三种Dot-ELISA法检测Bt杀虫蛋白的研究

运用3种Dot—ELISA法对提纯的Bt杀虫蛋白进行检测，结果表明：直接法Dot—ELISA的最低可检测值为4．06～8．13ng，夹心法Dot—ELISA的最低可检测值为8．13ng，间接法Dot—ELISA（AKP—IgG）的最低可检测值为2．03ng，间接法Dot—ELISA（HRP—IgG）的最低可检测值为2．03～4．06ng。三者相比，以间接法Dot—ELISA的效果较好。

固相抗体直接竞争ELISA法测定氯黄隆在土壤中的残留动态

采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析的要求。在本实验条件下 ,氯黄隆在土壤中的半衰期为 2 2～ 2 6 d,6 0 d降解 80 %以上。麦茬大田连续两年使用氯黄隆2 2 .5g/ hm2 、4 5g/ hm2 ,第一年麦收时中性沙质土壤和弱碱性沙壤土中氯黄隆的残留量分别为0 .2 4、0 .56 ng/ g和 0 .30、0 .96 ng/ g,第二年分别为 0 .2 8、0 .6 7ng/ g和 0 .38、1.0 9ng/ g,与平行进行的高效液相色谱法、生物测定法测定结果基本一致。

S-CLPT和Dot-ELISA法检测旋毛虫病抗体的研究

目的 探索检测旋毛虫病抗体的简便易行方法。方法 采用玻片法环蚴沉淀试验(S-CLPT)和斑点-ELISA(Dot-ELISA)法检测感染旋毛虫病豚鼠血清。结果 二种方法阳性率分别为97.5％和100％。用此二种血清学方法检测正常豚鼠、血吸虫病兔、蛔虫病人和鞭虫病人血清,除1例蛔虫病人血清Dot-ELISA法出现阳性反应外,其它血清二种方法均为阴性反应。结论 二种方法对旋毛虫病特异性抗体的检测均有较好的敏感性和特异性。

吖啶酯直接化学发光法和ELISA定量检测CCP抗体作用分析

目的分析对CCP抗体采用吖啶酯直接化学发光法和ELISA定量检测的临床作用。方法方便选择2017年1月—2018年1月来该院检验科进行CCP抗检测的272例患者,所有患者均采用吖啶酯直接化学发光法与ELISA定量检测,对各组检测结果进行分析比较。结果采用吖啶酯直接化学发光法的CCP抗体诊断中,特异性为96.69%,敏感性为69.49%,阳性预测值与阴性预测值为87.13%、91.91%。采用ELISA定量检测法的CCP抗体诊断中,特异性为97.06%,敏感性为68.01%,阳性预测值与阴性预测值为92.28%、86.03%;在类风湿性关节炎患者中,活动期CCP抗体含量(141.11±93.96)IU/m L,非活动期CCP抗体含量(45.15±10.56)IU/m L,由此可见类风湿性关节炎活动期CCP抗体含量明显高于非活动期(t=8.369,P=0.000);采用吖啶酯直接化学发光法与ELISA检测的CCP抗体,阴性符合率为100.00%,阳性符合率为94.44%,总符合率为98.53%。结论针对CCP抗体,吖啶酯直接化学发光法与ELISA定量检测具有良好的符合率,吖啶酯直接化学发光法适合在仪器自动化中应用,易标准化,操作简单,与临床要求相符合。CCP抗体作为类风湿性关节炎诊断的一种新血清学标志物,对类风湿性关节炎病情监测有利。

单克隆抗体直接ELISA法检测家蚕微孢子虫

本文报道的是将辣根过氧化物酶(HRP)直接标记于单克隆抗体上进行直接ELISA法检测家蚕微孢子虫,实验结果表明:直接ELISA法比间接ELISA法检测家蚕微孢子虫其灵敏度和特异性二者差异不大,但直接ELISA法操作简单,是实用性较强的一种检测家蚕微孢子虫的方法。

直接ELISA法与间接ELISA法检测HIV抗体的对比分析

目的合理选择检测试剂,建立一种准确的ELISA检测方法。方法直接ELISA法和间接ELISA法对不同血液标本分别进行HIV抗体的检测,并对结果进行比较分析。结果间接ELISA法检测后会出现不同例数的假阳性结果,而直接ELISA法未出现假阳性结果。结论直接ELISA法检测结果假阳性率低,作为新一代试剂,可逐步取代间接ELISA法。

直接ELISA法和间接ELISA法在抗-HIV检测中的比较

目的从检测抗-HIVELISA法中的直接法和间接法中找到一种可靠的检测献血者标本的方法。方法用卫生部临检中心的质控血清和抗-HIV确认的阳性标本,用不同厂家的试剂做抗-HIV直接ELISA法和间接ELISA法的比较。结果23份阳性材料中,用间接法检测结果:新创22份,阴性1份,科华23份均为阳性,用直接法检测23份均为阳性,HIV确认阳性标本两种方法均为阳性。528份标本检测均为阴性,质控血清2NCU/ml间接法新创阴性1份,阳性0份,科华阳性0份,阴性1份,直接法新创和阿克苏为阳性1份,阴性1份,确认法均为阴性。血清4NCU/ml新创阳性1份,阴性0份,科华阳性1份,阴性0份,阿克苏阳性1份,阴性0份,确认法均为阴性。结论检测抗-HIVELISA直接法的灵敏度比间接法高,特异性比间接法好,是一种可行的筛选献血者方法。

Dot—ELISA法临床诊断包虫病的探讨

自70年代初建立了ELISA法以来,我国已在医学研究和临床实验室开展了此项工作,应用该法诊断包虫病就是一实例。包虫病是我国西北地区常见、多发的地方病,常因诊断困难而不能使疾病得到早期诊断、早期治疗,探究一种简单、

三抗体间接法Dot—ELISA检测牛副结核病IgG_1抗体的研究

本试验建立了检测副结核病牛血清中特异性抗体的一种新的免疫学诊断方法——三抗体间接法斑点酶联免疫吸附试验(Dot一ELISA)。并与粪便培养法,常规 ELISA,补体结合反应(CFT)及二抗体间接法 Dot一ELISA 进行了比较,试验结果表明,三抗体间接法Dot——ELISA 比常规 ELISA、CFT 和二抗体间接法 Dot——ELISA 显著敏感,而且快速、简易、经济,适用于大规模的现场检疫。

3种ELISA法定量检测转cry1Ac基因水稻Cry1Ac蛋白的比较研究

用从细菌中分离的纯品CryIAe蛋白作为抗原成功制备出了效价较高的CryIAe蛋白的兔多抗,对制备的抗体的免疫学分析表明,其与CryIAc有极显著的免疫交叉反应.并在对转cryIAc基因水稻的检测中具有良好的特异性。用戊二醛一步法对纯化的IgG进行了碱性磷酸酶标记。应用制备的抗体进行了直接法、间接法和双抗夹心法等ELISA方法检测转cryIAc基因水稻中Bt的含量,结果表明直接法和间接法ELISA只能定性而不能定量测定转cryIAc基因水稻,而双抗夹心法是一种比较理想的定量检测水稻中Bt含量的方法。同时确定了双抗夹心法的各项具体条件。

3种ELISA法检测Bt杀虫蛋白的比较研究

运用3种ELISA法对提纯的Bt杀虫蛋白进行检测,结果表明:直接法ELISA和夹心法ELISA的灵敏度相同,都为0.94 ng/孔,但直接法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈极显著的线性关系,夹心法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈显著的线性关系;间接法ELISA的灵敏度较前两者低,使用HRP-IgG的灵敏度为15 ng/孔,Bt蛋白量与OD值间呈显著的线性关系,使用AKP-IgG的灵敏度为3.75ng/孔,Bt蛋白量与OD值间呈极显著的线性关系。

鲀毒鱼类中河鲀毒素直接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定方法的研究

为检测毒鱼类中的河毒素 ,建立了用抗河毒素单克隆抗体检测河样品中河毒素的直接竞争抑制性酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法。结果表明 ,直接ELISA法较间接ELISA法灵敏 ,最低检出浓度为 0 1ng mL(每检测孔 0 0 1ng) ,线性范围为 5～ 5 0 0ng mL ,方法的加标回收率为73 0 %～ 118 0 %。本法与传统的小鼠生物试验相比 ,两种方法的测定结果之间在统计学上差异无显著性 (配对t检验 ,P >0 1) ,并具有良好的相关性 (r =0 94 4)。对来自江苏省东海和长江水域的河样品的毒力进行了测定 ,结果表明本方法简单、快速、灵敏 。

检测Ⅳ型胶原蛋白直接双抗夹心法的建立与评价

目的 :建立血清 型胶原蛋白 (COL - )浓度测定的直接双抗夹心法 ,为临床诊断肝纤维化提供一种新的指标。方法 :采用本科室自制的 COL - 单克隆酶标抗体、多克隆抗体建立的直接双抗夹心法 ,同时采用日本试剂盒测定 6 0份正常和肝脏病人血清 COL- 浓度做对照比较。结果 :两种方法无显著性差异 (P>0 .0 5 ,t=0 .16 6 ) ;两法相关分析 ,γ=0 .834,回归方程为 Y=0 .5 9X+ 70 .874。结论 :直接双抗夹心法测定血清 COL- 操作简便、特异、准确 ,可作为辅助诊断肝纤维化的可靠指标 。

间接ELISA法研究高效猪瘟细胞苗免疫效果

猪瘟作为中国最主要的猪病之一，在中国导致的经济损失难以统计，专家估计猪瘟导致中国猪的平均发病死亡率在2％～5％，据此推算的直接经济损失每年就超过20亿元人民币。高效猪瘟疫苗免疫措施成为当前有效防控猪瘟的重要手段。

Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原的现场应用

我们于1990一1991年在潜江市现场查治病工作中,应用单克隆抗体斑点酶联免疫试验检测血吸虫循环抗原,并以粪检作对照.现将结果报告如下.材料与方法1 单克隆抗体试剂盒 由中国预防医学科学院寄生虫病研究所提供.2 试验血清 采自潜江市5个村,共409份;10例急性血吸虫病人经治疗1个月后采血复查,2个月后复查8例.

3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的结果比较

目的比较生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法及ELISA 3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的优缺点。方法采集受检者粪便标本278份.分别采用3种方法进行阿米巴原虫感染检测,检测结果进行统计学处理,分析3种方法的阳性检出率、准确率、敏感性、特异性及费用。结果生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法和ELISA法的阳性率分别为9.71%、10.79%和12.23%,差异无统计学意义(P>0.05);阳性标本经PCR确证,3种方法的阳性符合率分别为48.71%、51.11%和77.36%,差异有统计学意义(P<0.05)。生理盐水直接涂片法费用低(1元/份),耗时少(0.1 h～0.2 h)。结论粪便溶组织内阿米巴检测推荐使用ELISA法,其次是醛醚沉淀法,如果用生理盐水涂片法,至少要重复检测3次。

疫木中松材线虫的免疫学检测方法的研究

以松材线虫的粉碎虫体免疫家兔制备抗血清 ,通过免疫印迹考察抗血清的特异性。利用固相松材线虫抗原和游离线虫抗原同线虫抗体相竞争 ,建立竞争型ELISA法用于疫木中松材线虫的分析。该方法可以直接检测出 10mg的木屑中 0 1μg微量的线虫蛋白 ,约 7条线虫的存在。利用该方法对 2 0个不同地区、树种及类型的松材样品进行检测 ,疫木中松材线虫的检出率为 10 0 % ,但拟松材线虫也呈现了一定的交叉反应。研究结果表明 ,以松材线虫抗原蛋白为指标的免疫学检测方法简便快速、灵敏度高 。

斑点金免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgG的研究

目的 为寻求一种简便、快速、可靠的方法 ,用于诊断斯氏狸殖吸虫病。方法 以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为包被抗原 ,胶体金标记羊抗人 Ig G为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G的斑点金免疫渗滤法 ( DIGFA) ,并以 dot-ELISA作平行对照。结果 DIGFA和 dot-ELISA分别检测 91例斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G抗体 ,其阳性率分别为 96.7% ( 88/ 91 )和 92 .3 % ( 84/ 91 ) ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测健康者血清 3 5例、日本血吸虫病患者血清 2 5例和华支睾吸虫病患者血清 2 2例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4.0 % ( 1 / 2 5 )和 4.5 % ( 1 / 2 2 ) ;DIGFA和 dot-ELISA两法的总符合率达 91 .7% ( 4 4/ 4 8)。结论 DIGFA的敏感性和特异性与 dot-ELISA相近 ,但方法简便、快速 ,是一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G抗体的较好的免疫诊断方法。

定性粪检寄生虫的几种方法

定性检查就是对研究对象进行＂本质＂方面的检查,即确定是什么,而不注重量的多少。很多方法可以诊断出动物患何种或哪些寄生虫病。

加拿大销售分析金矿矿脉用的ELISA药盒

美国曾提出一项研究报告,指出,“在金矿矿脉上繁殖的蜡状芽孢杆菌(Bacillus Cereus)密度比普通土壤上高。”根据此发现,开发了使用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂检测蜡状芽孢杆菌的土壤分析药盒,在大洋洲各国销售。开发它的是加拿大Genprobe Technologies公司(GTL)。该公司为促进客户购买这种药盒,采用直接邮寄的办法发送给世界2500处矿山公司。GIL公司还计划不限于营业用途,而向“梦想一下子发大财”的一般消费者作为礼品出售,但是,这就使最初作报告的研究者感到困惑。首次报告日语中发音相同的黄金和菌这两种不同物质的联系的。