胃肠富集Krüppel样因子在人结直肠肿瘤中的表达

目的探讨人结直肠肿瘤组织中胃肠富集Kr櫣ppel样因子(KLF4)的表达及其意义。方法采用组织微阵列结合免疫组织化学染色和Westernblot检测经病理专家确认40例癌旁正常结直肠黏膜、7例腺瘤和77例结直肠癌组织中KLF4蛋白的表达,分析KLF4表达与临床病理因素间的关系。结果KLF4在结直肠肿瘤组织中的表达率为76.62%(59/77),其中弱阳性率53.25%(41/77),强阳性率为23.38%(18/77),癌旁形态学正常的结直肠黏膜可见KLF4高表达;强阳性率在正常黏膜、腺瘤、高分化、中分化癌中分别为57.5%、57.14%、37.5%、21.4%,低分化癌无强阳性表达,其表达率与肿瘤分化程度显著相关(Р<0.01)。此外,KLF4表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、浸润深度、是否转移、大体类型以及临床Dukes分期无显著相关(P>0.05)。结论KLF4在结直肠肿瘤中表达下调,与其病理分级呈负相关,提示KLF4可能参与了结直肠肿瘤的发生及发展过程。

青年人大肠癌的预后与家族遗传背景的影响

目的 了解青年人大肠癌的预后是否受家族遗传背景的影响。方法 将年龄小于 40岁、经手术治疗、有病理资料、详细的家系调查、并有随访结果的患者分成有家族遗传背景和无家族遗传背景两组进行分析比较。结果 44例患者符合上述标准 ,有家族遗传背景组 (A组 ) 12例 ,无家族遗传背景组 (B组 ) 3 2例 ,5年生存率分别为 83 .3 0 % ( 10 /12 )和 5 9.3 8% ( 19/3 2 ) ,两组具有显著性差异 ( χ2 =5 .64 ,P <0 .0 5 )。A组分化较好和分化较差的癌分别为 8例和 4例 ;B组分别为 19例和 13例。按病理类型计算两组标准化 5年生存率 ,分别为 84.0 9% ( 3 7/4 4)和 5 9.0 9% ( 2 6/4 4) ( χ2 =6.68,P <0 .0 5 )。Dukes分期 :A组B期 9例 ,C期 3例 ;B组B期 14例 ,C期 18例。按Dukes分期计算两组标准化 5年生存率 ,分别为 88.64 % ( 3 9/4 4)和 63 .64 % ( 2 8/4 4) ( χ2 =6.5 8,P <0 .0 5 )。结论 青年人大肠癌的预后可能受家族遗传背景的影响。有必要综合国内遗传性非息肉病性大肠癌家系中的青年人病例 ,与散发性大肠癌家系中的青年人大肠癌进行进一步研究与比较 ,以对青年人大肠癌的预后作出正确的评价。

生长激素1基因多态性和烟酒习惯与结直肠癌易感性的关系

目的：研究生长激素1（growth hormone1，GHl）基因T1663A多态性与结直肠癌易感性的关系。方法；在江苏省进行了一个病例一对照研究（结直肠癌患者315例，人群对照439名），调查研究对象的生活习惯，抽取静脉血，提取白细胞DNA，采用PCRRFLP检测研究对象的GHlT1663A基因型。结果：1）GHlT／T、T／A和A／A基因型分布频度在结直肠癌组分别为42．2％、46．7％和11．1％，对照组分别为38．1％、45．9％和16．0％，两组差异无统计学意义，拍“-3．907，P-0．142。但在调整性别、年龄、吸烟和饮酒习惯后，A／A基因型者与T／T基因型者相比，发生结直肠癌的危险性显著降低（0R-0．88，95％CI：0．78～0．99，P=0．0287）。2）多因素分析结果显示，饮酒者患结直肠癌的危险性显著增高（0R=1．96，95％CI：1．34～2．86，P=0．0005），A／A基因型与降低结直肠癌的危险性有关，而吸烟与增加或降低结直肠癌的危险性无显著相关。3）GHl基因多态与吸烟、饮酒相互作用的分层分析发现，在不吸烟者中，GHlA／A基因型者与T等位基因型者相比，发生结直肠癌的危险性显著降低（性剐和年龄调整OR=0．50，95％CI：0．27～0．93）；在不饮酒者中，GHlA／A基因型者发生结直肠癌的调整OR为0．56（95％CI：0．32～0．99）。结论：T1663A GHl基因的A／A基因型可降低结直肠癌易感性，特别是在不吸烟和不饮酒者中。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与结直肠癌易感性的关系

目的:研究亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T、A1298C多态性与结直肠癌易感性的关系.方法:在江苏省进行了一个病例-对照研究(结直肠癌患者315例,人群对照371例),调查研究对象的生活习惯,抽取静脉血,提取白细胞DNA,采用PCR-RFLP检测研究对象的MTHFR C677T、A1298C基因型.结果:1)男女合计的结直肠癌组、结肠癌组和直肠癌组与对照组之间的MTHFR C677T、A1298C基因型分布频度和等位基因频度差异无统计学意义,MTHFR C677T、A1298C基因多态与结直肠癌、结肠癌和直肠癌的易感性无显著相关.2)在男性中,结肠癌组MTHFR C677T T/T基因型的频度为24.6%,明显高于对照组的14.8%,但差异无统计学意义,X2=3.42,P=0.064.与C677T C等位基因携带者相比,T/T基因型者发生结肠癌的危险性显著升高,其性别、年龄、居住地区及吸烟、饮酒和饮茶习惯调整后的OR为2.15(95%CI:1.07～4.33).与同时携带MTHFR C677T C等位基因和A1298C A/A基因型者相比,男性的MTHFR C677T T/T和A1298C A/A基因型携带者发生结肠癌的危险性显著升高,其调整OR为2.64(95%CI:1.20～5.81),而他们发生直肠癌的危险性则明显降低,(调整OR=0.47,95%CI:0.22～1.03).结论:MTHFR C677T基因多态可以影响男性结、直肠癌的易感性,MTHFR A1298C多态与C677T多态在对男性结、直肠癌易感性的影响中有协同作用.

散发性结直肠癌中微卫星不稳定研究及其临床病理意义

目的检测散发性结直肠癌(SCRC)中的微卫星不稳定状态,并探讨其与临床病理特征的关系。方法应用荧光标记多重PCR法扩增微卫星位点BAT-25和BAT-26,将PCR扩增产物在荧光毛细管中进行电泳,以GenScan3.1软件扫描分析两个微卫星位点状况。结果112例SCRC患者中,BAT-25和BAT-26两个位点均阳性者14例,MSI-H发生率为12.5(14/112);BAT-25单位点阳性者4例,BAT-26单位点阳性者6例;两个位点均阴性者88例,MSS发生率为78.6。SCRC中MSI-H和MSS两组的比较显示:MSI-H者发病部位以近端结肠癌多见(P=0.034),组织学类型以黏液腺癌、印戒细胞癌相对多见(P=0.023),分化程度以低分化癌多见(P=0.039),而MSI-H与MSS两者在性别、年龄、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移等方面差异无统计学意义。结论SCRC中微卫星不稳定是一个常见的分子事件,微卫星不稳定的SCRC好发于右半结肠,具有低分化的倾向。

Ⅱ期散发性结直肠癌中CIMP与临床病理特征和预后的关系

目的分析Ⅱ期散发性结直肠癌患者肿瘤CpG岛甲基化表型(CpG island methylator phenotype,CIMP)与临床病理因素和预后的关系,评价CIMP用于预后判断的可能价值。方法用甲基化特异性PCR技术分析135例Ⅱ期散发性结直肠癌中CACNA1G、IGF2、NEUROG1、RUNX3、SOCS1和MLH1基因甲基化水平,确定肿瘤CIMP状态;分析CIMP与MLH1基因甲基化、患者临床病理因素和预后的关系。结果 135例结直肠癌组织中31例(23.0%)为CIMP+,39例(28.9%)存在MLH1基因高甲基化。CIMP与MLH1基因甲基化呈正相关(P<0.01)。CIMP+多见于年龄≥60岁的患者(P=0.006)和右半结肠癌(P=0.018)。生存分析显示,CIMP+组患者总生存期较CIMP-组为短,但差异无统计学意义(P=0.100);无复发生存期两组间差异无统计学意义(P=0.973)。结论在Ⅱ期散发性结直肠癌中,CIMP与MLH1基因甲基化状态密切相关;CIMP+肿瘤常见于老年和右半结肠癌患者;CIMP可能有助于判断总生存期,但没有独立判断无复发生存期的意义。

转化生长因子βⅡ和c-erbB-2基因在结直肠癌中的表达

采用免疫组化SP法检测结直肠癌组织及癌旁组织中的TGFβⅡ和c erbB 2的表达。结果示 2 6例结直肠癌组织中的TGFβⅡ和c erbB 2的阳性率分别为 5 7.7%和 46.2 % ,癌旁组织中分别为 15 .4%和 7.7%。两指标分别在两种组织间的差异具有显著性。提示TGFβⅡ和c erbB

长链非编码RNA在结直肠癌中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是指长度>200个核苷酸的缺乏编码蛋白质功能的RNA。越来越多的证据表明,lncRNA的表达与包括恶性肿瘤在内的许多主要疾病的发生和发展密切相关。本文从功能及其分子机制等方面就长链非编码RNA在结直肠癌中的相关研究进展予以综述。

hOGG1 Ser326Cys基因多态性与结直肠癌相关性的meta分析

目的探讨h OGG1 Ser326Cys基因多态性与结直肠癌发病风险的相关性。方法检索含有h OGG1Ser326Cys多态性与结直肠癌相关性信息的文献,检索时间为1990年1月至2017年12月,共21篇文献纳入meta分析,涉及6 389例结直肠癌患者和9 918名对照者。采用STATA 14.0软件对纳入研究进行统计分析。结果在显性模型(Cys/Cys+Ser/Cys vs Ser/Ser)中OR(95%CI)为1.13(1.05~1.21),共显性模型(Cys/Cys vs Ser/Ser)中OR(95%CI)为1.25(1.11~1.41),共显性模型(Ser/Cys vs Ser/Ser)中OR(95%CI)为1.11(1.03~1.19),提示Cys326基因型可增加结直肠癌的易感性。分层分析显示,亚洲人群在显性模型(Cys/Cys+Ser/Cys vs Ser/Ser)中OR(95%CI)为1.15(1.01~1.31),在共显性模型(Ser/Cys vs Ser/Ser)中为1.17(1.02~1.34),表示Cys326基因型可增加结直肠癌的易感性;高加索人群在隐性模型(Cys/Cys vs Ser/Cys+Ser/Ser)中OR(95%CI)为1.40(1.16~1.69),在显性模型(Cys/Cys+Ser/Cys vs Ser/Ser)中为1.12(1.03~1.22),在共显性模型(Cys/Cys vs Ser/Ser)中为1.42(1.18~1.7),提示提示Cys326基因型可增加结直肠癌的易感性。在以人群为来源的研究中,各亚组除隐性模型(Cys/Cys vs Ser/Cys+Ser/Ser)外,均提示Cys326基因型可增加结直肠癌的易感性。结论 h OGG1 Ser326Cys多态性与结直肠癌存在相关性,Cys326基因型可增加结直肠癌的发病风险。

全程新辅助治疗局部进展期中低位直肠癌的疗效及对恶性生物学标志基因表达的影响

【目的】探讨全程新辅助治疗局部进展期中低位直肠癌的疗效及对病灶内恶性生物学标志基因表达的影响。【方法】本院收治的74例局部进展期中低位直肠癌患者随机分为对照组和观察组,每组37例。对照组术前进行新辅助治疗,观察组术前进行全程新辅助治疗。比较两组近期抗肿瘤疗效、病灶切除情况,统计两组病灶内生物学标志基因表达情况、药物安全性及预后情况。【结果】观察组客观缓解率高于对照组(P<0.05)。观察组R0切除率高于对照组(P<0.05)。两组手术切除病灶的基质金属蛋白酶-11(MMP-11)、Slug相对表达量均低于治疗前(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05)。两组手术切除病灶的微管相关肿瘤抑制基因1(MTUS1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)、Runx3、p53相对表达量均高于治疗前(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。两组手足综合征、恶心、呕吐、腹泻、周围神经病变发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组3年存活率高于对照组,且两组患者总存活率曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】全程新辅助治疗可提高局部进展期中低位直肠癌患者近期疗效及手术R0切除率,抑制癌细胞侵袭,改善患者预后。

晚期大肠癌患者血清XRCC1基因多态性与奥沙利铂化疗疗效相关性的研究

目的：探讨XRCC1Arg399Gln（G—A）基因多态性与晚期大肠癌对以奥沙利铂为主的化疗敏感性的关系。方法：晚期大肠癌患者99例（Ⅲ期37例，Ⅳ期62例），以奥沙利铂为主的方案化疗，62例Ⅳ期患者2～3个周期后进行临床疗效评价，99例患者统计至疾病进展时间（TTP）。应用TaqMan-MGB探针等位基因分型技术进行基因分型。结果：52．53％为G／G，9．09％为A／A，38．38％为G／A。Ⅳ期62例患者化疗后临床获益率（CR＋PR＋SD）为54．84％，G／G、G／A＋A／A在化疗敏感组与不敏感组中的分布具有统计学意义（χ^2=6．513，P=0．021；OR=3．870，95％CI=1．341～11．172，P=0．012）。99例患者中位TTP7个月，G／G基因型10个月，G／A＋A／A基因型5个月，两者比较差异有统计学意义，χ^2=29．20，P〈0．01。结论：XRCC1 Arg399Gln基因多态性可能与晚期大肠癌患者对奥沙利铂化疗的敏感性与生存时间相关。

二甲肼诱发大鼠大肠癌癌前病变模型的肠道双歧杆菌数量研究

目的:探讨二甲肼(DMH)诱发的大肠癌癌前病变模型大鼠的肠道内双歧杆菌数量与大肠癌癌前病变的关系。方法:应用双歧杆菌属特异性引物实时定量PCR,对实验第3与第9周8只模型组大鼠以及同年龄的7只正常对照组大鼠肠道中的双歧杆菌数量进行检测。结果:第9周的正常对照组大鼠未见明显异常隐窝灶(aberrant crypts foci,ACF),同年龄的模型组平均每只大鼠大肠可形成(37.7±2.6)个ACF。第3周正常对照组与同年龄的模型组大鼠肠道双歧杆菌数量差异无统计学意义,P=0.652;第9周模型组大鼠肠道双歧杆菌数量低于同年龄的正常对照组,但差异无统计学意义,P=0.090。结论:肠道内双歧杆菌的数量与大鼠大肠癌癌前病变没有明显相关性。

CK20 mRNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌病人外周血中CK2 0mRNA的表达及其临床意义。方法 以CK2 0mRNA为靶基因 ,运用逆转录 聚合酶链反应方法 (RT PCR) ,检测 47例Dukes分期结直肠癌病人及肝转移病人外周血中的大肠癌细胞CK2 0mRNA的表达。结果 2 0例大肠癌组织标本 ,均有CK2 0mRNA的表达 ;2 0例正常人外周血中均无CK2 0mRNA表达 ;DukesB ,C ,D期病人外周血中CK2 0mRNA阳性率分别为 2 5 0 % (5/2 0 ) ,41 2 % (7/1 7) ,87 5% (7/8) ,各组之间差异显著 (P <0 .0 5)。肝转移者CK2 0mRNA阳性率为 87 5% (7/8) ,无肝转移者阳性率为 30 8% (1 2 /39) (P <0 .0 1 )。肿瘤直径 >5cm者 ,CK2 0mRNA阳性率为 51 6%(1 6/31 ) ,<5cm者阳性率为 1 8 8% (3/1 6) (P <0 .0 5)。CK2 0mRNA阳性率与肿瘤原发部位、年龄、性别无关 (P >0 .0 5)。结论 以CK2 0mRNA为靶基因 ,运用RT PCR检测外周血中的大肠癌细胞 ,具有高度特异性和灵敏度。大肠癌应视为一种全身性疾病 ,血液播散或转移在其自然病程中应视为一种相对早期事件 ,并非只有到了晚期 ,才发生血行转移。外周血中CK2 0mRNA的表达与肝转移及复发有关 ,检测外周血中CK2

中国北方人HNPCC微卫星不稳定性的研究

目的:通过对遗传性非息肉病性大肠癌(hereditary nonposis colorectal cancer,HNPCC)与普通遗传性大肠癌微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)的检测,为临床筛检HNPCC家系提供依据。方法:选取符合中国人HNPCC诊断标准家系(A组)和普通遗传性大肠癌诊断标准家系(B组)的先证者各20例,另选散发性大肠癌(C组)20例为对照组,用PCR-SSCP的方法对上述肿瘤标本进行MSI检测。结果:A、B、C3组高度微卫星不稳定性(MSI-H)的发生率分别为55.0%(17/20)、40.0%(8/20)和10.0%(2/20),3组之间比较差异有统计学意义,P<0.05。MSI-H在A、B、C3组平均发病年龄分别为43.6、52.2和61.8岁,逐渐升高;右半结肠癌发生率分别为55.0%(11/20)、25.0%(5/20)和0,逐渐下降,差异有统计学意义,P<0.05。所选5个位点中BAT26和BAT25的表达率最高,均为94.1%(16/17)。在MSI-H中,A组低分化腺癌占70.6%(12/17),明显高于B、C两组的4/8和1/2,P<0.05。结论:MSI与HNPCC的临床病理特征高度相关,该方法经济、易行,可作为HNPCC的筛检手段。

癌基因C-myc和抑癌基因p16在大肠癌中的表达

目的 :探讨大肠癌中癌基因 C- myc和抑癌基因 p16的表达及相关性。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测78例大肠癌组织、2 0例癌旁组织和 2 0例大肠腺瘤中 C- myc和 p16的表达 ,并分析它们之间的相关性。结果 :大肠癌中C- myc表达率最高 ,p16表达率最低 (P<0 .0 5 ) ;C- myc阳性表达和 p16阴性表达与大肠癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移和远隔转移密切相关 (P<0 .0 5 ) ;C- myc和 p16之间存在明显的相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :C- myc与 p16表达具有协同性 ,C- myc的表达上调与 p16失活在大肠癌发展中起关键作用。

p16甲基化与大肠癌的发生发展及临床生物学行为的关系

目的 探讨大肠癌癌变过程中 p16蛋白表达和 p16启动子区 Cp G岛甲基化状态的变化、意义及二者的关系。方法 应用免疫组化染色和甲基化特异性 PCR系统检测大肠癌手术切缘黏膜上皮、癌旁组织、腺瘤及大肠癌中 p16蛋白的表达和启动子区 Cp G岛甲基化状态的变化。结果 在大肠癌癌变过程中 p16蛋白表达呈下降趋势 ,其在癌旁组织、腺瘤和癌组织中的表达与手术切缘黏膜上皮相比以及癌与癌旁组织或腺瘤相比差异均有显著性 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;p16甲基化程度呈增加趋势 ,且在各病变阶段甲基化程度与蛋白表达呈明显负相关 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;p16甲基化程度与癌组织分化程度 (P<0 .0 1)、浸润深度 (P<0 .0 5 )和淋巴结转移 (P<0 .0 5 )均密切相关。结论 p16启动子区 Cp G岛异常甲基化在大肠癌癌变过程中起重要作用 ,是 p16失活的主要机制 ,可作为大肠癌早期诊断和判断预后的重要分子指标。

林奇综合征临床病理筛查的相关进展

林奇综合征是一种常染色体显性遗传病,与之相关肿瘤常表现为错配修复蛋白表达缺失和高微卫星不稳定状态,最常见于结直肠癌、女性生殖系统的子宫内膜样癌及透明细胞癌。林奇综合征筛查具有重要临床意义。目前主要筛查策略包括基于免疫组织化学染色观察错配修复蛋白表达情况以及基于毛细管电泳的微卫星不稳定状态检测。这2种方法相互补充,而最终确诊还有赖于相关基因的胚系突变检测。本文拟从林奇综合征相关基因胚系突变在人群发生率、目前筛查方法的敏感度和特异度以及双等位错配修复缺陷等方面的进展进行简要综述,以提高对林奇综合征筛查的综合认识。

结直肠癌K-ras基因突变位点的检测及其临床意义

目的:探讨结直肠癌中K-ras基因突变状态及其与临床病理特征的关系。方法:应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和直接基因测序法检测200例结直肠癌患者癌组织K-ras基因突变状态。将两种检测结果进行对比,并结合临床病理资料分析其意义。结果:200例结直肠癌患者中,RT-qPCR检测出突变63例,突变检出率31.5%;经直接基因测序,测序成功的样品169例,检出突变50例,突变检出率29.6%。其中第12密码子GGT→GAT最常见,占34.9%(22/63);其次是第13密码子GGC→GAC,占28.6%(18/63);第12密码子GGT→CGT最少,全组未见(0/63)。两种方法突变检测一致率为98%。K-ras基因突变与肿瘤分化程度有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移及TNM分期无明显关系(均P>0.05)。结论:RT-qPCR能快速、敏感、准确地检测结直肠癌K-ras基因突变位点,为临床靶向治疗提供可靠的参考依据。

细胞色素P45019基因rs10046位点多态性与结直肠癌易感性研究

目的探讨细胞色素P450 19(CYP19)基因rs10046位点多态性与结直肠癌发生危险性的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型法,对198例结直肠癌患者(病例组)和309例健康体检者(对照组)的CYP19基因rs10046位点多态性进行检测,比较两组CYP19基因rs10046位点基因型频率及相对危险度并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果病例组CYP19基因rs10046位点C/C、C/T、T/T三种基因型频率分别为28.3%、44.4%、27. 3%,对照组分别为17.2%、51. 8%、31.1%;两组间基因型频率比较差异有统计学意义(P <0.05),其中C/T、T/T与C/C比较OR值分别为0.521 (95%CI:0. 330～0.822)和0.532(95%CI:0.322～0. 880)。当按吸烟分层后(将C/T、T/T基因型合并分析),发现不吸烟者C/T、T/T基因型的发病风险显著低于C/C基因型者,OR值0.409(95%CI:0. 210～0.798),而吸烟者没有上述的保护性关联。结论 CYP19基因rs10046位点基因型分布与结直肠癌发病风险有一定关联,突变基因型C/T、T/T结直肠癌的发病风险降低。