盐酸埃他卡林对内皮素系统的影响

目的 研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride，Ipt)对内皮素(ET)系统的作用。方法 以放射免疫法测定大鼠血浆内皮素水平和培养的血管内皮细胞释放的内皮素量；以RT-PCR技术，测定内皮素及其转化酶(ECE)基因表达的变化；在离体血管标本上，观察内皮素对血管平滑肌张力的影响；在麻醉大鼠上，插入肺内动脉导管测定肺动脉压。结果 ①在SHRsp上，Ipt0．25～4．0mg·kg^-1，po，1次／d，3个月，可对抗血浆中内皮素水平的病理性增高；②在培养的新生小牛主动脉内皮细胞(BAEC)上，Ipt在1～1000μmol·L^-1浓度范围内，能剂量依赖性地抑制培养的新生小牛主动脉内皮细胞分泌内皮素；③并能抑制培养的新生小牛主动脉内皮细胞内皮素和内皮素转化酶基因的表达；④在离体大鼠主动脉标本上，Ipt0．5～100μmol·L^-1可浓度依赖性地对抗ET-1的缩血管作用，此作用在无钙营养液中明显减弱；⑤在麻醉的SD大鼠上，经肺内动脉注入ET-1可以诱发肺动脉收缩，肺动脉压增高。Ipt0．5和1．0mg·kg^-1可对抗肺动脉内注射ET-1诱发的肺动脉高压，但对正常肺动脉压无明显影响。结论 盐酸埃他卡林可对抗内皮素系统的功能，其特征包括抑制血管内皮细胞内皮素转化酶和内皮素基因的表达，抑制内皮素的释放，对抗高血压状态下血浆内皮素水平的病理性增高，并可对抗内皮素诱发的肺动脉高压。

盐酸埃他卡林对高血压心脏重构的作用

目的 在自发性高血压大鼠 (spontaneouslyhyperten siverat,SHR)和脑卒中易感型自发性高血压大鼠 (stroke pronespontaneouslyhypertensiverat,SHRsp)上 ,评价盐酸埃他卡林 (iptakalimhydrochloride ,Ipt)对高血压心脏重构的实验治疗学作用。方法 SHR于第 12周龄进入实验 ,赖诺普利 (lisinopril,Lis) 12mg·kg-1,Ipt 3mg·kg-1灌胃每天 1次 ,连灌 4wk ;SHRsp于第 11周龄进入实验 ,实验设Ipt0 2 5、1和 4mg·kg-13个剂量组及溶剂对照组 ,灌胃给药每天 1次 ,持续给药 12wk ,观察药物对高血压心脏重构的影响。结果 实验期 4wk内 ,SHR对照组血压和心率进行性增高。Ipt能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,且可抑制SHR心率加快的趋势 ,但对SHR高血压心脏重构无明显作用。相同实验条件下 ,Lis也能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,对心率无明显影响 ;Lis治疗可减轻SHR高血压心脏重构。实验期 12wk内 ,SHRsp溶剂对照组血压持续性进行性增高。Ipt 3个剂量组均能降低SHRsp血压 ,Ipt 4mg·kg-1组在给药后第 4周开始出现心率减低。Ipt 3个剂量组的左心室和室间隔 (LV +S)重量及其与体重的比值[(LV +S) /BW ]低于溶剂对照组。 4组动物之间的右室重量(RV)均无差异。结论 Ipt能有效地控制SHR和SHRsp的血压 。

盐酸埃他卡林选择性降压作用的研究

目的 :在清醒正常血压犬和“两肾一夹”肾性高血压犬 (RHD)上 ,观察不同剂量盐酸埃他卡林(iptakalimhydrochloride,Ipt)的降压作用特征 ;在清醒正常血压的Wistar大鼠和脑卒中易感型自发性高血压大鼠 (stroke pronespontaneouslyhypertensiverat,SHRsp)上 ,采用无创心功能监测方法 ,观察Ipt对心功能和血流动力学的作用特征 ,以判断其降压作用和对心功能及血流动力学的影响是否具有选择性。方法 :给清醒正常血压犬和RHD口服不同剂量的Ipt,用听诊法测量移于皮鞘内的颈总动脉血压 ,用触诊法测量心率 ,同时记录Ⅱ导联心电图。给清醒正常血压大鼠和SHRsp静脉注射相同剂量的Ipt,采用清醒无创心功能血流动力学实验方法 ,观察Ipt对对心功能和血流动力学的影响。结果 :在RHD模型上 ,单次口服Ipt0 .1 2 5、0 .2 5、0 .5、1 .0mg·kg- 1 后 ,产生剂量依赖性的降压作用 ,0 .5h开始起效 ,2～ 3h达效应峰值 ,其最大降低SBP幅度分别为 1 3、2 3、2 5、3 6mmHg,降压作用维持时间分别为 4、6、6、1 2h。在清醒正常血压犬上 ,单次口服Ipt 0 .8,3 .2 ,1 2 .8mg·kg- 1 ,其中剂量为 0 .8和 3 .2mg·kg- 1 时 ,血压和心率均无明显变化 ,剂量增至 1 2 .8mg·kg- 1 时 ,在给药后 5h之内可以显著降低收缩压和舒张压 。

盐酸埃他卡林对动脉平滑肌钾电流的影响

目的 探讨抗高血压新药盐酸埃他卡林对动脉平滑肌细胞钾电流的作用。方法 分离大鼠动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳全细胞记录技术记录细胞钾电流 ,通过浴槽内给药 ,观察盐酸埃他卡林对钾电流的影响。结果 盐酸埃他卡林(0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)均可明显引起正常血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的[(118 6± 15 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(10 3 9±5 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =5 ]、[(132 7± 2 3 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(15 0 1± 2 5 1) % ,P <0 0 1vscontrol,n =7];盐酸埃他卡林 (1、10、10 0 μmol·L-1)均可引起肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的 [(12 1 5± 4 2 ) % ,P <0 0 1vscon trol,n =7]、[(132 2± 6 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8]、[(114 2± 7 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8];盐酸埃他卡林 (10 μmol·L-1)可引起肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度为初始电流强度的 [(80 6± 10 1) % ,n =5 ]。

盐酸埃他卡林对内皮素1诱导的大鼠肺动脉高压的影响

目的 :研究埃他卡林 (iptakalim ,IPT)对内皮素 1(ET 1)诱导的大鼠肺动脉环收缩、肺动脉高压的影响及其机制。方法 :正常SD大鼠肺动脉环建立ET 1的浓度反应曲线 ,研究IPT累积给药的舒张血管效应 ;通过微型导管直接向麻醉大鼠肺动脉注射药物 ,四道生理记录仪记录大鼠肺动脉平均压(mPAP)、平均动脉压 (mAP)和心率 (HR) ;直接向肺动脉注射ET 1,测定注射后 5、10、2 0、30、6 0min的平均肺动脉压 ;观察注射ET 1前或注射后 2min给予IPT对肺动脉压的影响。结果 :在 0 .0 5～5 0nmol·L-1浓度范围内 ,ET 1呈浓度依赖性地引起肺动脉环收缩 ,其EC50 ±L95为 10 .4 8±1.5 2nmol·L-1,b±Sb 为 0 .82± 0 .0 85 ,r =0 .97。在10 -13 ～ 10 -3 nmol·L-1浓度时 ,IPT呈浓度依赖地拮抗ET 1诱导的肺动脉环收缩 ,其IC50 为5 .84nmol·L-1。预先注入IPT(1.0和 0 .5mg·kg-1)可以拮抗ET 1诱导的肺动脉高压 ;预先注入选择性KATP拮抗剂格列本脲 2 0mg·kg-1则可阻断IPT的作用。给予ET 1后 2min经肺动脉注入IPT(1.0mg·kg-1)可阻断ET 1诱导的肺动脉压升高。结论 :IPT可显著拮抗或逆转ET 1诱导的肺动脉高压 ,其机制在于开放KATP通道 ,预先给予IPT的效果优于肺动脉高压形成后给药 ,IPT是一个富有潜力的治疗肺动脉高压的候选药?

盐酸埃他卡林对大鼠主动脉血管环和尾动脉血管条的选择性舒张作用

目的:研究抗高血压新药盐酸埃他卡林对大、小动脉舒张作用的药理学特性。方法:采用大鼠主动脉离体血管环和尾动脉血管条两种组织,对比观察盐酸埃他卡林对大、小动脉舒张作用的药理学特性,并且利用膜片钳技术观察盐酸埃他卡林对大鼠尾动脉平滑肌细胞钾电流的影响。结果:盐酸埃他卡林在1×10-7～1×10-3mol/L范围内对氯化钾预致收缩的大鼠尾动脉血管条产生剂量依赖性舒张反应,而对主动脉离体血管环却无明显的舒张反应,该作用能被ATP敏感性钾通道特异性拮抗剂格列苯脲阻断,并且能显著增强大鼠尾动脉平滑肌细胞的钾电流。结论:盐酸埃他卡林具有选择性舒张小动脉作用,具有ATP敏感性钾通道开放剂的主要药理学特征。

新型抗高血压药物盐酸埃他卡林对小动脉的选择性扩张作用及其药理学机制

目的 :研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(Ipt)对小动脉的作用特性及其药理学机制。方法 :采用大鼠尾动脉螺旋状血管条和主动脉离体血管环两种组织 ,对比观察盐酸埃他卡林对大、小动脉扩张作用的药理学特性 ,并且利用膜片钳技术观察盐酸埃他卡林对大鼠尾动脉平滑肌细胞钾电流的影响。结果 :Ipt在 1 0 - 7～ 1 0 - 3 mol·L- 1范围内对KCl预致收缩的大鼠尾动脉血管条产生剂量依赖性舒张反应 ,且具有部分内皮依赖性 ,但对主动脉离体血管环无明显的舒张反应 ,该作用在高血压状态时显著增强 ,能被ATP敏感性钾通道特异性阻断剂格列苯脲阻断 ,并且对大鼠尾动脉平滑肌细胞的钾电流具有显著增强作用。结论 :盐酸埃他卡林具有选择性舒张小动脉作用 。

盐酸埃他卡林对心肌ATP-敏感性钾通道的作用

目的 在急性分离的豚鼠心室肌细胞上观察盐酸埃他卡林 (iptakalimhydrochloride ,Ipt)对钾电流的影响 ;研究Ipt对 [3 H]格列本脲 (glibenclamide ,Gli)与心肌ATP敏感性钾通道 (ATP sensitivepotassiumchannel,KATP)的硫脲受体(Sulfonylureareceptor,SUR2A)结合特征以及 [3 H]Gli与心肌膜KATP结合和解离动力学过程的影响 ,以评价Ipt对心肌KATP的作用。方法 分离豚鼠心室肌细胞 ,用全细胞记录技术记录细胞钾电流 ,通过浴槽内灌流给药 ,观察盐酸埃他卡林对钾电流的影响。KATP拮抗剂 [3 H]Gli与大鼠心肌膜特异性结合与解离的动力学试验。结果 ①Ipt在浓度为 1和10 0 μmol·L-1时 ,均可明显引起豚鼠心室肌外向钾电流I U曲线上移 ,Ipt作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的 12 4 9%± 9 5 % (n =5 )和 15 1 6 %±11 2 % (n =7) ,与溶媒对照组 (6 9 8%± 3 5 % ,n =7)比较差异均有统计学意义 (P <0 0 1)。在相同条件下 ,KATP开放剂吡那地尔 (pinacidil,Pin)的作用与之相似 ,也可明显引起豚鼠心室肌外向钾电流I U曲线上移 ,显著增强细胞外向钾电流。②非标记Gli与 [3 H]Gli和大鼠心肌膜标本在 2 5℃孵育 6 0min ,可浓度依赖性地抑制 [3 H]Gli与心肌膜SUR2A的特异性结合 ,其IC50 值为 (

盐酸埃他卡林对PD模型大鼠脑内突触体谷氨酸摄取的影响

目的 研究谷氨酸转运体功能改变与帕金森病(Parkinson’sdisease ,PD)发病的相关性 ,探讨新型ATP敏感性钾通道 (ATPsensitivepotassiumchannel,KATP)开放剂盐酸埃他卡林 (Iptakalimhydrochloride ,Ipt)对PD模型大鼠脑内突触体摄取谷氨酸的影响及其机制。方法 采用 6 hydrox ydopamine(6 OHDA)建立PD大鼠模型 ,制备脑组织突触体 ;用同位素标记法测定L [3 H] glutamate摄取活性。 结果 PD模型大鼠纹状体和皮层的谷氨酸转运功能明显降低 ;Ipt(10、5 0和 10 0 μmol·L-1)具有恢复转运功能的作用 ,此作用可被KATP阻断剂Glibenclamide (2 0 μmol·L-1)逆转。结论 谷氨酸转运体功能下降与PD发病密切相关 ;Ipt通过激活KATP发挥促进谷氨酸摄取的作用 。

盐酸埃他卡林对血管内皮细胞分泌功能的影响

目的 :研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(Ipt)对血管内皮细胞分泌功能的影响。方法 :采用灌流消化法分离小牛主动脉内皮细胞 (BAEC) ,观察Ipt对BAEC分泌内皮素 1(ET 1)、前列环素 (PGI2 )和一氧化氮 (NO)的影响 ,同时观察Ipt对培养的BAEC胞浆游离Ca2 + 浓度的影响。结果 :在Ipt浓度为 10 -6mol·L-1及以上时 ,能够剂量依赖性地抑制培养的BAEC合成分泌ET 1,并在Ipt 10 -5mol·L-1及以上时促进NO的合成分泌 ,同时在Ipt浓度为10 -4mol·L-1及以上时 ,显著地增高BAEC胞浆游离Ca2 + 浓度。结论 :Ipt通过抑制内皮细胞合成分泌ET 1和促进NO的合成分泌 ,从而使ET和NO的平衡状态得到改善 ;尚能增加内皮细胞 [Ca2 + ]i,有利于内皮细胞合成NO增加 ,从而增强内皮介导的舒血管效应。

盐酸埃他卡林对小鼠脑组织缺氧的保护作用

目的 :研究盐酸埃他卡林 (Ipt)对脑组织缺氧的保护作用。方法 :小鼠给予Ipt 0 .5 ,2 .0 ,8.0mg·kg-13个剂量 (n =12 ,ig) ,连续给药 3wk ,并设生理盐水组和维生素E组作为对照 ,采用断头制备脑缺氧模型。活性采用化学比色法测定脑组织过氧化脂质(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。外周红细胞膜脂流动性以DPH为荧光探针 ,采用荧光偏振法测定。结果 :Ipt0 .5 ,2 .0 ,8.0mg·kg-13个剂量组延长小鼠断头后喘息持续时间 ,增加外周红细胞膜脂流动性 ,降低微粘度 ,且呈现量效关系。相同条件下 ,Ipt对MDA含量 ,GSH PX活性及SOD活性的影响不明显。结论 :Ipt对脑组织缺氧有显著保护作用 ,其作用可能与其改变血液流变学特性有关。

盐酸埃他卡林的降压作用及对高血压血管重构的影响

目的 在自发性高血压大鼠 (spontaneouslyhypertensiverat,SHR)上 ,评价盐酸埃他卡林 (Iptakalimhydrochlo ride,Ipt)对高血压血管重构的实验治疗学作用。 方法 2 1只 12周龄SHR随机分为 3组 :Ipt3mg/kg治疗组 ,赖诺普利 (lisinopril,Lis) 12mg/kg治疗组和空白对照组。另设同月龄正常血压Wistar大鼠为正常对照组。大鼠igIpt、Lis或蒸馏水 10ml/kg ,每日 1次 ,连续 4周 ,观察药物对高血压血管重构的影响。 结果 实验期 4周内 ,SHR对照组血压和心率持续性进行性增高。其主动脉中层壁显著增厚 ,中层壁厚与内径的比值 (M/L)也显著增大 ;肠系膜动脉的中层壁显著增厚 ,内径显著变小 ,二者的比值显著增大 ,表明高血压时动脉的结构发生了重构。Ipt能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,且可抑制SHR心率加快的趋势 ;Ipt治疗可阻止肠系膜动脉和主动脉的结构重构。相同实验条件下 ,Lis也均能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,对心率无明显影响 ;Lis治疗也可阻止肠系膜动脉和主动脉的结构重构。结论 Ipt能有效地控制SHR的血压 ,可以阻止高血压血管结构重构。

盐酸埃他卡林扩血管特征的研究

目的 观察新型抗高血压药盐酸埃他卡林对大、小动脉扩张作用的药理学特征。方法 采用大鼠主动脉离体血管环和尾动脉螺旋状血管条两种组织来对比分析盐酸埃他卡林的扩血管作用。结果 盐酸埃他卡林在 10 -7～ 10 -3 mol/L范围内对氯化钾预致收缩的大鼠尾动脉血管条产生剂量依赖性舒张反应 ,且具有部分内皮依赖性 ,但对主动脉离体血管环无明显的舒张反应 ,该作用在高血压状态时显著增强 ,能被ATP敏感性钾通道特异性阻断剂格列苯脲阻断。结论 盐酸埃他卡林具有选择性舒张小动脉的作用 ,该作用与其激活ATP敏感性钾通道有关。

盐酸埃他卡林对麻醉正常血压犬血流动力学的影响

目的:评价盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride,Ipt)对麻醉正常血压犬血流动力学的影响。方法:Ipt设置0.125,0.25,0.5mg·kg^(-1)三个剂量组,以吡那地尔(pinacidil,Pin)为阳性对照药,生理氯化钠溶液为阴性对照,观察麻醉正常血压犬血流动力学的变化。结果:Ipt0.125,0.25,0.5mg·kg^(-1)静脉注射可轻度降低血压,平均动脉压(MAP)分别下降0.80,1.07和1.33kPa,收缩压(SBP)与舒张压(DBP)下降幅度基本相当。与Pin相比,Ipt降压起效较慢,但作用平稳。Ipt0.125和0.25mg·kg^(-1)静注在降低血压的同时,对心率、心脏收缩、舒张和泵血功能无明显影响,对心脑血流量也无明显影响;对总外周阻力和心电图均无显著影响,但Ipt0.25和0.5mg·kg^(-1)对心脏泵血功能有轻微抑制作用。Pin加快心率且明显抑制心脏舒张功能。结论:Ipt对戊巴比妥钠麻醉正常血压狗有轻度的降低血压作用,对心脏泵血功能有轻微抑制作用。

盐酸埃他卡林对缺氧性肺动脉高压转化生长因子β1及其受体表达的影响

目的研究新型ATP敏感的钾通道开放剂(KATPCO)盐酸埃他卡林(IPT)对缺氧性肺动脉高压(HPH)肺组织转化生长因子β1(TGFβ1)及其受体表达的影响。方法SD大鼠随机分成IPT处理组1(对正常氧浓度饲养环境中的大鼠给予IPT1.5mg/kg灌胃)、IPT处理组2(对每日缺氧饲养的大鼠给予IPT1.5mg/kg灌胃)和正常对照组及HPH模型组(给予5ml/kg生理盐水灌胃)。测定各组大鼠肺组织TGFβ1及TGFβRⅠmRNA表达和肺血管平滑肌细胞TGFβ1及TGFβRⅠ阳性细胞数。结果HPH大鼠较正常大鼠肺组织TGFβ1转录水平mRNA的表达显著增加,而TGFβRⅠmRNA的表达减少。HPH大鼠肺血管平滑肌细胞TGFβ1蛋白质水平表达亦增加,而TGFβRⅠ阳性细胞数下降。IPT能显著抑制HPH组TGFβ1的表达。IPT显著上调HPH组TGFβRⅠ的表达。IPT处理组1与正常对照组大鼠比较,TGFβ1mRNA及TGFβ1阳性细胞数稍有下降;TGFβRⅠmRNA及TGFβRⅠ阳性细胞数稍有增加,但差异无显著性。结论HPH的增殖因素TGFβ增加。IPT可抑制HPH的这种增殖,可能的途径为TGFβ受体信号系统。

盐酸埃他卡林对脑神经元钠、钾、钙通道的影响

目的 研究盐酸埃他卡林 (Ipt)对脑神经元钠、钾、钙通道的影响。方法 在原代培养的大鼠海马神经元上 ,应用膜片钳全细胞记录技术观察Ipt对钠、钾、钙离子通道电流的影响。结果 Ipt对钠、钙电流幅度以及电流 -电压曲线无影响 ,可增强外向钾电流幅度 ,使电流 -电压曲线上移。其中 ,Ipt 1、10、10 0 μmol·L-1分别使钾通道电流峰值增大为给药前的 (12 1 9± 8 1) %、(114 7± 7 1) %和 (10 9 1±10 0 ) % (P <0 0 1～ 0 0 5 )。给予盐酸埃他卡林 1μmol·L-1的同时给予ATP敏感性钾通道拮抗剂格列本脲 30 μmol·L-1时 ,对钾通道电流无影响。结论 盐酸埃他卡林对脑神经元ATP敏感性钾通道具有激活作用 。

盐酸埃他卡林对动脉平滑肌ATP敏感性钾通道与其开放剂[3H]P1075特异性结合与解离动力学过程的影响

目的 :研究盐酸埃他卡林 (iptakalimhydrochlo ride ,Ipt)对 [3 H]P10 75与血管平滑肌ATP敏感性钾通道 (ATP sensitivepotassiumchannel ,KATP)结合和解离动力学过程的影响。方法 :KATP开放剂 [3 H]P10 75与大鼠去内皮主动脉平滑肌特异性结合与解离的动力学试验。结果 :Ipt预先与主动脉平滑肌孵育后 ,[3 H]10 75的结合速率减慢 ,结合幅度降低 ,平衡结合常数KA 降为对照组的 2 8.3% (P <0 .0 1) ;结合[3 H]P10 75的解离速率增快 ,解离幅度增加 ,平衡解离常数KD 则较对照组增加 3.5 3倍 (P <0 .0 1)。在相同条件下 ,KATP 开放剂吡那地尔 (pinacidil ,Pin)的作用与之相似 ,KA值降为对照组的 35 % (P <0 .0 1) ,KD 值较对照组增加 2 .88倍 (P <0 .0 1)。结论 :Ipt与KATP开放剂Pin的作用相似 ,两者均可变构调节KATP,抑制其与开放剂的结合过程 ,促进其解离过程。

氘标记盐酸埃他卡林的合成及其质谱裂解途径

目的合成盐酸埃他卡林的氘定位标记化合物 ,确证盐酸埃他卡林的质谱裂解途径。方法由 2 ,3 二甲基 2 丁胺与 (N 2 H7)溴代异丙烷缩合而得到氘标记盐酸埃他卡林 ;测定盐酸埃他卡林、(N 2 H7)盐酸埃他卡林及两者混合物的质谱 (EI)。结果利用核磁共振氢谱、质谱、红外光谱和元素分析对目标化合物进行了结构确证。通过对比氘标记和非标记的盐酸埃他卡林的质谱图 ,确定了盐酸埃他卡林的质谱裂解途径。