蜢子虾酱中度嗜盐菌的分离、鉴定及特性研究

从蜢子虾酱中分离纯化鉴定了一株中度嗜盐菌MKY20,对其进行了形态学和生理生化特性研究;通过测定其16S rDNA序列并通过系统发育分析对该菌株进行了分子水平的鉴定。试验结果表明,嗜盐菌株MKY20为革兰氏阳性菌,菌体可以产芽孢,呈杆状,菌体大小为(0.6μm^0.8μm)×(2.0μm^4.0μm);生理生化特性研究表明菌株MKY20最适盐度为3%,最适生长温度为28℃~34℃,最适pH值为7.0;系统发育分析将该菌初步鉴定为枝芽孢杆菌属(Virgibacillus)中的盐脱氮枝芽胞杆菌(Virgibacillus halodenitrificans)。该研究将为进一步研究虾酱中的嗜盐菌的菌落结构提供参考,为防止嗜盐菌污染食品提供帮助。

1株中度嗜盐菌质粒基因组文库的构建及2个膜蛋白基因的克隆和序列分析

中度嗜盐菌是生活在高盐环境中的微生物,以1株从蜢子虾酱中分离的中度嗜盐菌盐脱氮枝芽胞杆菌(Virgibacillus halodenitrificans)为研究对象,通过酶切,筛选DNA片段然后连接pUC19载体并转化大肠埃希菌,构建了该菌株的质粒基因组文库,推测可获得5×103个阳性克隆,覆盖约15 Mb的遗传信息。随机选取部分克隆进行测序,在测序结果中筛选到了2个具有完整ORF的膜蛋白基因分别为编码Na+H+逆向转运蛋白的NhaC基因,编码一离子通道蛋白的MscS基因,GenBank登陆号分别为JX849200、JX849202。其中NhaC基因ORF全长为1 446 bp,编码481个氨基酸,包括10个跨膜结构域;MscS基因的全长ORF为822 bp,编码273个氨基酸的蛋白质,包括3个跨膜区,与其他菌种的序列比对表明第3个跨膜区保守性最强。