抗结核分枝杆菌特异抗原单克隆抗体的制备和特异荧光染色检测技术的研究

目的对结核分枝杆菌的蛋白抗原进行初步分析，制备抗结核分枝杆菌的特异单克隆抗体，探讨特异性免疫荧光法在痰标本结核分枝杆菌检查上应用的可行性。方法采用丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹技术对结核分枝杆菌的蛋白抗原进行初步分析，确定特异、免疫原性强的蛋白抗原，制备抗特异蛋白抗原的高效价单克隆抗体，采用饱和硫酸铵粗提，Sephadex G-50层析纯化；同时制备高效价的抗结核分枝杆菌免疫血清。用异硫氰酸荧光素（FITC）标记，初步应用于临床痰涂片的检测。结果获得4株针对结核分枝杆菌38×10^3蛋白抗原的单克隆抗体，ELISA检测小鼠腹水单克隆抗体效价达到1：6400～1：12800。建立了直接荧光抗体染色方法，60份临床疑似肺结核病人痰标本，用抗酸染色法、结核分枝杆菌免疫血清和单克隆抗体免疫荧光法三种方法检测，阳性率分别为：36．7％（22／60）、58．3％（35／60）和56．7％（34／60），其中，抗酸染色阳性22份标本，两种免疫荧光法检查均为阳性，符合率100％。结论成功制备出抗结核分枝杆菌38×10^3蛋白的单克隆抗体。免疫荧光法检查痰标本结核分枝杆菌阳性率大大高于抗酸染色，具有良好的应用前景。

非典型呼吸道病原体的实验室检测方法

非典型呼吸道病原体感染早期临床表现主要为全身乏力、食欲下降,继而出现明显呼吸道症状,剧烈咳嗽,干咳或血痰,肌肉关节酸痛等症状,体格检查通常无异常,胸部X线条索或点片状阴影,白细胞大多正常或偏低.非典型呼吸道病原体检测大部分依靠实验室检查,检测的方法多种多样,主要的方法有：血清学和直接检测法,细菌的分离培养和病毒的组织细胞培养法,间接、直接免疫荧光抗体法,酶免疫测定法,核酸扩增法.

门诊就诊妇女生殖器沙眼衣原体感染检测

本文以直接免疫荧光抗体法（DFA）检测150例门诊就诊妇女的生殖道沙眼衣原体感染，总检出率为8％。从113例慢性宫颈炎患者中检出阳性10例（8．85％），3例死胎者中检出阳性1例（33．33％），34例生殖道正常者中检出阳性1例（2．94％）。沙眼衣原体的感染在不同年龄组的差别有显著性（P＜0．05）。与不同职业和族别的差别无显著性（P均＞0．05）。感染沙眼衣原体的慢性宫颈炎局部所见主要表现为阴道有粘液性分泌物、宫颈红肿糜烂。因此，对妇女宫颈局部进行沙眼衣原体检测，有利于妇女健康并对防止新生儿沙眼衣原体感染有重要意义。