鳞柄小奥德蘑多糖对体外培养的巨噬细胞抑制结直肠腺癌细胞生长的影响

【目的】研究鳞柄小奥德蘑多糖对体外培养的巨噬细胞抑制结直肠腺癌细胞生长的影响。【方法】建立巨噬细胞和结直肠腺癌细胞的体外共培养体系,采用四甲基偶氮唑蓝法测定存活细胞数量,荧光探针法标记细胞内NO的合成,Griess法检测NO的分泌量,双抗体夹心法测定诱导型一氧化氮合成酶、肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1分泌量。【结果】在一定的浓度范围内,鳞柄小奥德蘑多糖对结直肠腺癌细胞生长无显著影响,但能显著降低共培养体系中结直肠腺癌细胞的数量(P<0.05),增加巨噬细胞对诱导型一氧化氮合成酶合成(P<0.05)、NO和肿瘤坏死因子-α的分泌量(P<0.05)。【结论】鳞柄小奥德蘑多糖可能通过提高巨噬细胞对诱导型一氧化氮合成酶、NO和肿瘤坏死因子-α的合成或分泌,从而抑制结直肠腺癌细胞的增殖、增强巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的能力,并降低了共培养体系中结直肠腺癌细胞的数量。

2型猪链球菌与人结直肠腺癌细胞(Caco-2)黏附和侵袭作用的研究

选择人结直肠腺癌细胞(Caco-2)作为研究对象,进行Caco-2与2型猪链球菌(SS2)的黏附和侵袭试验,为深入研究猪链球菌的致病机理以及药物的开发提供参考。

人直肠腺癌癌细胞核转录因子κB的表达

目的 探讨癌细胞侵润转移机理。方法 取 8例人直肠腺癌的癌周组织和转移淋巴结以及 5例正常人的直肠组织和淋巴结 ,采用免疫组织化学方法检测其细胞核转录因子 κB(nuclear factorκB,NFκB)的表达。结果 癌周直肠组织中的癌细胞以及转移淋巴结的癌细胞中均有 NFκBp6 5的表达。结论 癌细胞的侵润转移的生物学性质与

蒿甲醚抗BALB/c小鼠结直肠癌血管生成的实验研究

[目的]探讨蒿甲醚对小鼠结直肠癌血管生成的抑制作用。[方法]BALB/c小鼠腋下接种CT-26结直肠癌细胞(2×106个/ml)40只,雌雄各半;随机分为5组,每组8只:低剂量组(蒿甲醚片,每天33.3mg/kg)、中剂量组(蒿甲醚片,每天50.0mg/kg)、中剂量加铁剂组(每天蒿甲醚片50.0mg+硫酸亚铁1.5mg/kg)、高剂量组(蒿甲醚片,每天66.6mg/kg),对照组给予等容量的生理盐水。采用灌胃法持续给药15天,每天1次,末次给药24小时后处死动物。观察记录肿瘤的生长情况,每3天用电子天平称量小鼠的重量,用游标卡尺测量每只小鼠腋下肿瘤长a(mm)和短径b(mm),用Steel公式计算肿瘤体积V(mm3)=0.5ab2。采用免疫组化方法检测肿瘤组织微血管密度。[结果]高、中、低剂量组和中剂量加铁剂组血管计数分别为13±6,31±4,38±5和11±9,生理盐水对照组为49±9;蒿甲醚各治疗组微血管密度均明显低于生理盐水对照组(P<0.05,P<0.01)。[结论]在一定剂量范围内,蒿甲醚能明显抑制小鼠结直肠癌移植瘤血管生成。

神经导向因子在缺血肠道及缺氧细胞中的表达及作用

目的:探讨神经导向因子(Netrin-1)在急性肠系膜缺血(AMI)病人肠道组织及低氧条件下人结直肠腺癌(Caco-2)细胞中的表达及其对肠道功能恢复和微血管新生的作用。方法:采用免疫印迹、免疫组化技术分别检测46例肠系膜上静脉血栓病人缺血肠道Netrin-1表达情况,并分析其表达量与病人主要临床结果之间的关系;培养Caco-2细胞,应用免疫印迹、Real-time PCR和免疫荧光技术检测不同低氧时间下Caco-2细胞Netrin-1mRNA和蛋白的表达。结果:预后较好的病人肠道局部Netrin-1表达量明显高于有严重并发症(30 d内死亡、二次手术探查、全肠外营养(TPN)时间<14 d、脓毒症、需机械通气的ARDS、MODS、SBS)的病人,差异有显著性统计学意义(P<0.05)。同时,Caco-2细胞低氧时间与细胞Nertin-1存在一定相关性,且随着低氧时间逐渐延长,Netrin-1 mRNA及其蛋白表达量逐渐增加。结论:AMI病人肠道局部的Netrin-1可能参与微血管新生及血管网络的构建而保护已缺血肠道,进而减少肠坏死等并发症,促进肠道功能恢复。

人IFN-λ1的克隆表达及其在不同种属细胞中的抗病毒活性分析

目的测定IFN-λ1在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等4种不同种属来源细胞中的抗病毒活性。方法利用RT-PCR技术从人结直肠腺癌细胞(CaCo2)中扩增获得人IFN-λ1 (HuIFN-λ1)基因,然后克隆至真核表达载体pCDNA3.1-Flag-HA中,通过质粒转化、阳性菌落筛选、质粒提取及测序,获得重组质粒pCDNA3.1-HuIFN-λ1;利用脂质体将其转染293细胞,48 h后通过Western blot检测HuIFN-λ1瞬时表达情况,取转染后上清分别作用于CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等四种不同种属来源细胞进行HuIFN-λ1抗病毒活性分析。结果从人结直肠腺癌细胞中扩增获得HuIFN-λ1基因,大小为600 bp,并在293细胞内成功表达HuIFN-λ1,表达产物能抑制VSVG在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK中的增殖,流式细胞仪检测经HuIFN-λ1处理的上述细胞荧光率分别为73.69%、80.12%、71.73%、69.47%。结论重组表达的人IFN-λ1蛋白对4种不同种属来源的细胞均存在一定的抗病毒活性,为研究人IFN-λ1在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机制及其应用奠定了基础。