GC-MS法测定疏风活络丸中伪麻黄碱、麻黄碱、士的宁和马钱子碱的含量

目的:建立疏风活络丸中伪麻黄碱、麻黄碱、士的宁和马钱子碱含量的GC-MS测定方法。方法:采用Variancp-sil 8 CB Low bleed/MS毛细管柱(30m×250μm,0.25μm)分离,升温程序:起始温度50℃,保持1min,以25℃/min升至135℃,保持6min,以30℃/min升至300℃,保持22min。进样口温度为280℃;载气为He,恒流方式,柱流量为1mL/min,不分流进样1μL。MS采用EI离子源,离子源温度230℃;电子能量70 eV,传输管温度300℃,全扫描方式采集定性,质量范围40～450m/z;伪麻黄碱、麻黄碱采用总离子定量,士的宁和马钱子碱采用选择离子定量。结果:4种生物碱达到良好分离。方法平均回收率分别为伪麻黄碱97.82%(RSD2.70%)、麻黄碱98.76%(RSD3.23%)、士的宁98.00%(RSD2.18%)和马钱子碱98.19%(RSD1.89%)(n=6)。结论:所建立的方法可靠,能准确测定疏风活络丸中4种生物碱类的含量。

HPLC法测定小儿肺热咳喘口服液中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱的含量

目的:建立小儿肺热咳喘口服液中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量的HPLC测定法。采用Agilent XDB-C18柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸(3:97),检测波长:210nm。结果:盐酸麻黄碱在0.03068～1.534μg(r=1.0000)范围内成线性关系,平均回收率(n=6)为98.6%,RSD=2.6%。盐酸伪麻黄碱在0.03110～1.555μg(r=1.0000)范围内成线性关系,平均回收率(n=6)为97.8%,RSD=2.4%。结论:本法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。

高效液相色谱测定人体血清中低浓度盐酸伪麻黄碱的含量

目的:建立一种测定人体血清中低浓度盐酸伪麻黄碱含量的高效液相色谱法。方法:取人体血清0.5mL,加入内标苯丙醇胺后,加入混合碱溶液(1000mL 水中含有10g 氢氧化钠和40g 碳酸钠)0.5mL 碱化,乙醚-正己烷(1∶1)振荡萃取,离心,有机相盐酸酸化,水浴中氮气挥干。残渣用100μL流动相溶解,进样。流动相为0.05mol·L^(-1)磷酸二氢钾(含0.005mol·L^(-1)庚烷磺酸钠,用磷酸调pH=2.6)-乙腈(85∶15)。流速:0.8mL·min^(-1)。紫外检测波长:195nm。结果:盐酸伪麻黄碱的线性范围为400-12.5ng·mL^(-1),加权回归r=0.998,最低检测限为8ng·mL^(-1),方法的回收率为60%-80%,日内 RSD 为3.3%-17.5%,日间 RSD 为8.2%-17.8%。结论:本方法灵敏度较文献报道的灵敏度高近10倍,操作简单,专属性和重现性均符合要求,可用于口服低剂量盐酸伪麻黄碱的血药浓度测定和药代动力学研究。

麻黄附子细辛汤抗过敏性鼻炎有效组分的组方研究

目的:研究抗过敏性鼻炎(AR)中药有效组分的新组方,为抗AR现代中药制剂的开发提供参考。方法:以麻黄附子细辛汤中盐酸伪麻黄碱(0~13.5 mg/kg)、附子总碱提取物(0~21.18 mg/kg)和细辛挥发油(0~0.009 2 m L/kg)为组方对象,采用均匀设计法进行分组给药,对AR豚鼠给药前后行为学积分、血清中组胺和免疫球蛋白E(Ig E)的含量进行多元回归分析,以获得最佳组方。分别以辛芩颗粒、氯雷他定片和麻黄附子细辛汤为阳性对照,以AR豚鼠给药前后行为学积分、血清中组胺和Ig E含量对最佳组方的药效进行验证;并通过小鼠急性毒性实验初步观察最佳组方的安全性。结果:最佳组方为盐酸伪麻黄碱11.25 mg/kg、附子总碱提取物21.18 mg/kg、细辛挥发油0.004 5 m L/kg。最佳组方组豚鼠给药前后行为学积分与各阳性药物组比较均无统计学差异(P>0.05),血清中组胺含量较辛芩颗粒组和麻黄附子细辛组显著降低(P<0.05),血清中Ig E含量较辛芩颗粒和氯雷他定片组显著降低(P<0.05)。最佳组方的半数致死量为1 822.04 mg/kg。结论:本研究筛选的最佳组方在减少血清中组胺含量方面较辛芩颗粒和麻黄附子细辛汤效果更佳,在减少血清中Ig E含量方面较氯雷他定片和辛芩颗粒效果更佳,且安全性较好,在一定程度上说明了中药有效成分组方的可行性。

HPLC法测定麝香接骨胶囊中四种生物碱的含量

目的建立HPLC法测定麝香接骨胶囊中伪麻黄碱、麻黄碱、马钱子碱和士的宁的含量。方法色谱柱:SHIMADZU VP-ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol·L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(B)(用10%磷酸调节pH值2.8)(19∶81);检测波长:206 nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:35℃。结果伪麻黄碱在1.51～48.4 ng、麻黄碱在16.09～515 ng、马钱子碱在12.67～405 ng、士的宁在16.29～521.25 ng范围内线性关系良好;平均回收率分别为伪麻黄碱96.87%(RSD为2.21%)、麻黄碱99.12%(RSD为2.69%)、马钱子碱101.66%(RSD为2.85%)、士的宁96.35%(RSD为2.74%),线性范围分别为。结论此方法简便,准确,灵敏,可用于麝香接骨胶囊中麻黄和马钱子的质量控制。

UPLC-MS/MS法同时测定痹痛宁胶囊中4种生物碱

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定痹痛宁胶囊(马钱子粉、全蝎、僵蚕等)中4种生物碱的含量。方法该药物甲醇-水-浓盐酸(50∶50∶1)提取液的分析采用ACQUITY UPLC^■ BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相水(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描模式。结果士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别在0.05066~0.6586 mg/L(r=0.9998)、0.03158~0.4106 mg/L(r=0.9997)、0.009266~0.1483 mg/L(r=0.9999)、0.009620~0.1539 mg/L(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.6%、101.0%、100.2%、100.7%,RSD分别为1.3%、1.6%、1.6%、1.4%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于痹痛宁胶囊的质量控制。

热痹清片中马钱子碱和士的宁在大鼠体内的药动学分析

目的：大鼠灌胃给予热痹清片和制马钱子粉后,计算马钱子碱和士的宁的药动学参数,比较二者在血浆中的药动学特征变化。方法：采用UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中马钱子碱和士的宁的含量。Agela Venusil ASB C18色谱柱（2.1mm×50 mm,3μm）,流动相乙腈-0.15%甲酸溶液（60∶40）,柱温35℃,流速0.1 m L·min-1,进样量5μL。以盐酸克伦特罗为内标,采用ESI＋模式,多反应离子监测（MRM）,定量分析的离子分别为马钱子碱m/z 395.22~243.97,士的宁m/z 335.14~183.96,盐酸克伦特罗m/z 277.11~202.87。样品处理采用液液萃取法。利用DAS 2.1软件计算药动学参数。结果：热痹清片和制马钱子粉中马钱子碱的达峰时间（tmax）分别为（27±11）,（40±12）min,士的宁依次为（30±9）,（42±14）min,马钱子碱的药峰浓度（Cmax）分别为（5.6±1.2）,（4.5±1.7）μg·L-1,士的宁依次为（27.3±10.8）,（15.9±7.0）μg·L-1,马钱子碱的药时曲线下面积（AUC0-t）分别为（922±96）,（710±126）μg·min·L-1,士的宁依次为（3 957±651）,（2 031±256）μg·min·L-1,马钱子碱的清除率/生物利用的（CL/F）分别为（4 596±306）,（87±34）L·min-1·kg-1,士的宁依次为（880±84）,（49±10）L·min-1·kg-1。结论：马钱子碱和士的宁在大鼠体内药动学行为均符合二房室模型。与制马钱子粉比较,热痹清片能显著提高生物利用度,使其有效成分吸收、消除加快。

HPLC法同时测定风湿关节炎片中4种成分的含量

目的：建立同时测定风湿关节炎片中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、马钱子碱、士的宁含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为XTerra-C18,流动相为乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.01 mol/L磷酸二氢钾的等量混合溶液（用磷酸调p H至2.8）（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为206 nm（盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱）、260 nm（马钱子碱和士的宁）,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：盐酸伪麻黄碱、盐酸麻黄碱、马钱子碱和士的宁检测质量浓度线性范围分别为0.916-18.320 0μg/ml（r=0.999 6）、10.034-200.680 0μg/ml（r=0.999 7）、8.693-121.700 0μg/ml（r=0.999 9）、9.696-193.920 0μg/ml（r=0.999 9）;定量限分别为0.03、0.07、0.04、0.03 ng,检测限分别为0.01、0.02、0.01、0.01 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2.0%;加样回收率分别为97.30%-99.79%（RSD=0.96%,n=6）、95.81%-99.36%（RSD=0.38%,n=6）、95.34%-99.93%（RSD=2.00%,n=6）、95.59%-99.80%（RSD=1.76%,n=6）。结论：该方法操作简便、结果准确,可用于同时测定风湿关节炎片中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、马钱子碱、士的宁的含量。

双指标含量测定保证风痛片的安全性

采用高效液相色谱法,对方中麻黄的盐酸麻黄碱和马钱子粉的士的宁进行含量测定。结果表明所选的方法简单准确,专属性强、精密度高、重现性好,可为风痛片的临床安去提供保障。

HPLC法同时测定小儿宣肺止咳颗粒中8种成分含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定小儿宣肺止咳颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、升麻素苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芥子碱硫氰酸盐、甘草酸铵的含量。方法:色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(含0.04%三乙胺和0.02%二丁胺),梯度洗脱;检测波长:254 nm;流速:1.0 ml·min^-1;柱温:30℃;进样量:10μl。结果:盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、升麻素苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芥子碱硫氰酸盐、甘草酸铵检测质量浓度的线性范围分别为6.405~57.64,7.845~70.60,36.96~332.6,78.30~704.7,3.126~28.13,2.844~25.59,3.478~31.30,15.78~142.0μg·ml^-1(r值范围0.9994~0.9999);平均加样回收率分别为98.6%,99.2%,99.0%,99.1%,98.7%,98.9%,98.5%,99.0%(RSD<2.0%,n=6);精密度、重复性、稳定性(48 h)试验的RSD<2.0%(n=6)。结论:该方法简单、有效、结果准确,可用于小儿宣肺止咳颗粒中上述8种成分含量的同时测定。

反相离子对高效液相色谱法测定疏风活络丸中4种生物碱的含量

目的:建立疏风活络丸中伪麻黄碱、麻黄碱、马钱子碱和士的宁的含量测定方法。方法:采用5%氢氧化钠溶液浸润样品后以三氯甲烷于70℃水浴中回流提取,以反相离子对高效液相色谱法测定,采用C18柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,柱温30℃;流动相:A为0.01mol.L-1庚烷磺酸钠与0.01mol.L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用磷酸调pH2.8),B为乙腈,梯度洗脱(0min时,A为81%,B为19%;30min时,A为73%,B为27%);流速1.0mL.min-1,检测波长为206nm。结果:4种生物碱成分色谱行为良好,平均回收率(n=6)分别为伪麻黄碱97.36%(RSD=2.1%),麻黄碱97.22%(RSD=2.5%),马钱子碱98.65%(RSD=1.3%),士的宁97.69%(RSD=1.6%)。结论:所建立的方法简单易行,专属性强,准确性好,可用于疏风活络丸中活性兼毒性生物碱类成分的质量控制。

乳香、没药挥发油促九分散方中生物碱类成分的HaCaT细胞摄取及其机制研究

目的研究九分散中乳香、没药挥发油促进角质形成细胞HaCaT摄取马钱子碱、士的宁及盐酸麻黄碱的作用及其机制。方法采用CCK-8法检测乳香、没药挥发油单用/药对与九分散方中马钱子碱、士的宁、盐酸麻黄碱配伍对HaCaT细胞存活率的影响;采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)定量分析法结合BCA蛋白试剂盒测定在乳香、没药挥发油作用下HaCaT细胞对3种生物碱(马钱子碱、士的宁及盐酸麻黄碱)细胞摄取的影响;以DiBAC4(3)为荧光探针,利用流式细胞仪测定乳香、没药挥发油对HaCaT细胞膜电位的影响。结果不同乳香、没药挥发油均对3种生物碱有一定促透作用,且对脂溶性成分马钱子碱、士的宁的促透效果较水溶性成分盐酸麻黄碱好。乳香、没药挥发油分别作用于DiBAC4(3)标记的HaCaT细胞后,可降低HaCaT细胞膜电位,随着乳香、没药挥发油浓度增加,细胞膜电位荧光强度逐渐增强,具有浓度相关性,表现出类似氮酮的作用方式。结论九分散中乳香、没药挥发油均可促进HaCaT细胞摄取3种生物碱,促进机制可能通过影响皮肤表面负电荷而改变皮肤活性表皮屏障作用,从而有利于药物透过皮肤活性表皮层,其具体机制有待进一步探明。

石斛碱在小鼠体内的组织分布

目的：通过UPLC-MS检测小鼠主要脏器中石斛碱的含量,探讨石斛碱在小鼠体内的分布特征。方法：建立组织样品中石斛碱的分析方法,小鼠灌胃给予石斛碱（剂量60 mg·kg-1）,分别于0,30,60,120 min收集小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑和肠组织,样品处理后采用Q-Exactive型四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统分析,Hypersil Gold C18色谱柱（2.1 mm×150 mm,1.9μm）,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1,可加热电喷雾离子源（HESI）正离子模式检测石斛碱含量,选取盐酸伪麻黄碱为内标。结果：小鼠各组织样品中内源性物质对石斛碱含量测定无干扰,方法学考察符合要求。石斛碱在小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑和肠组织中均有分布,30 min均已达峰值,此时肝脏样本中石斛碱质量浓度最高（1 241.69±78.64）μg·L-1。60 min时各组织样本中石斛碱含量已显著降低,此时空肠组织样本中石斛碱质量浓度最高（166.15±10.80）μg·L-1。120 min时各组织样本中石斛碱含量进一步降低,此时以回肠组织样本中石斛碱质量浓度最高（118.25±8.51）μg·L-1。结论：石斛碱在小鼠体内的组织分布较为广泛,其中肠组织和肝脏中药物浓度较高。在脑组织中的分布情况提示石斛碱能够透过血脑屏障,为阐述其具有神经药理作用提供了实验依据。

正交试验法优选麻桔喘咳口服液的提取工艺

目的:优选麻桔喘咳口服液最佳提取工艺。方法:以出膏率、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱总碱及苦杏仁苷含量为指标,以加水量、提取次数、提取时间为考察因素,应用正交试验法筛选最佳的水提工艺条件。结果:最佳提取工艺为:药材加9倍量水,提取3次,每次1.5 h。结论:该方法可作为麻桔喘咳口服液的提取工艺。