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文昌鱼头部cDNA文库的构建 被引量:3
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作者 方永强 申庆祥 +1 位作者 翁幼竹 沈卫英 《台湾海峡》 CAS CSCD 2003年第2期131-135,共5页
采用cDNA合成技术制备文昌鱼头部cDNA基因文库 .以mRNA为模板 ,用NotIprimer Adaptor为引物 ,在反转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA .含有EcoRI和NotI粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶作用下与λgt1 1EcoRI/NotI臂相... 采用cDNA合成技术制备文昌鱼头部cDNA基因文库 .以mRNA为模板 ,用NotIprimer Adaptor为引物 ,在反转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA .含有EcoRI和NotI粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶作用下与λgt1 1EcoRI/NotI臂相连 ,包装蛋白包装 ,得到噬菌体颗粒 ,即原始的文昌鱼头部cD NA文库 .经X Gal/IPTG板测定 ,该文库滴度为 7.8× 1 0 5 pfu/cm3 ,重组率为 70 % . 展开更多
关键词 文昌鱼 cDNA合成技术 cDNA基因文库 反转录酶 分子生物学 目的基因筛选
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