盐浓度梯度对DNA通过固态纳米孔的影响（英文）

针对DNA过孔速度过快以及信噪比低等制约固态纳米孔应用于DNA分子检测的问题,通过改变纳米孔两侧盐溶液的浓度,研究了其对DNA的过孔时间以及信噪比的影响.实验结果表明,当纳米孔两侧氯化钾溶液浓度相同时,λ-DNA的过孔时间以及电流堵塞信号都随着氯化钾浓度的提高而增加.但当纳米孔cis端的KCL浓度保持在1 mol/L,trans端的氯化钾浓度由1 mol/L变为0.1 mol/L时,归一化后的电流信号幅值增加了1个数量级.因此,调整纳米孔两端盐溶液的浓度梯度可以有效降低DNA的过孔速度和提高信噪比,从而大大提高了纳米孔在DNA分子检测方面的灵敏度.

幽门螺杆菌尿素酶的提取与纯化

采用2种方法分离纯化了幽门螺杆菌尿素酶。第1种方法是以 DEAE-sepharose FF离子交换剂和Superdex 200凝胶为分离介质,用 NaCl盐浓度梯度洗脱法从幽门螺杆菌超声上清液中提取纯化尿素酶抗原,所得到的纯化尿素酶经SDS-PAGE电泳分析,表明它具有很高的纯度,只含有分子质量为64 000 u和31 000 u两种蛋白成分,分别对应于幽门螺杆菌尿素酶的A、B两种亚基。第2种方法是以 DEAE-sepharose FF离子交换剂为分离介质,采用先去掉部分杂蛋白的方法纯化尿素酶,其中的去杂步骤操作简单、快捷且处理样品量大,大大减轻了后面纯化步骤的难度,适合于尿素酶的大量制备。纯化的尿素酶作为抗原采用ELISA间接法检测抗HP蛋黄免疫球蛋白(IgY),实验表明,其仍具有良好的抗原性,是HP主要抗原物质。应用纯化尿素酶抗原或纯化尿素酶抗原与超声粉碎抗原的混合抗原刺激蛋鸡应该能够产生抗HP效价更高的蛋黄免疫球蛋白,可以将其应用于保健或各种与HP相关的胃病的抗菌免疫治疗。