采用基因释放剂对微量及陈旧标本进行直接PCR扩增

为简化ＰＣＲ方法和减少标本用量，利用基因释放剂不提取ＤＮＡ，比较了利用基因释放剂和不用基因 释放剂，对微量肝素抗凝血、微量结肠粘膜组织（置－２０℃６个月）和含有ＰＣＲ抑制剂的ＤＮＡ标本直接进 行ＰＣＲ扩增。结果，利用基因释放剂，可扩增出目的产物，不用基因释放剂，来扩增出目的产物。提示利用 基因释放剂直接进行ＰＣＲ，简单快速，不用提取ＤＮＡ，适于微量、含有ＰＣＲ抑制物的ＤＮＡ及陈旧组织标本 的检测。

线粒体直接PCR扩增法

为建立一种不需提取线粒体DNA而直接用线粒体进行聚合酶链反应 (PCR)的方法 ,将得到的线粒体用高温加热 ,使线粒体膜破裂 ,释放DNA后 ,直接用于PCR扩增。结果 :扩增产物与提纯的线粒体DNA扩增得到的产物一样丰富。提示

真菌菌体直接PCR扩增的方法研究

真菌属于真核微生物,它种类繁多,与人类的健康密切相关,同时某些真菌还能被安全地利用于食品生产和生物化工领域。真菌分子生物学研究是微生物研究的一个重要领域,但由于真菌的细胞壁结构特殊,抗逆性强,使得真菌的核酸提取尤其困难。为实现对真菌基因组的快速提取与扩增,本研究尝试利用市售常见的细胞裂解液对4种典型真菌的细胞进行破壁处理,然后直接使用PCR技术实现对真菌基因组的快速扩增。结果显示黑曲霉513.88(Aspergillus niger 513.88)和里氏木霉(Trichoderma reesei)这两种重要的真菌可以使用细胞裂解液处理后实现直接PCR扩增。

快速筛选杂合性突变克隆

目的 建立一种快速、简便、可靠的筛选杂合性突变克隆的方法。方法 采用加热裂解 ,直接 PCR扩增插入目的片段 ,并与常规酶切法相比较。结果 加热裂解 ,直接 PCR扩增是一种快速、简便、行之有效的筛选鉴定方法 ,可节省时间和提高效率。

海南地区汉族人群15个STR基因座的遗传多态性

短串联重复序列（short tandem repeat,STR）,又称微卫星DNA或简单重复序列,其长度多态性来源于2~6 bp重复单位拷贝数的个体差异,是目前在法医物证鉴定中应用最广泛的长度多态性遗传标记[1]。

荒漠植物PCR模板3种制备方法的初步研究

采用2×CTAB法、NaOH法及直接PCR扩增法,以准噶尔无叶豆〔Erem osparton songoricum（L itv.）Vass.〕为例,对沙生植物PCR模板制备方法进行了比较研究。结果表明：2×CTAB法提取的DNA产量及质量较高,PCR扩增谱带稳定、清晰,但方法繁琐,单个样品处理时间长,耗时耗力;NaOH法制备模板DNA简单快速、经济高效,在1-2 h可提取10-20个样品,比常规方法快3-5倍,并可产生稳定、可靠、重复性好的PCR扩增谱带;直接扩增法是一种更加快速、简便、廉价的制备方法,适宜制备大批量的PCR模板。研究结果对其他荒漠植物,尤其是叶片极端退化或珍稀濒危植物的PCR模板制备具有指导意义。