磷酸化修饰对P53直接线粒体转移的影响以及在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用

磷酸化修饰,用于P53直接线粒体评价,对其转移的影响和对卵巢癌凋亡(顺铂诱导)的作用。方法 以卵巢癌细胞为例,顺铂(10μmol/L)处理,时间:24h,染色:Hoechst染色法,观察顺铂敏感细胞(OV2008、A2780s)、顺铂耐药细胞(C13'、A2780cp)凋亡率差异。结果 卵巢癌细胞凋亡率:OV2008>C13',A2780s>A2780cp(P<0.05);顺铂处理24h后,在OV2008、A2780s的线粒体,见P53、Smac的蛋白水平分别呈现增高、降低现象,而Smac蛋白水平(存在胞浆)呈现上升情况。但是在C13'、A2780cp内无明显变化(P<0.05);顺铂处理24h后,出现线粒体转磷酸化的是Ov2008、A2780s,而C13'、A2780cp无变化(P<0.05)。结论 ?顺铂会诱导p53卵巢癌细胞凋亡,磷酸化修饰会影响p53活性,提高敏感细胞凋亡率。

线粒体直接PCR扩增法

为建立一种不需提取线粒体DNA而直接用线粒体进行聚合酶链反应 (PCR)的方法 ,将得到的线粒体用高温加热 ,使线粒体膜破裂 ,释放DNA后 ,直接用于PCR扩增。结果 :扩增产物与提纯的线粒体DNA扩增得到的产物一样丰富。提示