直立白薇基因组DNA提取条件的优化

以新鲜直立白薇叶片为试材,采用DNA试剂盒提取方法,研究了DNA提取过程中琼脂糖凝胶浓度、样品加样量、洗脱液用量及乙醇浓度4个因素对直立白薇基因组DNA提取效果的影响,以期获得最适宜直立白薇基因组DNA的提取方法。结果表明:琼脂糖凝胶浓度为0.8%,点样量为13μL,同时以80%乙醇沉淀,洗脱缓冲液用量为100μL时电泳条带最为清晰明亮、不拖尾,为直立白薇基因组DNA最优提取方法。综上,基于试剂盒方法进行提取优化,获得高纯度直立白薇DNA,为直立白薇分子生物学及遗传学的研究奠定基础,为保证正品直立白薇药材资源开发和利用提供参考依据。

直立白薇退热抗炎作用

直立白薇水提物腹腔注射给药，对１５％酵母悬液诱发的大鼠发热有明显的退热作用，同时也有明显的抗炎作用，其醇提取物无作用。

HPLC法测定直立白薇中对羟基苯乙酮和2,4-二羟基苯乙酮的含量

建立了中药直立白薇中对羟基苯乙酮和2,4-二羟基苯乙酮的HPLC含量测定方法。色谱条件为:ZOR-BAXSB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相甲醇:0.1%醋酸水溶液(35:65),流速1.0mL/min,检测波长275nm。对羟基苯乙酮在1.04～104.00μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),2,4-二羟基苯乙酮在0.25～25.00μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),其平均加样回收率分别为95.40%和93.28%,RSD分别为3.71%和1.63%。本方法操作简便,结果可靠,重现性好,为白薇的质量标准研究提供了实验依据。

直立白薇化学成分研究

目的:研究直立白薇的化学成分。方法:利用色谱技术进行分离和纯化,并通过现代光谱方法鉴定其化学结构。结果:分离得到12个化合物,并鉴定了其中的9个,分别为2,4-二羟基苯乙酮(1),2,6-二羟基苯乙酮(2),4-羟基苯甲醇(3),苯甲酸(4),β-香树素乙酸酯(5),棕榈酸(6),β-谷甾醇(7),β-胡萝卜苷(8),白前苷元C-3- O-α-D-吡喃夹竹桃糖基-(1→4)-β-D-吡喃洋地黄毒糖基-(1→4)-α-D-吡喃夹竹桃糖苷(9)。结论:化合物2～8为首次从该植物中分得。

直立白薇苷C诱导肺癌A549细胞凋亡的作用机制

目的研究白薇诱导肺癌A549细胞凋亡的活性成分及其作用机制。方法以肺癌A549细胞为实验对象,通过硅胶柱层析等方法确定其活性成分,并利用比色法研究活性成分对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9的活性以及凋亡相关基因肿瘤坏死因子(TNF-α)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL2)、Caspase-3和生存素(Survivin)的影响。结果分离获得1种能诱导肺癌A549细胞凋亡的活性成分,经鉴定为直立白薇苷C。它可显著抑制A549细胞增殖、诱导A549细胞凋亡。同时增强Caspase-3和Caspase-9的活性,上调TNF-α基因表达,下调BCL2、Caspase-3和Survivin等基因表达。结论直立白薇苷C可诱导A549细胞凋亡,其机制可能与其调节Caspase家族因子活性有关。

直立白薇挥发油成分的气相色谱-质谱联用分析

目的分析直立白薇挥发油的化学成分。方法水蒸气蒸馏提取挥发油,气-质联用分离并鉴定化学成分,面积归一化法计算各成分的相对含量。结果从直立白薇挥发油中分离得到25个峰,鉴定了其中20个成分,占总挥发油成分的96.14%。结论直立白薇挥发油中的主要成分为脂肪酸类化合物(75.74%),其中相对含量最高的化合物是正十六烷酸(47.76%)。

直立白薇C_(21)甾体苷类LC-MS分析

目的:建立中药直立白薇C_(21)甾体苷类的LC-MS分析方法,鉴定直立白薇的化学成分。方法:ZORBAX SB-C_(18) (4.6 mm×250 mm,5μm);流动相0.1%醋酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;检测波长210 nm;正、负离子检测。结果:直立白薇的化学成分获得了较好的分离和检测。通过与对照品的ESI-MS数据比较,鉴定了药材中7个C_(21)甾体苷类化合物,根据质谱数据和文献,推断了2个C_(21)甾体苷类化合物。结论:该方法灵敏度高,分离度好,适用于直立白薇C_(21)甾体苷类的快速定性鉴定。

中药白薇中白薇正苷A含量测定

目的 :通过高效液相色谱法建立了道地药材直立白薇中有效成分白薇正苷A(CynanchumsideA)的含量测定方法。方法 :采用HPLC法测定。结果 :对不同产地的药材进行了白薇正苷A的含量测定。结论 :为道地药材直立白薇质量控制标准的建立奠定了基础。

识别真假白薇

白薇又名春草、白幕，为萝蘼科植物直立白薇或蔓生白薇的根，始载于《神农本草经》。李时珍在《本草纲目》中解释其名的由来，“薇，细也，其根细而白也”故名白薇。每年早春、晚秋均可采收，但以秋季采收为佳。采挖后，除去地上部分，洗净晒干即可入药。