直肠癌细胞核DNA倍体检测与细胞生物学行为的相关性研究

目的 :研究直肠癌细胞核DNA异倍体的出现与肿瘤细胞生物学行为的相关性 ,通过临床检测来判定直肠癌的浸润、转移情况 ,为制定治疗方案、确定手术范围及估计预后提供有力证据。方法 :对 87例直肠癌细胞核DNA含量检测 ,根据异倍体的出现规律与临床征象和病理学进行相关性研究 ,通过DNA倍体的不同表达 ,了解DNA倍体变化在肿瘤发生、发展中的调控性。结果 :DNA异倍体的增加与肿瘤的快速生长、转移及分化程度关系密切 (P <0 .0 5) ,随肿瘤侵袭加深、病变范围扩大及转移 ,肿瘤细胞DNA异倍体出现率及含量明显增加 (差异显著 ,P <0 .0 5)。结论

直肠癌细胞核DNA倍体变化与临床及影像学改变的相关性研究

通过直肠癌细胞核DNA含量检测和直肠癌病人术前盆腔CT征象以及肿瘤临床病理学改变，了解直肠癌DNA异倍体增加与CT征象及临床病理间的相关性。(1)统计分析直肠癌术前盆腔CT扫描资料，了解直肠癌CT征象特征；(2)将直肠癌石蜡包埋切片进行细胞核DNA检测，测定DNA倍体含量(二倍体和异倍体)；(3)统计临床病理学资料；(4)将以上内容进行相关性研究，得出统计学结果。结果：(1)直肠癌细胞DNA含量改变直接影响直肠肿瘤的生物学行为，直肠癌病理分期、侵袭范围、淋巴结转移5年生存率与DNA异倍体出现瘤期呈显著相关性，DNA出现率为63％(55／87)；(2)直肠癌CT改变可出现在病程早期，CT判定肿瘤侵袭范围与临床病理符合率为88．5％，判定淋巴结转移与临床病理符合率达93．1％；(3)随肿瘤侵袭加深、病变范围扩大及转移，肿瘤细胞DNA异倍体出现率及含量明显增加。CT检查和DNA倍体检测与临床病理对比研究显示，肿瘤的影像学改变与细胞DNA异倍体出现关系密切，两者符合率85％～96％，提示CT在直肠癌术前检查中具重要意义，可为术前综合治疗及手术范围确定和估测肿瘤细胞DNA倍体含量提供依据。

直肠癌细胞核DNA倍体检测及临床意义

为探讨直肠癌DNA倍体表达在肿瘤发生、发展中的作用机制及临床意义，对87例直肠癌行细胞核DNA含量检测并与临床病理学进行相关研究。研究显示，DNA倍体增加与肿瘤生长、转移及分化程度密切相关。肿瘤侵袭加深、病变范围扩大、转移，肿瘤细胞异倍体出现率及含量明显增加。DNA倍体主要出现在DukesB，C，D期，异倍体出现率C期高于B期，D期高于B，C期。DNA异倍体增加，5年生存率降低。结果表明：直肠癌细胞DNA倍体含量检测可作为术前综合治疗、确定手术范围和估计预后的重要指标。

维生素K_(3)对人大肠癌细胞核DNA指数(倍体)的计算机图像分析

本文应用光镜,计算机与显微图像形态定量分析软件相结合的方法,观察到人大肠癌培养细胞经Vit K_3不同剂量(2.5、5、10和20μg/ml)作用后,细胞核DNA指数(DI)明显下降。从DI(倍体)分布直方图中,观察到Vit K_3使癌细胞的DNA主峰由DI=3转向1.5,核的倍体由高异倍体向低异倍体转化〔1〕,表明Vit K_3的抗肿瘤作用与抑制DNA合成和减轻肿瘤恶性度有关。本文提供了一种快速、简便、高精度定量测定DNA含量(IOD)的先进方法和手段。可望对肿瘤诊断、预后估计有一定的参考意义,亦可用于对细胞倍体性改变与肿瘤恶性度关系的分析。

青年与老年结直肠癌C -erbB - 2不同表达与DNA倍体的关系

目的 探讨青年和老年结直肠癌 (CRC)患者C -erbB - 2蛋白的表达与病理学和细胞DNA倍体的关系。方法 采用免疫组化法检测 63例青、老年CRCC -erbB - 2 ,流式细胞学分析青年和部分老年患者的DNA倍体。结果 C -erbB - 2蛋白阳性表达在 31例青年CRC中有 1 4例 (45 .2 % ) ,而 32例老年CRC中仅 4例 (1 2 .2 % ) (P <0 .0 1 ) ;癌的DNA非二倍体发生率青年组为 87.1 % (2 7/ 31 ) ,老年组为 2 8.6 % (4/ 1 4 ) (P <0 .0 0 1 )。在腺癌、高 -中分化、无局部淋巴结转移及浅度浸润的癌中 ,青年组C -erbB - 2蛋白的阳性表达和非二倍体发生率均高于老年组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1 )。结论 青年和老年CRCC -erbB - 2蛋白表达不同与细胞DNA倍体密切相关 。

ER、PR和p53基因检测及DNA倍体分析对结直肠癌预后判断的意义

目的探讨ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体对结直肠癌预后判断的意义。方法采用RBA法、免疫组织化学方法和流式细胞术对286例结直肠癌标本分别进行ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析并结合患者的临床资料进行分析。结果ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析与结直肠癌患者预后均有明显相关,差异有极显著性意义(P<0.01)。DNA二倍体、p53基因检测和ER、PR的表达水平越强其患者预后越好。结论结直肠癌ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析有助于结直肠癌患者的临床诊断及预后评估。

鼻咽癌细胞核DNA倍体和颈淋巴结转移与预后的相关性

目的：为加深对影响鼻咽癌（ＮＰＣ）预后因素的认识。方法：采用流式细胞仪（ＦＣＭ）对４４例ＮＰＣ癌细胞核ＤＮＡ进行检测，发现二倍体肿瘤（ＤＴ）１０例，近二倍体肿瘤（ｎＤＴ）１７例，非整倍体肿瘤（ＡＴ）１７例；４４例中，颈淋巴结转移３５例，经放疗后３年追综观察，鼻咽局部复发和（或）远处转移２４例。将不同ＤＮＡ倍体的ＮＰＣ、颈淋巴结转移和预后进行相关性分析。结果：ＮＰＣＤＮＡ倍体与转移之颈淋巴结及其大小无关；ｎＤＴ和ＡＴＮＰＣ放疗后３年局部复发比率高于ＤＴＮＰＣ；无颈淋巴结转移ＮＰＣ，放疗后３年局部复发率与有颈淋巴结转移者无差别（Ｐ＞００５）；与无颈淋巴结转移ＮＰＣ相比，有颈淋巴结转移者放疗后３年更易发生远处转移（Ｐ＜００５）。结论：ＮＰＣＤＮＡ倍体与鼻咽局部预后关系较为密切，而颈部淋巴结情况则与远处转移与否有关。

肿瘤诱发过程中反流对食管上皮细胞增殖及DNA倍体的影响

为研究不同类型反流对食管上皮细胞增殖及DNA倍体的影响在食管肿瘤诱发过程中的作用 ,制作单纯胃食管反流 (G组 )、单纯十二指肠食管反流 (D组 )、胃十二指肠混合液食管反流 (DG组 )及无反流对照 (C组 )大鼠模型 ,于术后 4周开始腹腔内注射食管致癌剂甲基戊基亚硝胺 (MANA) ,5mg/kg ,1次 /周 ,共 15周。于术后 2 0、2 6、40周分批取出食管标本。用SABC法免疫组化染色检测食管上皮中增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。制备食管粘膜组织单细胞悬液 ,经DNA染色后行流式细胞仪检测 ,分析样品的DNA指数 (DI)、增值指数(PI)及DNA非整倍体率。结果显示 ,各组的PCNA标记指数 (LI)均随时间延长而显著增加 ,各时间点反流组的LI增加均较对照组更为明显 ,D、DG组又较G组高。随反流和诱癌时间的延长各组食管上皮的平均DI及PI亦逐渐增加 ,非整倍体率逐渐增高 ,反流各组的增加程度比C组显著更高 ,其中D组、DG组最为显著。提示各种类型食管反流均可致食管上皮细胞增殖异常及DNA含量异常 ,并促进细胞恶性增殖的发生 ,有十二指肠内容物反流的组内细胞增殖异常更为明显。

自发性高血压大鼠左室重构中细胞增殖及心肌细胞DNA倍体的变化

目的 :探讨组织细胞增殖在高血压左室重构中的变化规律。方法 :不同年龄 (1周、3、6、12月龄 )的 WKY和 SHR大鼠 ,称重法测量左室肥厚指数 ,L SAB免疫组化法检测左室中增殖细胞核抗原 (PCNA)的蛋白表达 ,图像细胞分析技术原位检测心肌细胞核 DNA倍体和细胞核面积的变化。结果 :1周、3、6、12月龄各组 SHR左室肥厚指数分别比同龄WKY增加 18%、15 %、2 6 %、2 6 % ,均有统计意义。 1周龄和 3月龄 SHR心肌细胞 PCNA阳性率较同龄 WKY显著增加 ;而纤维细胞阳性率在两株大鼠无明显差异。 6月龄 WKY无阳性细胞表达 ,SHR心肌细胞阳性率为 0 .13± 0 .0 7,无统计学意义。 12月龄 WKY和 SHR均无阳性细胞表达。各年龄段SHR4倍体心肌细胞核百分比和心肌细胞核面积均较 WKY大鼠显著增加。在 1周至 12月龄时 ,两株大鼠 4倍体心肌细胞核比例均随年龄呈线性生长 ,6月龄后 WKY倍体比例相对稳定 ,SHR增加幅度明显下降。回归分析表明 ,成年 SHR4倍体比例与动脉收缩压呈相正关性。结论 :SHR左室重构在新生鼠即已发生 ,在 6月龄时基本完成 ,并且不完全依赖于血压的增高。这种病理性变化表现为心肌细胞的增殖 (肥大和 /或增生 ) 。

图像分析系统检测白血病细胞核多倍体的临床意义

目的研究急性白血病(AL)细胞DNA倍体及增殖细胞核抗原(PCNA)的变化,探讨AL细胞DNA倍体与白血病细胞增殖的关系及临床意义。方法图像细胞术分析41例AL细胞DNA倍体的变化;单克隆抗体免疫细胞化学染色技术检测42例AL细胞PCNA的表达。结果对照组细胞DNA含量以2C为主,未发现DNA含量≥5C的多倍体细胞;DNA含量分布范围较窄,倍体峰相较单一。AL组≥5C的多倍体细胞明显增加,DNA含量分布范围较宽,倍体峰相右移或多峰相。AL、ALL和ANLL的多倍体检出率分别为56.1%,62.5%和52.0%,均明显高于对照组(P<0.01)。对照组PCNA表达阴性,AL、ANLL和ALL的PCNA阳性率分别为59.5%,62%和56%;DNA多倍体阳性组PCNA阳性细胞数(47.6%±20.76%)明显高于DNA多倍体阴性组[(4.61%±11.01%),P<0.01]。结论AL细胞PCNA表达和DNA合成及细胞的恶性增殖潜能密切相关;图像分析技术可同步进行AL细胞DNA测定和形态观察;通过倍体直方图可直观、简便地观察DNA多倍体情况。

细胞凋亡、增殖、DNA倍体和相关基因Fas、bax和bcl-2在食管癌中的表达和临床意义

目的 探讨细胞凋亡、细胞增殖、DNA倍体及相关基因Fas、bax和bcl 2蛋白在食管癌发生发展中的作用。方法 应用DNA末端标记、免疫组化及流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 70例食管鳞癌组织细胞凋亡状态、细胞增殖、DNA倍体及凋亡相关基因Fas、bax和bcl 2蛋白的表达。结果 凋亡指数、凋亡指数与增殖指数比值及Fas、bax和bcl 2蛋白表达与肿瘤病理分级和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。结论 细胞凋亡和增殖失控有关及相关基因Fas、bax和bcl 2蛋白异常表达在食管癌发生发展中起重要作用。

60例直肠癌标本细胞DNA含量变化分析

目的研究细胞DNA倍体定量分析在直肠癌诊断中的作用和意义。方法用全自动细胞DNA倍体分析仪对结直肠肿瘤细胞、癌旁组织、正常组织进行DNA倍体分析,比较肿瘤组织DNA细胞倍体与临床病理特征的相关性,以及与常规细胞学、病理组织学、分析相互诊断的吻合率。结果肿瘤组织的异倍体率显著大于癌旁组织,癌旁组织的异倍体率显著高于正常组织。直肠肿瘤细胞、癌旁组织、正常组织异倍体率有明显的差异。结论结直肠癌肿瘤组织的恶性度与染色体异倍体之间有显著的相关性,病理组织学、DNA细胞倍体分析诊断相互吻合,细胞DNA倍体定量分析在直肠癌诊断中具有一定的作用。

结肠癌细胞核DNA含量测量及形态分析

目的 探讨结肠癌病理诊断中细胞核形态参数与DNA倍体分析结果的关系以及在临床上的应用价值。方法 用细胞图像分析仪对32例原发结肠癌以及40例正常肠黏膜组织的细胞核DNA含量分布直方图以及细胞核形态参数进行分析。结果 结肠癌组细胞核DNA指数明显高于正常组(P<0.01);从形态上分析,不仅两者细胞核面积有明显差异(P<0.01),而且不同DNA直方图类型结肠癌之间细胞核面积也有差异(P<0.01)。结论 作为定量指标,细胞核DNA含量测量可在结肠癌病理诊断中发挥重要作用,DNA直方图的类型可提示结肠癌的恶性程度,结肠癌细胞核面积测量可作为病理诊断时的参考指标。

结肠癌DNA倍体及p27蛋白表达的意义

目的探讨DNA倍体及p27蛋白表达在结肠肠癌发生发展中的生物学意义。方法采用免疫组化法对62例正常大肠组织及68例大肠癌组织p27蛋白及DNA倍体的表达及其与临床病理学特征的关系进行分析,并分析p27蛋白表达与DNA倍体的关系。结果p27在正常结肠组织中的表达率为100%,而在结肠癌组织中的表达率为52.5%,两者有显著性差异(P<0.05)。正常组织中均为DNA二倍体,结肠癌组织中异倍体为66.2%。结论p27蛋白和DNA倍体的不同表达与结肠癌的临床病理学特征密切相关,可能是预测大肠癌预后的重要指标。

人体胃癌及癌旁细胞p21^(ras)的表达与核型、DNA倍体关系的研究

检测２７例胃癌组织及癌旁异型增殖和癌外正常粘膜３组中ｐ２１ｒａｓ表达、细胞核形态参数和ＤＮＡ倍体分布类型。结果发现，异型增殖组织中ｐ２１ｒａｓ阳性率最高。６种细胞核形态计量参数在３组之间的差异有极显著意义（Ｐ＜０．０１），且回代正确率高达９１．３８％，这可能对胃癌和异型增殖的诊断具有意义。在２７例胃癌组织中，胃癌细胞ｐ２１ｒａｓ表达水平随着ＤＮＡ倍体成倍增加而逐渐下降。而且胃癌细胞ｐ２１ｒａｓ表达水平又明显低于异型增殖细胞。提示ｐ２１ｒａｓ过度表达主要出现在细胞表型发生明显转化之间。

细胞核DNA含量在胃粘膜癌变过程中的变化及意义

目的分析不同病变胃粘膜细胞核DNA含量 ,进行DNA倍体检测 ,探讨DNA倍体与胃粘膜癌变的关系。方法采用流式细胞术分别对正常胃粘膜 15例 ;慢性浅表性胃炎 36例 ;慢性萎缩性胃炎 5 7例 ,其中不伴肠化 2 0例、伴肠化 37例 ;慢性萎缩性胃炎 4 8例 ,其中伴轻度不典型增生 16例、伴中度不典型增生2 3例、伴重度不典型增生 9例 ;胃溃疡 2 5例和胃癌 36例的细胞核DNA含量进行检测。结果正常胃粘膜 ,慢性浅表性胃炎 ,慢性萎缩性胃炎不伴肠化、伴肠化 ,慢性萎缩性胃炎伴轻度不典型增生、伴中度不典型增生、伴重度不典型增生 ,胃溃疡 ,胃癌细胞核DNA异倍体检出率分别为 0 ,0 ,0 ,10 .81% ,0 ,8.70 % ,5 5 .5 6 % ,4 .0 0 % ,4 4 .4 4 %。慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生及胃癌细胞核DNA异倍体检出率最高 ,但两者相比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论DNA异倍体的出现可能是胃癌前病变发生癌变的一个重要标志物。

不同部位恶性黑色素瘤DNA倍体分析和PCNA、p53蛋白的表达及其意义

目的对不同部位恶性黑色素瘤(malignantmelanoma,MM)的DNA倍体、PCNA阳性指数及p53蛋白的表达作对比性分析,探讨其与预后的关系。方法31例MM按部位、临床复发情况分为眼球脉络膜组、皮肤组、中轴腔黏膜组及复发组,对它们进行激光扫描细胞术DNA倍体分析、PCNA和p53蛋白表达的检测,结合随访,作各组间比较。结果PCNA阳性百分率在脉络膜MM中最低,其次为皮肤MM,中轴腔黏膜MM更高,复发组最高,各组间差异有显著性(P<0.01);各组死亡率也呈同样增长趋势;异倍体在前两组中发生率低,而在后两组中各占50%。绝大多数MM不表达p53蛋白,仅在部分复发MM中可检测到p53。结论不同部位MM的PCNA指数、异倍体比例及存活率是不同的,它们之间有一定关联;复发的MM中PCNA指数、异倍体的比例最高,并表达p53蛋白。测定PCNA和异倍体对判断MM的预后有意义。

大肠癌和大肠腺瘤DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义

分子生物学及细胞生物学的研究表明,恶性肿瘤最重要的生物学特征为肿瘤细胞异常增殖和分化不良、浸润性生长和远处转移以及细胞恶性特征的遗传性.以上3点癌细胞共同生物学特征的出现,均以细胞核DNA含量和(或)染色体倍体与功能等微细异常为物质基础.因此,测量和分析癌前病变及癌组织中细胞核DNA含量与倍体对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评估、预测预后均具有重要价值.本研究应用流式细胞术(FCM)检测了经手术或肠镜取得的对照组(正常大肠黏膜)、大肠腺瘤(绒毛状腺瘤、管状腺瘤)和大肠癌组织,检测了它们的DNA倍体、DNA含量和细胞的增殖活性,并进行了临床分析.

桥本氏甲状腺肿PCNA的表达和DNA倍体分析及其意义

目的探讨可能导致桥本氏甲状腺肿发生恶变的分子病理学基础。方法用ＳＰ微波免疫组化和自动图像分析技术研究桥本氏甲状腺肿中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及ＤＮＡ倍体状况，结果（１）桥本氏甲状腺肿中萎缩的甲状腺滤泡细胞ＰＣＮＡ染色呈阳性。（２）桥本氏甲状腺肿中嗜酸性细胞ＰＣＮＡ染色呈强阳性。（３）甲状腺乳头状癌中５ＣＥＲ＞１０％所占比例为８０％（８／１０），而甲状腺乳头状腺瘤中５ＣＥＲ＞１０％所占比例为３０％（３／１０）（Ｐ＜０．０５）。结论（１）光镜下呈萎缩状态的甲状腺滤泡细胞处于增殖活跃状态；（２）嗜酸性细胞有可能发生癌变；（３）５ＣＥＲ＞１０％可作为甲状腺乳头状癌和甲状腺乳头状腺瘤鉴别诊断的标准之一。