腺抑制组、YSTJF各剂量组和西药对照组能降低尿蛋白、尿NAG酶;YSTJF中低剂量组降低尿蛋白与性腺抑制组比较(P<0.05);YSTJF高剂量组降低尿NAG酶优于低剂量组和性腺抑制组。肾病模型组BUN高于正常对照组(P<0.05);性腺抑制组、YSTJF各剂量组和西药对照组均低于肾病模型组(P<0.05);YSTJF各剂量组、西药对照组比性腺抑制组降低更明显(P<0.05),YSTJF各剂量组比西药对照组为佳(P<0.05)。从肾脏病理改变的小管间质病变积分分析:YSTJF各剂量组积分低于肾病模型组、性腺抑制组(P<0.05),高、中剂量组较西药对照组为佳。结论:YSTJF可以通过降低尿蛋白、NAG酶、BUN,降低肾小管间质积分,改善肾小管间质病理改变,对于阿霉素肾病伴性腺抑制的雌性大鼠有一定的肾保护作用。

益肾调经方防治雷公藤多苷致雌性肾病大鼠性腺抑制的实验研究

目的:研究益肾调经方对雷公藤多苷致雌性肾病大鼠性腺组织的结构和功能的影响。方法:大鼠随机分为7组。正常对照组、肾病模型组、性腺抑制组、益肾调经方水煎液高、中、低剂量组和阳性对照组。8周用药结束后摘眼球取血,颈椎脱臼处死大鼠,分离大鼠子宫、卵巢。计算子宫、卵巢重量指数,血清性激素测定,子宫、卵巢形态学变化观察及图像分析。结果:性腺抑制组子宫、卵巢的重量指数明显下降,子宫内膜厚度变薄,卵泡数量减少,血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)含量下降。加用益肾调经方的高、中、低剂量中药治疗组治疗后子宫、重量指数,子宫内膜厚度,卵泡数量,E2、P含量的变化,与性腺抑制模型组比较具有统计学差异,与正常对照组、肾病模型组比较变化不大。结论:益肾调经方具有对抗雷公藤多苷所致大鼠子宫、卵巢重量下降,子宫内膜厚度变薄,卵泡数量减少,E2、P的含量减少等作用,能防治雷公藤多苷所致的性腺抑制。

益肾调经方对卵巢储备功能减退大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的 观察益肾调经方对卵巢储备功能减退大鼠颗粒细胞凋亡的抑制作用,探讨其对凋亡相关基因caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 从适应性喂养1周的60只SD大鼠中随机选取10只为空白组,其余50只灌胃雷公藤多苷片混悬液造模后,随机分为模型组,益肾调经方高、中、低剂量组(9.2、4.6、2.3 g/kg),激素序贯组,连续给药15 d,期间进行阴道涂片检测,灌胃结束后处死各组大鼠,HE染色观察卵巢各级生长卵泡的变化及一般情况,TUNEL染色观察卵巢颗粒细胞凋亡情况,免疫组化染色和Western blot检测卵巢组织中caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达,RT-qPCR检测卵巢组织中caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢各级生长卵泡减少,颗粒细胞凋亡率升高(P<0.01),卵巢组织caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠动情周期明显改善,卵巢各级生长卵泡增多,颗粒细胞凋亡率降低(P<0.01),卵巢组织caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 益肾调经方能够有效抑制大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,改善卵巢功能,其机制可能与下调促凋亡因子caspase-3、Bax表达,上调抗凋亡因子Bcl-2表达有关。

益肾调经方对卵巢储备功能减退大鼠卵巢组织PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响

目的:探讨益肾调经方对卵巢储备功能减退大鼠卵巢组织PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响,明确其改善卵巢功能的作用机制。方法:雌性SD大鼠随机分为模型组、激素序贯(补佳乐0.1 mg/kg+黄体酮胶囊21 mg/kg)组及益肾调经方高(9.2 g/kg)、中(4.6 g/kg)、低(2.3 g/kg)剂量组,连续14 d灌服雷公藤多苷片混悬液50 mg/(kg·d)造模,造模结束后连续给予相应药物治疗15 d。另设正常对照组。阴道脱落细胞学检测确认其处于动情前期并处死大鼠;计算各组大鼠性腺指数;HE染色观察卵巢一般情况及各级卵泡的变化;免疫组化染色及Western Blot检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达;qRT-PCR检测PTEN、PI3K、AKT mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组动情周期紊乱,性腺指数显著降低,卵巢各级生长卵泡明显减少,PTEN mRNA及蛋白表达显著上调,PI3K、AKT、p-AKT mRNA和(或)蛋白表达显著下调;与模型组比较,益肾调经方组动情周期显著改善,大鼠性腺指数显著升高,卵巢各级生长卵泡增多,PTEN mRNA及蛋白表达显著下调,PI3K、AKT、p-AKT mRNA和(或)蛋白表达显著上调。结论:益肾调经方能有效改善DOR大鼠的卵巢功能,其作用机制可能与PTEN/PI3K/AKT通路有关。

益肾调经方联合雌孕激素治疗中重度宫腔粘连分离术后患者的临床疗效

目的探讨中西医结合治疗中重度宫腔粘连分离术后患者的效果。方法选取本院收治的中重度宫腔粘连患者200例为研究对象,根据随机数字表法分为两组,每组100例。两组均行宫腔镜下宫腔粘连分离术,术后,对照组采用常规西药治疗,研究组在此基础上采用益肾调经方治疗。比较两组治疗效果,对其随访1年,统计月经改善率及妊娠率。结果研究组宫腔复粘连率为14.00%,低于对照组的31.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组月经改善率、妊娠率分别为91.00%、39.00%,均高于对照组的77.00%、21.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中重度宫腔粘连分离术后患者采用益肾调经方联合雌孕激素治疗的效果显著,可降低复粘连率,改善月经情况,提高自然妊娠率,值得临床推广使用。

益肾调经方对子宫内膜异位症术后使用促性腺激素释放激素激动剂所致低雌激素状态的疗效观察

目的观察益肾调经方对子宫内膜异位症术后使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)所致低雌激素状态的疗效。方法将60例子宫内膜异位症患者经手术治疗,术后应用注射用醋酸亮丙瑞林缓释微球治疗并于第2次应用注射用醋酸亮丙瑞林缓释微球前出现低雌激素状态的患者,随机分为治疗组30例、对照组30例。治疗组予自拟益肾调经方口服,对照组予替勃龙片口服。观察雌二醇(E2)水平、库珀曼评分标准(Kupperman Index)评分、中医证候评分、中医证候疗效。结果治疗后2组E2较本组治疗前均上升(P<0.05),治疗组较对照组上升明显,治疗前后差值比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组优于对照组。治疗后2组Kupperman Index评分较本组治疗前均降低(P<0.05),治疗组较对照组降低明显,治疗前后差值比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组优于对照组。治疗后2组中医证候评分较本组治疗前均降低(P<0.05),治疗组较对照组降低明显,治疗前后差值比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组优于对照组。治疗组30例中痊愈12例,显效11例,有效6例,无效1例,总有效29例,总有效率为96.7%;对照组30例中痊愈10例,显效9例,有效8例,无效3例,总有效27例,总有效率为90.0%。经秩和检验,Z=-3.574,P=0.044,P<0.05,说明治疗组中医证候疗效优于对照组。结论益肾调经方对子宫内膜异位症术后使用GnRH-a所致低雌激素状态具有较好的疗效。