直接免疫荧光法和间接免疫荧光法检测患儿下呼吸道感染病原体方法的比较

目的比较在下呼吸道感染患儿病原体检测中,直接免疫荧光法(DFA)和间接免疫荧光法(IFA)的检测结果及影响因素。方法选取2022年1—5月该院住院部下呼吸道感染患儿103例为研究对象,分别采集两份鼻咽拭子和2 mL静脉血,用DFA检测病毒抗原和IFA检测血清中病原体IgM抗体,同时用荧光PCR法进行复检。比较两种方法的灵敏度、特异度及一致性,分析患儿年龄、性别、发病天数、是否用药对检测结果的影响。结果DFA和IFA两种方法检测的灵敏度分别为60.71%和12.50%,特异度分别为100.00%和48.94%,差异有统计学意义(P<0.001)。流感病毒(IFV)B、腺病毒(ADV)两种方法的检测结果具有一致性,但一致性程度差;IFVA、呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒(PIV)两种方法的检测结果不具有一致性。患儿发病天数、性别、是否用药的检测阳性率经比较,差异无统计学意义(P>0.05)。≤1岁和2~3岁患儿的检测阳性率均高于4~5岁、6~7岁和≥8岁患儿,RSV和ADV为主要病原体,且各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在下呼吸道感染患儿中,3岁以下的儿童呼吸道病毒感染率最高,以RSV和ADV为主。DFA和IFA检测结果差异显著,DFA的检测灵敏度和特异度均高于IFA。因此DFA更利于明确患儿下呼吸道感染病原体种类。

直接免疫荧光Fibrin线性阳性的扁平苔藓样类天疱疮1例

扁平苔藓样类天疱疮是一种自身免疫性表皮下疱性疾病,仅累计口腔黏膜病损的病例较为少见,病程漫长,且反复迁延。本文报道了1例直接免疫荧光纤维蛋白Fibrin线性阳性的扁平苔藓样类天疱疮的诊疗过程。

直接免疫荧光法对多种呼吸道病毒检测的临床意义

目的为临床提供一种快速诊断呼吸道病毒感染的方法。方法采用直接荧光免疫法检测呼吸道分泌物的合胞病毒、腺病毒、流感病毒A、流感病毒B及副流感病毒1、2、3型。结果对195例呼吸道感染者的鼻咽分泌物标本采用直接荧光免疫法进行病毒原检测,结果显示本地区病毒感染率为57.94%,病毒原以呼吸道合胞病毒为主,副流感病毒1、3型次之,感染以冬季好发。结论该法具有快速、简便、特异性高等优点,对确定临床呼吸道病毒感染是一种非常好的方法。直接荧光免疫法操作简便,费用较低,适合基层医院推广使用。

直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用

目的采用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原,为临床呼吸道病毒感染的早期诊断提供病原学依据。方法选择呼吸道感染患者762例,采集鼻咽深部分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒A型(InfA)、流感病毒B型(InfB)以及副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)7种呼吸道常见病毒抗原。结果在762例呼吸道感染患者(儿童724例、成人38例)中,呼吸道病毒抗原阳性者264例(儿童261例、成人3例),阳性检出率为34.65%;其中RSV 186例(70.45%)、PIV3 29例(10.98%)、InfA 20例(7.58%)、ADV 13例(4.92%)、PIV1 4例(1.52%)、PIV2 2例(0.76%)、InfB 2例(0.76%)、混合型8例(3.03%)。结论直接免疫荧光法病毒抗原测定可以用于呼吸道病毒感染的早期诊断。

高致病性猪蓝耳病直接免疫荧光诊断方法的建立及其应用

以临床"高热综合征"病例中分离的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR变异株接种试验猪制备抗血清,采用硫酸铵盐析法提取血清中免疫球蛋白(IgG),并用异硫氰酸荧光素(FITC)对IgG进行荧光标记,建立了一种直接免疫荧光诊断方法(FA),用于检测病毒感染单层细胞及动物脏器组织切片中PRRSV抗原。本试验对PRRSV感染MARC-145细胞增殖动力学检测结果表明,接种后16h可检测到抗原阳性细胞,接种后60h～72h达到病毒增殖高峰;对病毒人工感染猪脏器组织抗原分布检测结果显示,腹股沟淋巴结、空肠、睾丸、脾脏、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结和扁桃体抗原阳性检测率较高;对临床10个猪场送检的38份病料平均阳性检出率为63.2%(24/38)。该方法具有特异性强、敏感性和重复性好等特点,与RT-PCR检测结果符合率为96.3%,对几种已知猪病毒抗原无交叉反应,标记的荧光抗体于4℃保存6个月稳定。IFA为PRRS的临床诊断提供了一种快速、便捷、敏感、特异的检测方法。

直接免疫荧光法检测儿童呼吸道病毒抗原的结果分析

目的 评价直接免疫荧光法对儿童呼吸道病毒抗原的诊断价值,并探讨儿童呼吸道病毒的流行特征。方法 用直接免疫荧光法检测6 282例住院儿童呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒（RSV）,流感病毒A型（FLUA）,流感病毒B（FLUB）,副流感病毒1型（PIV1）,副流感病毒2型（PIV2）,副流感病毒3型（PIV3）和腺病毒（ADV）7种呼吸道病毒。结果 6 282例标本中病毒阳性检出835例,总阳性率13.29%;其中RSV最高,阳性率8.83%;其次是PIV3,阳性率2.80%;冬季发病较高,夏季最少。0~6个月的幼儿发病率较高。结论 直接免疫荧光法简单、快速,可用于儿童呼吸道病毒感染的早期诊断。

直接免疫荧光法检测阴道毛滴虫

目的 研究多克隆抗体直接免疫荧光法(direct immunofluorescence assay,DFA)检测阴道毛滴虫的最佳反应条件及临床应用意义。方法 确诊为阴道炎的患者取阴道分泌物,经培养收集虫体,稀释成悬液,制作抗原片。取阴道毛滴虫免疫山羊血清,按Marssall氏法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体,观察不同抗体稀释度(1:10～1:2560)、不同孵育时间(15,30,45,60,90,120 min)、不同封闭剂(1％牛血清白蛋白,10％牛血清白蛋白及10％小牛血清)对DFA检测阴道毛滴虫的影响。对102例阴道炎患者标本分别用培养法、悬滴法和DFA作临床检验。结果抗体稀释度1:160、37℃孵育45min、封闭剂1％或10％牛血清白蛋白为最佳反应条件。检测102例临床标本,3种方法均阳性的16例,均阴性的68例。有13倒悬滴法、3例DFA检测阴性,而另2法阳性。1倒悬滴法阴性,DFA阳性,培养法未能证实。以培养法为标准,DFA敏感性为87.9％,特异性为98.6％。结论 DFA可作为悬滴法的一种替代手段用于临床检验。

直接免疫荧光法分析儿童呼吸道病毒的分布

[目的]采用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原,为儿童呼吸道病毒感染诊断提供帮助。[方法]选择398例呼吸道感染的住院患儿,采用直接免疫荧光法对咽部脱落细胞中的呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、腺病毒(adenovirus,ADV)、流感病毒A型(the influenza virus type A,IFVA)、流感病毒B型(the influenza virus type B,IFVB)、副流感病毒1型(parainfluenza virus type 1,PIV1)、副流感病毒2型(parainfluenza virus type 2,PIV2)和副流感病毒3型(parainfluenza virus type 3,PIV3)7种常见病毒抗原进行检测,并进行统计学分析。[结果]在398例呼吸道感染患儿中,阳性91例,检出率为22.86%。其中最高为RSV 37例(40.66%),其次为PIV3 19例(20.88%)、IFVB 14例(15.38%)。急性扁桃体炎、毛细支气管炎、肺炎、急性支气管炎、上呼吸道感染的病毒阳性率分别是46.67%(14/30)、40.00%(20/50)、26.67%(40/150)、18.42%(7/38)、7.69%(10/130)。随着年龄的增长,呼吸道病毒的感染率逐步下降(P<0.05),≤1岁的病毒感染率最高,为26.52%。儿童呼吸道病毒感染以冬春两季好发。[结论]本地区儿童急性呼吸道感染的主要病毒是RSV,病毒感染随年龄增加而下降,治疗中应谨慎使用抗生素。

金标法和直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒的比较

目的 金标法和直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒的方法比较.方法同时用金标法和直接免疫荧光法检测350例儿童患者的鼻咽拭子中呼吸道合胞病毒.结果 350例中,直接免疫荧光法检出173例阳性,阳性率为49.4%;金标法检出121例阳性,阳性率为34.6%,两种检测方法灵敏度比较差异有统计学非常显著性意义（P＜0.01）,但两种检测方法的检测结果一致性检验,kappa=0.702,基本一致.结论 直接免疫荧光法比金标法的灵敏度高,两种检测方法的检测结果基本一致.

直接免疫荧光法快速检测甲型流感病毒抗原的临床意义

目的探讨直接免疫荧光法快速检测早期甲型流感病毒抗原及其临床应用。方法选择临床上诊断为急性呼吸道感染入院的患者,采集标本200例,将其分为两组:冬春两季流行季节儿童组(100例)和夏秋两季非流感流行期间儿童组(100例),使用美国D3Ultra甲型流感病毒抗原检测试剂,采用荧光标记的单克隆抗体对感冒患者进行甲型流感病毒抗原检测。结果在冬春两季流感流行期间,100例儿童检测有8例阳性,阳性率为8%;在夏秋两季非流感流行期间100例儿童检测有2例阳性,阳性率为2%;两组阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论运用直接免疫荧光法快速检测甲型流感毒感抗原是一种经济、高效、快速、特异的检测方法,能指导临床快速诊断,合理用药。

直接免疫荧光法在阴道加德纳菌感染诊断中的应用研究

加德纳菌（GV）是一类革兰阴性或阳性短杆菌,厌氧,嗜血,培养困难。阴道加德纳菌不仅引起尿道炎和阴道炎,还可导致早产、低体质量儿、绒毛膜炎、羊膜炎、羊水感染、子宫内膜炎、急性输卵管炎、手术后感染和子宫颈癌等[1]。GV还可经性接触传播,与男性非淋菌性尿道炎、男性不育亦有一定关系。细菌性阴道病是妇科和产科感染的高危险因素[2]。临床实践中如果能迅速检测并及时处理,

直接免疫荧光法同时检测儿童多种呼吸道病毒抗原的临床应用

目的:运用一种高效、快速检测呼吸道病毒抗原的方法,为儿童呼吸道病毒感染的诊断提供帮助,指导合理用药,并了解呼吸道病毒流行情况。方法:采用直接免疫荧光法,利用抗病毒特异性单克隆抗体快速检测497名儿童呼吸道分泌物中的呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A型(FA)、流感病毒B型(FB)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)和腺病毒(ADV)等7种呼吸道常见病毒,并进行统计学分析。结果:在497例呼吸道感染患儿中,检出病毒感染106例,检出率为21.33%。其中,呼吸道合胞病毒感染最多,为63例,占阳性病例的59.43%;腺病毒8例,阳性率为7.55%;副流感病毒3型7例,阳性率为6.61%;流感病毒A型5例,阳性率为4.71%;流感病毒B型2例,阳性率为1.89%;副流感病毒1型2例,阳性率为1.89%;副流感病毒2型1例,阳性率为0.94%;混合型18例,阳性率为16.98%。随着患儿年龄的增长,呼吸道病毒的感染率逐步下降,1岁以内的患儿病毒感染率达23.99%,(1～12)岁患儿病毒感染率为15.23%,差异有显著性(P<0.05)。儿童呼吸道病毒感染以冬、春两季好发,检出率达27.31%,夏、秋两季检出率为14.16%,差异有显著性(P<0.05)。结论:直接免疫荧光法同时检测多种呼吸道病毒抗原具有经济、高效、简便、快速、直观、特异等优点,是一种对呼吸道病毒感染早期诊断和指导合理用药行之有效的方法。

43例皮肌炎患者皮损及肌肉直接免疫荧光检查分析

目的探讨皮肌炎的发病机理。方法采用抗人IgIgG、IgM、IgA和补体C3DIF技术,检查了43例皮肌炎患者肌肉组织和其中21例皮肌炎患者皮肤损害的荧光分布。结果皮肌炎患者肌肉组织IgG、IgM、IgA和补体C3的阳性率分别为72.09%、23.26%、11.63%和51.16%,分布于肌膜;皮损区IgG、IgM、IgA和补体C3的阳性率分别为66.67%、19.05%、4.76%和61.90%,分布于基底膜。患者外周血IgG水平明显升高(70.83%)。结论体液免疫亢进在皮肌炎的发病机理中起重要作用。

肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色方法的再改良

目的探讨肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色再改良的方法,以提高石蜡切片的诊断准确率。方法选择2010年6-12月在北京大学深圳医院行肾组织活检确诊为肾小球疾病的患者44例,其中IgA肾病20例,狼疮性肾炎12例,膜性肾病12例。对其肾组织除常规冰冻切片直接免疫荧光染色外,对石蜡切片进行高温、高压修复和胃蛋白酶消化处理,再分别行免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C1q)、纤维蛋白(Fib)、HBsAg及HBcAg直接免疫荧光染色,比较石蜡与冰冻切片的直接免疫荧光染色结果。结果冰冻切片:肾小球数1～12个,平均5个;石蜡切片:肾小球数7～30个,平均15个。20例IgA肾病、12例狼疮性肾炎、12例膜性肾病患者的肾组织行冰冻(IgA、IgG、IgM、C3、C1q、Fib、HbcAg和HbsAg)直接免疫荧光染色时在不同荧光强度中所占比例与行石蜡直接免疫荧光染色比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论再改良的肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色是冰冻切片失败时较好的补救手段。其石蜡切片组织结构更清晰,免疫复合物沉积部位较冰冻切片更易判断。

直接免疫荧光法检测白色念珠菌

目的探讨多克隆抗体直接免疫荧光法检测白色念珠菌的最佳反应条件及临床应用意义。方法观察不同抗体稀释度(1:10～1:2 560),不同孵育时间(15、30、45、60、90、120 min),不同封闭剂(1％、10％牛血清白蛋白及10％小牛血清)和不同菌数对实验效果的影响。结果以抗体稀释度1:40、37℃孵育45 min、封闭剂1％或10％牛血清白蛋白以及菌数1．0×106个／ml和5．0×106个／ml为最佳反应条件。结论直接免疫荧光法检测白色念珠菌具有一定的优点和临床应用价值。

直接免疫荧光法对儿童呼吸道病毒感染病原学检测的临床意义

目的建立一种快速检测呼吸道病毒感染的方法,了解儿童呼吸道病毒感染的流行特征。方法采用直接免疫荧光法对2012年8月至2013年7月住院的1801例呼吸道疾病患儿鼻咽部抽吸物进行呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A、B型、副流感病毒1、2、3型、腺病毒检测。结果检测下呼吸道感染的患儿1801例,共检出呼吸道病毒766例,检出率42.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)是儿童下呼吸道感染最常见的病原体,婴幼儿最高,通常在冬春季节流行。结论直接免疫荧光法具有快速、简便、特异性高等优点,适应于呼吸道病毒感染的早期诊断。

三种检材的直接免疫荧光检查诊断口腔天疱疮

目的 对口腔损害的黏膜组织、损害缘的分离上皮组织 (不含基底细胞层 )、损害面的脱落细胞涂片作直接免疫荧光 (DIF)检查 ,以评估这 3种检材对诊断天疱疮的可靠性。方法 收集 2 8例口腔天疱疮 ,每一患者同时作上述 3种取材的DIF检查。结果 2 8例黏膜组织及分离上皮组织标本的DIF检查全部阳性 (IgG) ,而 2 8例脱落细胞涂片标本只有 2 4例阳性 (IgG)。结论 黏膜组织与分离上皮组织作DIF检查以诊断天疱疮 ,两者的可靠性相同 ,但后者取材明显比前者容易 ;脱落细胞涂片作DIF检查的可靠性差 ,不宜作诊断天疱疮的DIF底物。

直接免疫荧光技术在自身免疫性大疱性皮肤病诊断中的价值

目的探讨直接免疫荧光(direct immunofluorescence,DIF)技术在诊断自身免疫性大疱性皮肤病(autoim-mune bullous dermatoses,AIBD)中的价值。方法回顾性分析2009年1月至2011年12月间北京协和医院皮肤科确诊的155例AIBD的DIF检查结果 ,总结各类型AIBD的DIF表现特点,并与组织病理检查对AIBD诊断的敏感性进行比较。结果各类型AIBD的DIF表现各具特征性。DIF诊断AIBD的敏感性为92.9%,与组织病理检查敏感性(85.2%)比较差异无统计学意义(χ2=2.063,P=0.058)。结论 DIF技术敏感性高,对AIBD的诊断和鉴别诊断有重要意义。