线粒体直接PCR扩增法

为建立一种不需提取线粒体DNA而直接用线粒体进行聚合酶链反应 (PCR)的方法 ,将得到的线粒体用高温加热 ,使线粒体膜破裂 ,释放DNA后 ,直接用于PCR扩增。结果 :扩增产物与提纯的线粒体DNA扩增得到的产物一样丰富。提示

荒漠植物PCR模板3种制备方法的初步研究

采用2×CTAB法、NaOH法及直接PCR扩增法,以准噶尔无叶豆〔Erem osparton songoricum（L itv.）Vass.〕为例,对沙生植物PCR模板制备方法进行了比较研究。结果表明：2×CTAB法提取的DNA产量及质量较高,PCR扩增谱带稳定、清晰,但方法繁琐,单个样品处理时间长,耗时耗力;NaOH法制备模板DNA简单快速、经济高效,在1-2 h可提取10-20个样品,比常规方法快3-5倍,并可产生稳定、可靠、重复性好的PCR扩增谱带;直接扩增法是一种更加快速、简便、廉价的制备方法,适宜制备大批量的PCR模板。研究结果对其他荒漠植物,尤其是叶片极端退化或珍稀濒危植物的PCR模板制备具有指导意义。

快速筛选杂合性突变克隆

目的 建立一种快速、简便、可靠的筛选杂合性突变克隆的方法。方法 采用加热裂解 ,直接 PCR扩增插入目的片段 ,并与常规酶切法相比较。结果 加热裂解 ,直接 PCR扩增是一种快速、简便、行之有效的筛选鉴定方法 ,可节省时间和提高效率。