新型非甾体盐皮质激素受体拮抗剂非奈利酮治疗糖尿病肾病的研究进展

盐皮质激素受体拮抗剂(MRAs)是治疗糖尿病肾病(DKD)的药物之一,当与其他肾素-血管紧张素系统阻滞剂一起使用时,MRAs在降低蛋白尿方面有明显的作用,可通过抑制盐皮质激素受体过度活化引起的炎症和肾纤维化延缓DKD进展。新型非甾体MRAs非奈利酮具有较高的耐受性和选择性,在确保治疗有效性的同时,具有更好的安全性。本文对MRAs的研发历史及各代MRAs的异同、MRAs的治疗机制及药理学、临床前研究进行综述,并总结非奈利酮治疗DKD的临床研究进展,以期为新型非甾体MRAs的应用提供参考。

盐皮质激素受体与慢性肾脏病肾纤维化的研究进展

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是指持续时间>3个月的肾脏结构或功能异常,是儿童常见的泌尿系统疾病之一。全球CKD患病率为11%~13%,儿童为56.0/1000000~74.7/1000000[1]。CKD主要表现为不可逆的肾功能下降,肾间质纤维化是其重要的病理特点。

盐皮质激素受体拮抗剂治疗糖尿病足细胞损伤的研究进展

糖尿病肾脏疾病(DKD)可经多重机制损伤肾小球足细胞,足细胞病变进一步促进DKD进展。盐皮质激素通过作用于盐皮质激素受体(MR)调节人体水盐平衡、体液容量和血压。MR表达于足细胞、内皮细胞、系膜细胞等肾小球固有细胞,其活化将影响足细胞的结构和功能,损坏滤过屏障,导致蛋白尿。糖尿病状态下MR过度活化提高足细胞内氧化应激水平,损伤细胞超微结构,抑制足细胞自噬、促进凋亡,导致蛋白尿和肾脏局部炎症,阻断MR可避免足细胞结构受损、功能障碍和数量减少,有助于修复滤过屏障。本文将综述糖尿病导致足细胞损伤的病理生理机制,MR拮抗剂(MRA)保护足细胞的基础和临床研究,为MRA治疗DKD足细胞病变、减少蛋白尿、改善肾脏预后提供理论依据。

盐皮质激素受体拮抗剂的研究进展

肾素-血管紧张素-醛固酮系统激活可以导致醛固酮产生,醛固酮结合盐皮质激素受体参与维持机体水和电解质平衡,盐皮质激素受体拮抗剂(MRA)是竞争性抑制醛固酮与盐皮质激素受体结合的药物,已被证明可以显著降低心脏疾病的风险及减缓肾脏疾病的进展。该文主要介绍各类MRA的作用机制、生理效应和不良反应。

盐皮质激素受体与代谢相关心血管疾病的研究进展

盐皮质激素受体(MR)通过与醛固酮结合发挥多种生理作用,参与全身多种系统性疾病的发病过程。MR可在多种细胞中表达,如免疫细胞、代谢细胞等,在这些细胞中MR可通过参与炎症、氧化应激及内皮细胞功能障碍等过程调节机体免疫、代谢和应激反应。本文就MR与代谢相关心血管疾病之间的关系进行简要回顾,研究免疫细胞和代谢细胞MR参与调节心肌肥厚、心肌纤维化、动脉粥样硬化、肝脏脂肪变性、胰岛素抵抗、心肌重构及高血压等的关键作用及机制,以期为代谢相关心血管疾病的防治提供证据和思路。

盐皮质激素受体拮抗剂在糖尿病肾病治疗中的研究进展

随着人们生活水平的提高,糖尿病的患病率正在迅速增加。目前全球确诊糖尿病病例数约为4.22亿,预计到2040年将达到6.4亿,糖尿病肾病发病率和患病率也将随之增加[1]。对糖尿病肾病患者治疗的目的主要是保护肾脏功能和降低终末期肾病、心血管事件和死亡风险。

盐皮质激素受体拮抗剂对糖尿病肾病的作用研究进展

糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)作为糖尿病(diabetes mellitus, DM)的一个常见且严重并发症,目前已成为全球终末期肾衰竭(ESRD)的主要病因。因此,预防和治疗DKD至关重要。盐皮质激素受体拮抗剂(MRA)通过阻断盐皮质激素受体(MR)过度活化引起的氧化应激、炎症、纤维化作用实现对DKD的肾、心双重获益,成为延缓DKD进展的新选择之一。本文就盐皮质激素及MR的病理生理作用机制以及MRA对DKD作用研究等内容进行综述。

非类固醇盐皮质激素受体拮抗剂在糖尿病肾病中的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病的重要微血管并发症之一,研究显示盐皮质激素受体在糖尿病肾病的发展中起到重要作用,然而,因高钾血症、男性乳腺发育等不良反应,传统盐皮质激素受体拮抗剂的临床应用受限,近年来非类固醇盐皮质激素受体拮抗剂作为新型糖尿病肾病治疗药物受到关注。本综述介绍了盐皮质激素受体参与糖尿病肾病的病理生理学机制,并简要概述了非类固醇盐皮质激素受体拮抗剂相关临床研究进展。

非甾体类盐皮质激素受体拮抗剂治疗糖尿病肾病的研究进展

迄今为止,预防或减缓慢性肾脏疾病(CKD)进展的治疗仍选择有限。糖尿病是引起CKD的主要原因之一。近几十年来,血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素受体阻滞剂(ARB)一直都是CKD治疗的基石,但仍有相当大比例的CKD患者进展为终末期肾病。盐皮质激素受体拮抗剂(MRAs)提供了进一步减缓肾功能丧失的可能性,而非甾体类MRAs是一类新的药物,旨在满足糖尿病肾病(DKD)患者有效保护肾脏和心脏的医疗需求。本文将探讨非甾体类MRAs治疗DKD的基本原理、药理学及最近发表的试验。

盐皮质激素及其受体在血压调节中的作用

盐皮质激素是由肾上腺皮质球状带分泌的类固醇激素,其中醛固酮作用最强。醛固酮不仅参与肾脏水盐代谢调节,还通过多种途径对靶器官产生一系列负性作用。盐皮质激素受体不仅存在于肾脏上皮细胞中,还在心脏、血管、海马和皮肤等多种肾外组织、器官中表达,介导一系列生理病理过程,参与血压的调控和靶器官的重构。该文主要介绍盐皮质激素及其受体参与血压调节的机制。

盐皮质激素受体在博来霉素诱导的实验性肺纤维化中的作用

目的:研究盐皮质激素受体(MR)在博来霉素诱导的实验性肺纤维化进展过程中的作用及机制。方法:将126只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、博来霉素组和MR阻断剂螺内酯干预组,气管内一次性滴注博来霉素(2.5 mg/kg)溶液建立实验性小鼠肺纤维化模型,螺内酯干预组每天按螺内酯20 mg/kg经灌胃给药。于术后12 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d和28 d处死小鼠,采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用real-time PCR检测各组肺组织中胶原1(Col1)、Col3、转化生长因子β(TGF-β)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及MR mRNA的表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,博来霉素组及螺内酯干预组小鼠在滴注博来霉素后经历了典型的急性炎症期(12 h^3 d)、纤维化进展期(14 d)和纤维化晚期(28 d)。阻断MR下调早期炎症反应并减轻了纤维化程度。(2)螺内酯干预可以有效降低MR mRNA表达水平;阻断MR在急性炎症期显著下调MCP-1 mRNA的表达,在14 d显著下调TGF-β、Col1和Col3 mRNA表达水平。结论:(1)阻断MR可以明显减轻博来霉素诱导的肺纤维化程度;(2)阻断MR可能通过在急性炎症期调节MCP-1和TGF-β的表达,减轻炎症反应,并在纤维化进展期,下调TGF-β的表达,从而抑制肺纤维化的进展。

创伤后应激障碍样大鼠杏仁中央核盐皮质激素受体表达的变化

目的:研究创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠杏仁中央核(CeA)盐皮质激素受体(MR)表达的变化。方法:使用连续单一应激(SPS)方法建立PTSD样大鼠模型。应用免疫组织化学、免疫印迹法检测各组杏仁中央核的盐皮质激素受体表达。结果:MR分布在CeA神经元的胞体和突起中,SPS刺激后24 h,MR表达明显下调,而7 d时快速回升并可见MR阳性神经元的突起增长、增多,至14 d时趋于稳定,突起减少,但MR表达仍低于正常状态。结论:PTSD样大鼠CeA的神经元突起增长、增多,提供了CeA与PTSD恐怖增强相关的形态学基础;PTSD样大鼠CeA的MR表达变化,可能是HPA轴调节紊乱从而引发PTSD相关症状的重要因素之一。

盐皮质激素受体和糖皮质激素受体在创伤后应激障碍大鼠海马CA1区的共存表达

目的:研究创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马CA1区神经元盐皮质激素受体(MR)和糖皮质激素受体(GR)表达及共存变化。方法:用连续单一刺激(SPS)方法刺激大鼠制作PTSD模型,用ELISA检测不同时间大鼠血清糖皮质激素(GC)。取SPS后12 h、1 d、7 d鼠脑组织,以非刺激的脑组织为对照组,用免疫荧光双标技术进行各组海马CA1区神经元MR和GR表达及二者共存表达的观察。结果:大鼠血清GC于SPS后1 h时明显增高,12 h时仍持续升高,24 h时低于正常,7、14 d回升但低于正常;激光共聚焦显微镜(CLSM)下,MR-CY3呈红光,GR-FITC呈绿光,二者融合为黄色或橙色光。对照组可见MR分布于胞质和胞核,GR主要分布于胞核,少数于胞质;12 h时MR表达减少,GR在胞核内明显增多;1 d时MR表达进一步减少且集中于胞质,GR集中于胞质;7 d时MR持续减少,GR重新表达于胞核。用双重波长激发时,对照组融合光集中于胞核,12 h时核内融合光增多,1 d时融合光集中于胞质,7 d时核内融合光再次增多。结论:MR、GR在海马CA1区神经元内表达与PTSD大鼠血中GC浓度变化相互影响,而导致海马受损、功能降低。

隔药饼灸对功能性消化不良肝郁脾虚模型大鼠海马盐皮质激素受体、糖皮质激素受体、5-羟色胺1A受体表达的影响

目的:观察隔药饼灸对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)肝郁脾虚模型大鼠海马盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HTR1A)表达的影响.方法:将50只SD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、逍遥散组、多潘立酮组5组,每组10只,空白组正常喂养,其余4组采用复合病因造模法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾+摇晃)造模,连续3 wk;再按被试因素予以隔药饼灸和逍遥散、多潘立酮灌胃,共治疗2 wk.实验结束后采用营养性半固体糊灌胃法测定大鼠胃排空率,用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)法检测大鼠海马MR、GR、5-HTR1A的表达.结果:(1)模型组大鼠胃排空率较空白组明显下降(P<0.01),治疗后各治疗组大鼠胃排空率较模型组上升(均P<0.01),但3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)与空白组比较,模型组大鼠MR表达差异无统计意义(P>0.05);而G R及5-H T R1A的表达下降且差异均有统计意义(均P<0.05);与模型组比较,隔药饼灸组、逍遥散组、多潘立酮组大鼠海马MR的表达亦无统计意义(P>0.05),而GR及5-HTR1A的表达上调且差异均有统计学意义(均P<0.05),但3组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论:隔药饼灸同逍遥散及多潘立酮一样能调节海马GR、5-HTR1A的表达,从而调节边缘系统-下丘脑-垂体-肾上腺轴(limbic system-hypothalamic-pituitary-adrenal axis,LHPA/HPA轴),提高大鼠胃排空率,改善胃肠动力,最终起到治疗本病的作用.

雷米普利对慢性心力衰竭大鼠心肌组织中盐皮质激素受体的影响

目的探讨雷米普利对慢性心力衰竭大鼠心肌组织中盐皮质激素受体(MR)表达及心肌纤维化的影响。方法选择SD大鼠39只,选用慢性心力衰竭造模成功SD大鼠26只,随机分为慢性心力衰竭组(心衰组,13只)、雷米普利治疗组(治疗组,13只),另设假手术大鼠为对照组(13只)。雷米普利治疗4周时,用心肌Masson染色法测定大鼠心肌胶原密度,放射性免疫法测定大鼠心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)含量,实时荧光定量PCR、免疫印迹检测心肌MR表达。结果与对照组比较,心衰组大鼠心肌组织中AngⅡ、ALD显著升高,MR mRNA和蛋白表达显著上调,心肌胶原密度显著增加(P<0.01);与心衰组比较,治疗组大鼠心肌组织中AngⅡ、ALD显著降低.MR mRNA和蛋白表达显著下调,心肌胶原密度显著降低(P<0.01)。结论雷米普利不仅降低慢性心力衰竭大鼠心肌组织中AngⅡ、ALD含量,还可能通过下调心肌MR的表达来抑制心肌纤维化。

大鼠海马神经元核受体-盐皮质激素受体于穹窿切断后表达的变化

目的:建立大鼠穹窿切断模型,研究海马神经元核受体-盐皮质激素受体(MR)表达的变化。方法:建立大鼠穹窿切断模型,于穹窿切断术后0、4、7、10 d取材;同时取材假手术组(非穹窿切断术)、正常组作为对照,应用免疫组织化学、免疫印迹方法分别进行各组海马神经元MR表达变化的观察及定量检测。结果:穹窿切断7 d后,免疫组织化学和免疫印迹结果显示海马神经元MR表达下调,10 d下调更为显著。结论:穹窿切断后,海马MR表达下调,提示海马对下丘脑-垂体-肾上腺轴的抑制作用可能在穹窿切断后减弱。

盐皮质激素受体在Dahl盐敏感大鼠心肌纤维化中的作用

目的探讨心肌组织中盐皮质激素受体(MR)在高血压大鼠心肌纤维化中的作用。方法通过高盐饮食以及加用选择性盐皮质激素受体拮抗剂依普利酮干预Dahl盐敏感大鼠血压,8周后通过心脏/体重比值、心肌组织AZAN染色以及定量PCR检测心肌组织胶原蛋白mRNA评估心肌纤维化水平,蛋白印迹法检测大鼠心肌组织盐皮质激素受体的表达水平以及定量PCR检测心肌组织炎症相关因子PAI-1和TGF-β1 mRNA的表达水平,评价盐皮质激素受体和心肌纤维化的关系。结果和低盐饮食组比较,高盐饮食诱导Dahl盐敏感大鼠血压升高[168.1±10.8 mmHg比124.3±10.2 mmHg],心脏/体重比值明显增加[(0.341±0.006)比(0.287±0.004)],大鼠心肌组织纤维化比例[(11.78%±0.54%)比(3.12%±0.55%)]和胶原蛋白ⅣmRNA[(3.23±0.21)比(1.32±0.06)]表达均增加;大鼠心肌组织盐皮质激素受体的表达水平增加[(0.38±0.03)比(0.21±0.07)];心肌组织PAI-1和TGF-β1 mRNA的表达水平增加[PAI-1:(0.88±0.12)比(0.55±0.18);TGF-β1:(2.25±0.37)比(1.26±0.41)],而且同心肌组织纤维化呈正相关。利用选择性盐皮质激素受体拮抗剂依普利酮后大鼠心脏/体重比值、心肌纤维化比例、胶原蛋白mRNA、盐皮质激素受体、PAI-1和TGF-β1 mRNA均明显下降。结论盐皮质激素受体和相应的激素相互作用,介导心肌炎症,引起心肌组织纤维化。盐皮质激素受体拮抗剂可以缓解高血压引起的心肌纤维化,改善心肌重构。

干扰盐皮质激素受体基因对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响

目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组:野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(shMR)组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果:(1)MR shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2)从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组(P<0.05),说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3)WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期比例明显下降,增殖指数下降(P<0.05)。(4)WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。

醛固酮合成酶和盐皮质激素受体基因在充血性心力衰竭心肌的表达

目的 研究醛固酮合成酶 (Aldosterone synthase,CYP11B2 )及盐皮质激素受体 (Mineralocorticoid receptor,MR)基因在心功能不全心肌中的表达。方法 选取 2 5例行瓣膜置换术的慢性心力衰竭 (CHF)患者左心室乳头肌组织 10 0 mg,同时取 6例健康心肌组织作为对照 ,提取组织总 RNA,并逆转录为 c DNA,以特定的寡核苷酸为引物进行聚合酶链反应 ,β- actin作为内参照 ,分别观察 CYP11B2及 MR在不同心功能状态心肌中的表达。结果 在 6例正常心肌组织中 CYP11B2基因的表达为阴性 ,2 5例 CHF患者中有 10例表达阳性 ,分别为心功能 级～ 级 2例 , 级～ 级 8例 ;轻度心力衰竭患者 (心功能 ～ 级 )与重度心力衰竭患者 (心功能 ～ 级 )表达阳性率分别为 15 .4 %和 6 6 .7% ,差异有显著性 (P=0 .0 15 )。正常心肌、心功能 ～ 级和心功能 ～ 级心肌 MR/ β- actin分别为 1.2 8± 0 .13,0 .92± 0 .12 ,0 .80± 0 .2 1,与正常对照组相比 ,CHF时 MR基因表达明显下降 (P<0 .0 0 1) ,而心功能 ～ 级与心功能 ～ 级之间 ,无显著性差异 (P=0 .0 83)。慢性心力衰竭患者中 ,CYP11B2基因表达阳性与阴性组之间 MR/ β- actin表达分别为 0 .78± 0 .2 0和 0 .94± 0 .13,二者间具有显著性差异 (P=0 .0 18)。

PTSD样大鼠蓝斑核盐皮质激素受体表达变化的研究

目的探讨PTSD样大鼠蓝斑(locus ceruleus,LC)神经元盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptors,MR)表达的变化。方法使用连续单一应激(SPS)方法建立PTSD大鼠模型,随机分为SPS处理后24h、4d、7d、14d和28d组,非SPS刺激大鼠作为对照,应用免疫组化、免疫印迹方法分别进行各组蓝斑神经元MR表达变化的观察及检测,进行图像分析和统计学处理。结果蓝斑神经元MR的表达呈现24h急剧下调,4d、7d,14d和28d恢复性上调。结论PTSD样大鼠蓝斑神经元MR的表达变化可能直接参与了PTSD持续性精神行为障碍的发生发展过程。