直接核酸测序法进行血友病A携带者及产前诊断

目的:对一血友病A(HA)家系进行携带者及产前诊断。方法:用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)和血浆因子Ⅷ促凝活性(FⅧ:C)测定进行表型诊断;用FⅧ内含子22倒位直接检测以及FⅧ基因内外4个位点的多态性进行遗传连锁分析;用核酸直接测序法对FⅧ各外显子及其侧翼序列进行检测。结果:表型检测证明先证者为重型HA,其妹妹FⅧ:C正常;FⅧ内含子22倒位直接检测及FⅧ基因内外4个位点的多态性遗传连锁分析均未获得有诊断意义的信息;直接核酸测序证实先证者及其妹妹FⅧ基因24号外显子第2209位氨基酸存在Arg→Gln(CGA→CAA)错义突变,酶切结果与此一致,其妹为携带者,后者胎儿羊水细胞DNA检测为正常男性。结论:FⅧ基因24号外显子错义突变Arg2209Gln(CGA→CAA)是该HA先证者发病的分子机制。此突变位点为国内首次报道,且该家系为国内首例运用直接核酸测序法进行HA携带者及产前诊断的家系。