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玉米花粉粒直接PCR技术研究
被引量:
4
1
作者
朱苏文
项艳
李培金
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2002年第2期145-148,共4页
利用成熟花粉粒制成悬液作为玉米基因组DNA模板直接进行PCR扩增 ,研究了不同花粉悬液浓度、花粉上清液对RAPD -PCR的影响。结果表明 :花粉悬液浓度在 4μg 5 0 μl以上 ,用 10碱基随机引物均能扩增出较清晰的PCR条带 ,且与叶片按改良Gui...
利用成熟花粉粒制成悬液作为玉米基因组DNA模板直接进行PCR扩增 ,研究了不同花粉悬液浓度、花粉上清液对RAPD -PCR的影响。结果表明 :花粉悬液浓度在 4μg 5 0 μl以上 ,用 10碱基随机引物均能扩增出较清晰的PCR条带 ,且与叶片按改良Guidet法提取的DNA模板扩增的RAPD带型无明显差异 ,利用花粉悬液能有效地进行基因组DNA变异的RAPD分析和基因SCAR标记的检测。玉米单株花粉量可用于数百次以上的PCR反应 ,较叶片等植物组织用常规法提取DNA快速、简便、廉价 ,可有效地应用于以PCR为基础的植物基因组DNA变异、农艺性状的RAPD标记和分子标记辅助育种的研究。
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关键词
玉米
直接pcr技术
花粉粒悬液
应用
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职称材料
应用直接PCR技术的药用植物批量样本快速处理及分子鉴定
被引量:
5
2
作者
张金家
徐红
赵淑娟
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期1763-1769,共7页
直接PCR技术以微量样品快速裂解产物中DNA为模板,实现对目的基因的有效扩增。基于此,本文随机采集80种药用植物不同部位组织材料,以ITS序列为目的基因,用直接PCR技术进行扩增。通过反应体系优化,得到80个样品的全部ITS片段,扩增成功率为...
直接PCR技术以微量样品快速裂解产物中DNA为模板,实现对目的基因的有效扩增。基于此,本文随机采集80种药用植物不同部位组织材料,以ITS序列为目的基因,用直接PCR技术进行扩增。通过反应体系优化,得到80个样品的全部ITS片段,扩增成功率为100%。对扩增片段测序并做Blast分析,与同种属植物ITS序列同源性为96%~100%。该方法避免了繁琐的DNA提取过程,只需取微量植物组织为起始材料,在保证结果准确、稳定的同时,提高了工作效率,为基于DNA条形码的药用植物批量样本的快速处理及分子鉴定提供了新的技术思路。
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关键词
直接pcr技术
ITS
DNA条形码
药用植物
分子鉴定
原文传递
应用PCR产物直接测序技术测定乙型肝炎病毒前C区基因序列
被引量:
1
3
作者
李智伟
窦晓光
刘沛
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期247-248,251,共3页
目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ...
目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,并与基因库中来自世界各地的不同基因型的毒株进行比较。结果 :患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,除发现乙型肝炎病毒前C区基因 1896位存在点变异外 ,还可见 184 6位点变异 ,且乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 (P <0 .0 5 ) ,而 186 2位未检出变异。 1838位核苷酸全部为腺嘌呤核苷酸 (A) ,184 6位核苷酸大多为胸腺嘧啶核苷酸 (T) ,仅 4例发生了G→A点突变。经与不同基因型的毒株进行比较 ,提示沈阳地区流行的乙型肝炎病毒毒株接近美国株。结论 :乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 ;
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关键词
pcr
产物
直接
测序
技术
乙型肝炎病毒
前C区变异
DNA序列分析
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职称材料
题名
玉米花粉粒直接PCR技术研究
被引量:
4
1
作者
朱苏文
项艳
李培金
机构
安徽农业大学生命科学院
出处
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2002年第2期145-148,共4页
文摘
利用成熟花粉粒制成悬液作为玉米基因组DNA模板直接进行PCR扩增 ,研究了不同花粉悬液浓度、花粉上清液对RAPD -PCR的影响。结果表明 :花粉悬液浓度在 4μg 5 0 μl以上 ,用 10碱基随机引物均能扩增出较清晰的PCR条带 ,且与叶片按改良Guidet法提取的DNA模板扩增的RAPD带型无明显差异 ,利用花粉悬液能有效地进行基因组DNA变异的RAPD分析和基因SCAR标记的检测。玉米单株花粉量可用于数百次以上的PCR反应 ,较叶片等植物组织用常规法提取DNA快速、简便、廉价 ,可有效地应用于以PCR为基础的植物基因组DNA变异、农艺性状的RAPD标记和分子标记辅助育种的研究。
关键词
玉米
直接pcr技术
花粉粒悬液
应用
Keywords
maize
pollen grain suspension
pcr
分类号
S513 [农业科学—作物学]
Q944.58 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
应用直接PCR技术的药用植物批量样本快速处理及分子鉴定
被引量:
5
2
作者
张金家
徐红
赵淑娟
机构
上海中医药大学中药研究所
出处
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期1763-1769,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81673540)
上海市自然科学基金资助项目(16ZR1434100)
文摘
直接PCR技术以微量样品快速裂解产物中DNA为模板,实现对目的基因的有效扩增。基于此,本文随机采集80种药用植物不同部位组织材料,以ITS序列为目的基因,用直接PCR技术进行扩增。通过反应体系优化,得到80个样品的全部ITS片段,扩增成功率为100%。对扩增片段测序并做Blast分析,与同种属植物ITS序列同源性为96%~100%。该方法避免了繁琐的DNA提取过程,只需取微量植物组织为起始材料,在保证结果准确、稳定的同时,提高了工作效率,为基于DNA条形码的药用植物批量样本的快速处理及分子鉴定提供了新的技术思路。
关键词
直接pcr技术
ITS
DNA条形码
药用植物
分子鉴定
Keywords
Direct-
pcr
technology
ITS
DNA barcoding
medicinal plant
molecular authentication
分类号
R931 [医药卫生—生药学]
原文传递
题名
应用PCR产物直接测序技术测定乙型肝炎病毒前C区基因序列
被引量:
1
3
作者
李智伟
窦晓光
刘沛
机构
中国医科大学第二临床学院感染科
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期247-248,251,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 93 70 64 9)
文摘
目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,并与基因库中来自世界各地的不同基因型的毒株进行比较。结果 :患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,除发现乙型肝炎病毒前C区基因 1896位存在点变异外 ,还可见 184 6位点变异 ,且乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 (P <0 .0 5 ) ,而 186 2位未检出变异。 1838位核苷酸全部为腺嘌呤核苷酸 (A) ,184 6位核苷酸大多为胸腺嘧啶核苷酸 (T) ,仅 4例发生了G→A点突变。经与不同基因型的毒株进行比较 ,提示沈阳地区流行的乙型肝炎病毒毒株接近美国株。结论 :乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 ;
关键词
pcr
产物
直接
测序
技术
乙型肝炎病毒
前C区变异
DNA序列分析
Keywords
hepatitis B virus
precore gene
DNA sequence analysis
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
R446.61 [医药卫生—诊断学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米花粉粒直接PCR技术研究
朱苏文
项艳
李培金
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2002
4
下载PDF
职称材料
2
应用直接PCR技术的药用植物批量样本快速处理及分子鉴定
张金家
徐红
赵淑娟
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
5
原文传递
3
应用PCR产物直接测序技术测定乙型肝炎病毒前C区基因序列
李智伟
窦晓光
刘沛
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
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职称材料
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