肿瘤细胞外基质及盘状结构域受体1研究进展

肿瘤细胞外基质(ECM)是肿瘤微环境的重要成分,ECM的多样化和复杂的相互作用构成了肿瘤微环境丰富的异质性,在肿瘤的生长、休眠、耐药和复发转移过程发挥了巨大作用。以DDR1为代表的细胞表面ECM受体,与不同ECM成分通过复杂的相互作用调控肿瘤的发生发展,在肿瘤防治和诊疗领域发挥越来越重要的价值。本文以肿瘤ECM和其受体DDR1为中心,探讨了ECM主要成分、调控方式、细胞受体和信号转导在肿瘤发展过程中的作用及其研究进展。

盘状结构域受体1(DDR1):实体肿瘤治疗的新靶点

盘状结构域受体家族(discoidin domain receptors,DDRs)成员DDR1广泛表达于人体正常组织,与肿瘤的发生发展密切相关,基于DDR1本身的结构和生物学特点,围绕DDR1在肿瘤研究的进展展开综述,阐述DDR1对肿瘤细胞的增殖生存、迁移侵袭、上皮间质转化和细胞代谢的影响,以及DDR1对肿瘤微环境的重要作用,同时分析以DDR1为靶点的抗肿瘤药物的研究进展,以期为DDR1作为实体肿瘤治疗的新靶点提供理论依据和临床参考。

盘状结构域受体1在乳腺癌发生、发展及治疗中的作用

盘状结构域受体1(DDR1)通过与其胶原蛋白配体相互作用,参与调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、侵袭及转移。近年来的研究显示,DDR1不仅在乳腺正常发育过程中起重要作用,还与乳腺癌的进展及预后密切相关。文章主要综述了DDR1在乳腺癌发生、发展以及治疗中的作用,以期为乳腺癌靶向治疗提供理论参考。

盘状结构域受体1在七氟烷麻醉诱导老年大鼠认知功能障碍中的作用研究

目的 探究盘状结构域受体1(DDR1)对七氟烷麻醉诱导老年大鼠认知功能障碍的影响及作用机制。方法 选取老年雄性SD大鼠40只随机分为对照组、DDR1抑制剂组、七氟烷麻醉组、DDR1抑制剂处理组,每组各10只。对照组大鼠常规培养,定量吸入空气;DDR1抑制剂组大鼠以DDR1抑制剂5μg侧脑室注射,30 min后定量吸入空气;七氟烷麻醉组大鼠经持续性吸入3%七氟烷6 h构建认知功能障碍模型;DDR1抑制剂处理组大鼠以DDR1抑制剂5μg侧脑室注射,30 min后吸入3%七氟烷6 h。采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠认知功能,酶联免疫吸附试验检测各组大鼠海马组织炎性因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;HE染色观察海马神经元损伤;免疫组织化学和Western blotting检测DDR1蛋白表达水平。结果 与对照组比较,七氟烷麻醉组大鼠逃避潜伏期时间延长,海马神经组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平,神经元损伤评分和DDR1蛋白表达水平均显著升高,目标象限停留时间占比降低,穿越平台次数减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与七氟烷麻醉组比较,DDR1抑制剂处理组大鼠上述指标明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 七氟烷麻醉诱导的老年大鼠认知功能障碍与海马组织DDR1蛋白表达增加相关。

盘状结构域受体1的研究进展

盘状结构域受体1(DDR1)是近年来发现的一利新型受体型蛋白酪氨酸激酶(RTK),能与多种胶原蛋白特异性结合并被激活,活化一系列细胞内外信号传导,参与多种疾病过程,如肿瘤的发生发展、炎性反应和纤维化的发生,进展等。

盘状结构域受体1与基质金属蛋白酶2在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义

目的:检测唾液腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)组织中盘状结构域受体1(discoidin domain receptor 1,DDR1)与基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达,探讨两者在SACC中的表达意义及相关性。方法:应用SP免疫组织化学方法检测54例SACC标本和30例正常唾液腺组织中DDR1与MMP2的表达情况。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:DDR1在SACC中的阳性表达率为87.0%,显著高于正常唾液腺组织(10%,P<0.01)。DDR1的高表达与SACC的神经侵袭、淋巴结转移相关(P<0.05)。MMP2在SACC中的阳性表达率为68.5%,显著高于正常唾液腺组织(13.3%,P<0.01)。经Spearman等级相关分析,DDR1与MMP2呈现显著正相关(r=0.332,P<0.05)。结论:在SACC中,DDR1与MMP2共同高表达,与SACC的发生与发展相关。

盘状结构域受体1对实验性结肠炎小鼠肠道炎症及纤维化的影响

目的探究盘状结构域受体1(discoidin domain receptors,DDR1)在慢性结肠炎小鼠肠道炎症及肠纤维化中的功能。方法针对DDR1基因exon4设计并合成gRNA序列,与编码Cas9的mRNA混合显微注射入C57BL/6小鼠受精卵内,构建DDR1基因突变小鼠。选择F4代基因敲除纯合子小鼠(DDR1^(-/-))和野生型C57BL/6小鼠,通过葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导慢性结肠炎模型。比较两组小鼠疾病活动指数(DAI)、体质量、结肠长度及组织病理学变化。ELISA法检测外周血细胞因子的含量,Western blot法检测小鼠结肠纤维化相关蛋白表达。结果PCR法检测结果显示利用CRISPR/Cas9技术成功构建DDR1^(-/-)小鼠;循环饮用DSS后,与野生型小鼠相比,DDR1^(-/-)小鼠体质量下降减缓,DAI评分及肠组织病理学评分降低,结肠短缩减轻(5.81±0.11 cm vs 5.19±0.05 cm,P<0.05);血清IL-1β、TNF-α及TGF-β水平下调(P<0.01);Masson染色胶原容积评分显示肠纤维化减轻(DSS-WT vs DSS-DDR1,41.43±0.08 cm vs 21.37±0.07 cm,P<0.01);肠组织TGF-β、α-SMA和COL1A1的蛋白表达下降。结论DDR1参与慢性结肠炎的发生,敲除DDR1基因可减轻慢性结肠炎肠道炎症及纤维化的症状和疾病进程。

盘状结构域受体1在实体瘤中作用的研究进展

盘状结构域受体（discoidin domain receptor tyrosine kinases,DDRs）是近20年来发现的一类非整合型胶原受体家族,该家族属于受体型蛋白酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinases,RTKs）,是细胞外基质（extracellular matrix,ECM）和酪氨酸激酶受体这两个大受体家族的交叉点。

盘状结构域受体1过表达慢病毒载体的构建及稳定过表达人胃腺癌BGC823细胞系的建立

目的构建盘状结构域受体1(DDR1)基因的慢病毒载体,建立稳定过表达DDR1的人胃腺癌BGC823细胞系。方法实时荧光定量PCR扩增DDR1目的基因,双酶切目的基因并插入LV5载体,构建LV5-DDR1慢病毒表达载体;随后转入人胚肾细胞293FT中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人胃腺癌BGC823细胞系并通过嘌呤霉素筛选阳性表达细胞;根据转染情况,将细胞分为BGC823组(空白BGC823细胞)、BGC-NC组(转染空载慢病毒LV5的BGC823细胞)、BGC-DDR1组(转染过表达LV5-DDR1的BGC823细胞),分别用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法分析DDR1 m RNA和蛋白的表达。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了LV5-DDR1慢病毒表达载体并进行慢病毒包装。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测结果显示,与BGC-NC组比较,转染LV5-DDR1慢病毒表达载体组的BGC823细胞DDR1表达水平明显升高(P<0.01)。结论成功构建了DDR1慢病毒表达载体及DDR1稳定过表达的BGC823细胞系。

盘状结构域受体1抑制剂对癌症和炎症相关疾病治疗作用的研究进展

盘状结构域受体(DDR)是跨膜受体酪氨酸激酶(RTK)超家族的成员,DDR与RTK的区别在于细胞外结构域中存在盘状蛋白基序,并且可以利用胶原蛋白作为内部配体。目前已鉴定出2种类型的DDR,即DDR1和DDR2,二者具有不同的表达谱和配体特异性。这些DDR在细胞增殖、存活、分化、黏附和基质重塑过程中起着重要作用。DDR与各种癌症、纤维化疾病和动脉粥样硬化等疾病密切相关。DDR1可促进胶原纤维排列,引发免疫排斥。在小鼠模型中,使用DDR1细胞外结构域单克隆抗体、消融DDR1细胞外结构域均可促进肿瘤内T淋巴细胞的渗透,并抑制肿瘤的生长。因此,DDR1被认为是肿瘤新的潜在免疫治疗靶标。本文对DDR1抑制剂对癌症和炎症相关疾病治疗作用的研究进展进行综述。

下调盘状结构域受体1(DDR1)基因抑制4T-1小鼠乳腺癌细胞的迁移

目的通过短发夹RNA(shRNA)下调小鼠盘状结构域受体1(DDR1)基因的表达,并观察DDR1下调后对4T-1小鼠乳腺癌细胞迁移的影响。方法针对鼠的DDR1基因设计并合成2对shRNA干涉序列连入p LKO.1慢病毒表达载体中。测序正确后利用慢病毒包装系统包装表达shRNA的重组病毒,用获得的病毒感染4T-1细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选并建立稳定细胞系。采用实时定量PCR和Western blot法确定DDR1基因的下调效果。利用TranswellTM小室迁移实验观察DDR1下调后的4T-1细胞迁移能力的变化。结果经测序鉴定后,成功构建了慢病毒p LKO-sh DDR1-1、p LKO-sh DDR1-2以及阴性对照慢病毒p LKO-sh NT。用重组病毒感染4T-1细胞,建立稳定细胞系,实时定量PCR和Western blot法结果表明DDR1基因的明显下调。TranswellTM小室实验显示,与感染p LKO-sh NT的对照细胞相比,感染p LKO-sh DDR1-1和p LKO-sh DDR1-2的细胞迁移能力明显降低。结论下调DDR1基因的表达可以抑制4T-1乳腺癌细胞的迁移。

盘状结构域受体1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨人卵巢癌组织中盘状结构域受体1(DDR1)蛋白的表达情况及其临床意义。方法运用免疫组化法检测33例正常卵巢组织、43例卵巢良性肿瘤组织及94例卵巢癌组织中的DDR1蛋白表达情况,比较不同临床病理特征卵巢癌患者的DDR1蛋白阳性表达率,分析DDR1蛋白阳性表达与卵巢癌患者的预后关系。结果卵巢癌组织的DDR1蛋白阳性表达率均高于其他组织(均P<0.05),而正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织间,差异无统计学意义(P>0.05)。国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期者、低分化者、有腹腔转移者的DDR1蛋白表达阳性率分别高于Ⅰ~Ⅱ期者、中-高分化者高、无腹腔转移者(均P<0.05)。DDR1蛋白的阳性表达及腹腔转移是卵巢癌患者死亡的危险因素(均P<0.05)。结论 DDR1蛋白在卵巢癌组织中呈高表达,其可能参与卵巢癌的发生发展与远处转移,或可成为评估卵巢癌患者预后的重要因素。

盘状结构域受体1对高糖诱导血管内皮凋亡的影响

目的初步探究盘状结构域受体1(DDR1)对高糖诱导血管内皮凋亡的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病大鼠模型(12周),血管多普勒超声检测主动脉内皮功能;HE染色观察主动脉内皮结构;Western blot检测凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax、Bcl-2)表达;免疫组织化学和Western blot检测DDR1表达与分布。高糖(33 mmol·L-1)处理HUVECs 48 h,Hoechst染色检测细胞凋亡;转染DDR1 siRNA后检测细胞凋亡情况与凋亡相关蛋白表达。结果糖尿病大鼠主动脉内皮出现严重损伤。Bax、caspase-3和DDR1表达显著升高,Bcl-2表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。高糖处理HUVECs亦可上调Bax、caspase-3和DDR1,下调Bcl-2表达(P<0.05,P<0.01),诱导细胞凋亡。siRNA DDR1可降低高糖诱导的凋亡阳性细胞率增加(P<0.05,P<0.01),下调Bax和caspase-3,上调Bcl-2表达(P<0.05)。结论高糖可通过促进DDR1蛋白表达,诱导血管内皮细胞凋亡,导致血管内皮损伤。

人参皂苷Rh2调控盘状结构域受体1对糖尿病大鼠肾纤维化和细胞凋亡的影响

目的分析人参皂苷Rh2(G-Rh2)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法SPF级,雄性,SD大鼠30只,随机分为对照组(Control组)、DN组以及G-Rh2药物干预组。DN和G-Rh2药物干预组大鼠腹腔注射链脲佐菌素构建DN大鼠模型,Control组大鼠给予等量的柠檬酸缓冲溶液注射。待DN大鼠模型构建成功后,G-Rh2药物干预组给予G-Rh2(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))连续灌胃12周,Control和DN大鼠给予等量的生理盐水灌胃。HE染色和PAS染色观察大鼠肾组织形态,Masson染色观察大鼠肾组织纤维化程度,TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡情况;Western blot检测大鼠肾组织CollagenⅠ、CollagenⅢ、Cleaved-caspase-3、Bcl-2、DDR1表达水平;免疫组化定位检测肾组织DDR1表达情况。结果与Control组相比,DN组肾组织纤维化程度加重,细胞凋亡指数升高(P<0.01),CollagenⅠ、CollagenⅢ、Cleaved-caspase-3、DDR1表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调(P<0.01);与DN组相比,G-Rh2药物干预组肾组织纤维化程度,细胞凋亡指数,CollagenⅠ、CollagenⅢ、Cleavedcaspase-3、DDR1表达均显著降低(P<0.05或P<0.01),Bcl-2表达显著升高(P<0.05)。结论G-Rh2抑制糖DN肾纤维化和细胞凋亡可能与下调DDR1表达有关。

盘状结构域受体1通过诱导上皮间质转化促进胰腺癌细胞迁移和侵袭

目的探讨盘状结构域受体1(DDR1)调控上皮间质转化(EMT)对胰腺癌细胞PANC-1迁移侵袭及细胞外基质降解能力的影响。方法检测人正常胰腺导管上皮细胞H6C7及胰腺癌细胞株(PANC-1、AsPC-1、BxPC-3、SW1990)中的DDR1表达水平。在PANC-1细胞中转染DDR1表达质粒,通过Western blot检测DDR1的蛋白表达,明确其转染效果。细胞划痕实验和Transwell检测DDR1表达水平升高对细胞迁移侵袭的影响。原位明胶酶谱法检测DDR1过表达对细胞外基质降解能力的影响。Western blot检测EMT标记蛋白E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达;qRT-PCR检测转录因子Snail1、Snail2、Twist和Zeb1的表达。结果与对照组比较,胰腺癌细胞株中DDR1基因表达增加(P<0.05)。在PANC-1细胞中过表达DDR1后,其迁移侵袭能力及明胶基质降解能力均增强(P<0.05)。与对照组比较,实验组E-cadherin蛋白表达降低,Vimentin和α-SMA蛋白表达升高,转录因子Snail2和Twist基因表达升高(均P<0.05)。但2组的Snail1和Zeb1基因表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论DDR1在胰腺癌细胞中高表达,可能通过上调Snail2和Twist的基因表达诱导EMT,促进PANC-1细胞迁移侵袭。

盘状结构域受体1在消化系统肿瘤中的表达及其意义

盘状结构域受体1(DDR1)作为一种受体酪氨酸激酶(RTKs)在诸多肿瘤中表达异常,参与肿瘤的生长、浸润、转移等过程,有望成为肿瘤治疗的潜在目标。本文就DDR1在消化系统肿瘤中的表达及其意义作一综述。

盘状蛋白结构域受体1在调控恶性肿瘤进展和治疗中的作用

盘状蛋白结构域受体1 (DDR1)是特殊类型的跨膜受体酪氨酸激酶,在口腔鳞状细胞癌等多种肿瘤中异常表达,并能调控肿瘤进展相关的分子通路。DDR1可参与多种生物学过程,如细胞增殖、分化、迁移、侵袭、休眠和凋亡,还与肿瘤的上皮间充质转化、免疫排斥、代谢重编程和化疗药物耐药密切相关。部分DDR1抑制剂已在临床研究中显示出抗癌功效。本文回顾了DDR1在肿瘤进展中和DDR1抑制剂在肿瘤治疗中的作用,以期为恶性肿瘤的靶向治疗提供新思路。

盘状结构域受体1促进微管相关蛋白Tau磷酸化在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用

目的研究盘状结构域受体1（discoidin domain receptor 1，DDR1）调控微管相关蛋白Tau（简称Tau蛋白）表达及其磷酸化在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）中的作用及其机制。 方法将64只7日龄无特定病原体级雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组）、HIBD组、生理盐水（normal saline，NS）治疗组（HIBD＋NS组）及DDR1抑制剂（DDR1 inhibitor，DI）治疗组（HIBD＋DI组），每组16只。通过结扎左侧颈动脉后置于低氧箱内2 h，复制新生大鼠HIBD模型。HIBD＋DI组造模后，立即给予DDR1抑制剂侧脑室注射治疗。造模后48 h收集左侧皮层组织，HE染色观察大脑皮层的组织病理学改变；蛋白质印迹法检测皮层组织中DDR1及Tau蛋白的磷酸化水平；酶联免疫吸附试剂盒法检测乙酰胆碱含量。用方差分析和t检验对数据进行统计学分析。 结果（1）皮层损伤情况：与Sham组相比，HIBD组异常神经元所占比例明显增多[（80.28±4.51）%与（10.40±2.17）%，t=39.491，P〈0.01]。HIBD＋DI组动物大脑皮质区核固缩及坏死细胞比例较和HIBD＋NS组显著降低[（31.91±3.05）%和（82.01±7.20）%，t=18.123，P〈0.01）]。（2）DDR1和Tau蛋白磷酸化水平比较：DDR1磷酸化水平方面，HIBD组高于Sham组（0.922±0.199与0.095±0.023，t=10.379，P〈0.01），HIBD＋NS组高于HIBD＋DI组（1.200±0.171与0.255±0.111，t=11.901，P〈0.01）。Tau磷酸化方面也显示相似的趋势（HIBD组和Sham组分别为，0.194±0.224与0.919±0.228，t=7.347；HIBD＋DI组和HIBD＋NS组分别为1.100±0.167与0.291±0.210，t=9.447，P值均〈0.01）。（3）乙酰胆碱含量：HIBD组低于Sham组[（3.685±0.472）与（7.429±0.861）ng/g蛋白，t=10.781，P〈0.01]。而HIBD＋DI组高于HIBD＋NS组[（7.058±0.915）与（2.521±0.723）ng/g蛋白，t=10.989，P〈0.01]。 结论DDR1激活引起HIBD新生大鼠皮层组织中Tau过度磷酸化，进而导致神经递质乙酰胆碱释放减少。抑制DDR1活化能够降低HIBD新生鼠皮层组织中Tau的磷酸化水平，增加乙酰胆碱的释放。DDR1抑制剂对HIBD新生鼠脑损伤具有保护作用。

盘状结构域受体1与脑肿瘤研究进展

盘状结构域受体l（discoidin domain receptor1,DDR1）是一种跨膜的酪氨酸激酶受体，其特异性配体为胶原蛋白，活化过程不同于经典的RTK,激活后参与细胞内外信号传导，促进肿瘤细胞的黏附与迁移，与肿瘤的增值、侵袭、转移密切相关。研究表明脑肿瘤中DDR1呈高表达，在胶质瘤及垂体腺瘤中均可通过上调基质金属蛋白酶（MMPs）的表达，降解细胞外基质，从而增强肿瘤的侵袭性。

盘状结构域受体酪氨酸激酶1与炎症关系的研究进展

盘状结构域受体酪氨酸激酶1(DDR1)是新发现的一种受体酪氨酸激酶,可以与其配体——胶原蛋白特异性结合,而这种结合可导致位于胞内区的酪氨酸激酶缓慢而持续的磷酸化,这种磷酸化可参与细胞的增殖、分化、黏附、迁移以及炎症信号通路的活化,进而导致多种病理学的改变,如纤维化和恶性肿瘤的发生、发展。同时,DDR1还可参与多个脏器的炎症反应,如肝炎、肾炎、中枢神经系统炎症等。未来,需进一步研究DDR1是否参与其他脏器的炎症反应,力求全面反映DDR1在炎症中所发挥的作用。