胶原相关整合素对人巩膜成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的观察胶原相关整合素对人巩膜成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法首先进行人巩膜成纤维细胞原代培养与鉴定,RT-PCR检测胶原相关整合素α1、α2、β1亚单位mRNA表达,Western blot法检测胶原相关整合素α1、α2、β1亚单位蛋白表达,CCK-8检测胶原相关整合素α1β1和α2β1对人巩膜成纤维细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR检测胶原相关整合素α1β1和α2β1对人巩膜成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达水平的影响。结果成功进行了人巩膜成纤维细胞的原代培养。人巩膜成纤维细胞存在胶原相关整合素α1、α2、β1亚单位mRNA及蛋白水平的表达。胶原相关整合素α1β11mg·L-1和4mg·L-1抗体组细胞存活率分别为(86.3±4.5)%和(74.3±6.8)%,与对照组的100%相比,细胞存活率均显著下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且呈浓度依赖性的抑制作用。胶原相关整合素α2β1抗体在1mg·L-1时有抑制作用,细胞存活率为(89.3±12.1)%,但与对照组的100%相比差异无统计学意义(P>0.05),4mg·L-1抗体组细胞存活率下降为(74.5±6.6)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。胶原相关整合素α1β1(4mg·L-1)抗体组Ⅰ型胶原mRNA表达明显减低,是对照组的0.48倍(P<0.05)。胶原相关整合素α2β1抗体1mg·L-1组和4mg·L-1组Ⅰ型胶原mRNA表达分别是对照组的0.94倍和0.87倍,与对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论人巩膜成纤维细胞存在胶原相关整合素α1、α2、β1亚单位的表达。胶原相关整合素α1β1和α2β1影响人巩膜成纤维细胞的增殖。胶原相关整合素α1β1参与人巩膜成纤维细胞胶原的合成。

白细胞介素-23通过无翅基因相关整合位点/β-连环蛋白通路增强舌鳞状细胞癌抗凋亡及耐药能力

目的检测白细胞介素-23(IL-23)在舌鳞状细胞癌组织中表达水平与临床预后的关系,研究舌鳞状细胞癌细胞系SCC9经IL-23处理后抗凋亡及耐药能力的变化。方法免疫组织化学法检测28例舌鳞状细胞癌患者组织中IL-23的表达情况;实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测不同浓度的IL-23处理后,SCC9中无翅基因相关整合位点(Wnt)1及c-myc的m RNA表达水平;结合小分子干扰RNA(si RNA),Western blot法检测IL-23对SCC9细胞的β-连环蛋白(β-catenin)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达影响及潜在机制;甲基噻唑基四唑法检测SCC9细胞在IL-23作用下对顺铂的抗凋亡能力改变。结果舌鳞状细胞癌组织中IL-23表达强度与淋巴结转移、神经侵犯及治疗复发有相关性(P<0.05);IL-23可增强癌细胞抗凋亡蛋白Bcl-2和耐药相关蛋白ABCG2、P-gp的表达,并且与Wnt通路活化程度密切相关;IL-23能够显著加强SCC9细胞对顺铂的抵抗性(P<0.01)。结论 IL-23通过上调舌鳞状细胞癌细胞的Wnt通路增强其抗凋亡及耐药能力。

荷兰医院出现含多重庆大霉素耐药相关整合子的耐环丙沙星肠杆菌

为使患重度中性白细胞减少症的患者减少被细菌感染的危险,往往需给予预防性抗生素治疗(如氟喹诺酮类),称之肠道的选择性净化,但其缺点是最终会导致抗生素耐药性的产生。本文作者发现在荷兰一家医院的血液病房里,从1996年～1999年,耐环丙沙星阴沟肠杆菌和大肠杆菌的发生率分别从<0.5％上升到20.7％及从<0.5％到64％。该院从1998年11月至1999年10月所分离的菌株,环丙沙星对其的MIC为>2mg/mL。根据微扫描步查(walk-A-way)系统得到的常规抗生素耐药谱对所有耐环丙沙星菌株的分类鉴定,以及用琼脂稀释法测定细菌对环丙沙星、头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素。

整合素相关蛋白α2β与ανβ3在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的 研究整合素相关蛋白α2β与ανβ3在宫颈鳞癌组织中的水平表达,并探讨其对疾病进展的意义。方法 收集2017年11月至2018年10月住院且手术切除的68例宫颈鳞癌患者的组织石蜡标本作为观察组,同时期住院行全子宫切除的52例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织石蜡标本作为对照组。通过免疫组织化学法检测2组细胞膜上整合素相关蛋白α2β与ανβ3的表达水平,分析宫颈鳞状细胞癌的生物学行为与宫颈鳞状细胞癌细胞膜上α2β、ανβ3表达的关系。联合2个指标探讨整合素相关蛋白与宫颈癌临床分期及淋巴结转移的相关性。结果 观察组细胞膜上整合素α2β和ανβ3蛋白阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05);2组细胞膜上整合素相关蛋白(α2β和ανβ3)表达在组织学分类、临床分期、淋巴结转移和浸润深度方面差异有统计学意义(P<0.05),在肿瘤大小方面差异无统计学意义(P>0.05)。α2β联合ανβ3阳性表达率与宫颈癌临床分期及淋巴结转移均呈正相关(r=0.941、0.931,P<0.05)。结论 整合素相关蛋白α2β与ανβ3表达在宫颈鳞状细胞癌组织患者标本中呈异常升高,其在疾病的发生发展中可能具有一定作用。同时,整合素相关蛋白与宫颈鳞状细胞癌的临床分期和淋巴结转移密切相关,可作为宫颈鳞癌局部浸润、远处转移的预测因素。

整合素相关激酶在糖尿病肾病的表达及其意义

目的 探讨整合素相关激酶 (Integrin Linked Kinase, ILK) 在糖尿病肾病患者肾组织中的表达及其意义。方法 对3例正常肾组织, 14例糖尿病肾病患者肾穿刺活检标本, 应用免疫组织化学方法检测 ILK和FN在肾组织的阳性表达强度, 并作图像分析处理。结果 在正常肾组织, ILK主要表达于肾小球脏层上皮细胞, 系膜细胞和小管上皮细胞呈弱表达。在糖尿病肾病, ILK表达于肾小球脏层上皮细胞和系膜细胞, 在萎缩变性的肾小管上皮细胞表达增强。在肾小球结节硬化时, ILK表达明显减少。此外, ILK和FN的表达量在糖尿病肾病早、中期成正相关 (P<0 .001), 在糖尿病肾病晚期成负相关 (P<0. 05)。结论 ILK在糖尿病肾病肾组织中表达量显著增加, 并与 FN的表达有一定的相关性, 说明其可能通过促进细胞外基质FN等的积聚, 在糖尿病肾小球硬化过程中发挥重要作用。

整合子及相关基因盒在临床分离铜绿假单胞菌中的分布

目的检测Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子及Ⅰ类整合子相关基因盒在铜绿假单胞菌临床分离株中的分布,分析整合子对细菌耐药性的影响。方法用纸片法对62株临床分离铜绿假单胞菌进行药敏试验;应用多重PCR法检测62株铜绿假单胞菌Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子;对Ⅰ类整合子阳性菌进行整合子相关基因盒检测。结果62株菌中有40株(64.5%)含有Ⅰ类整合子,1株(1.6%)含有Ⅱ类整合子;没有检测到Ⅲ类整合子阳性菌。在Ⅰ类整合子阳性菌中,有26株携带Ⅰ类整合子相关基因盒(65.0%);分离自同一科室的部分菌株携带大小相同的基因盒;Ⅰ类整合子阳性菌株的耐药率高于整合子阴性的菌株。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在铜绿假单胞菌临床菌株中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。

不同地区铜绿假单胞菌第一类整合子和整合子相关基因盒的分布

目的对石家庄、昆明两地分离的铜绿假单胞菌临床菌株进行第一类整合子的分布及整合子相关基因盒携带率的比较分析,探讨第一类整合子在两地菌株分布的差别。方法采用PCR方法筛选检测64株石家庄、昆明两地临床分离的铜绿假单胞菌第一类整合子和及其所携带的整合子相关基因盒。结果64株铜绿假单胞菌临床菌中共有43株为第一类整合子阳性菌(阳性率67.2%);其中石家庄菌株和昆明菌株阳性率分别为71.4%和64.3%,两地铜绿假单胞菌第一类整合子阳性率无显著性差异。第一类整合子阳性铜绿假单胞菌中,石家庄菌株和昆明菌株携带一类整合子相关基因盒的阳性率分别为80.0%和38.%,两地第一类整合子阳性菌中整合子相关基因盒的携带率具有显著性差异(P<0.01);两地菌株携带的基因盒大小不同。结论第一类整合子在铜绿假单胞菌临床菌株中广泛分布,环境的选择压力影响细菌整合子相关基因盒的分布。

肺纤维化形成中整合素相关激酶的表达与上皮-间充质细胞转化

目的观察整合素相关激酶(ILK)在博莱霉素致小鼠肺纤维化中的动态表达,探讨其在肺纤维化中与上皮-间充质细胞转化(EMT)的关系。方法将32只小鼠随机分成正常对照组,博莱霉素(BLM)致肺纤维化组。后者以博莱霉素腹腔注射致肺纤维化,正常对照组仅在相同处理条件下注射生理盐水。治疗的第28天和40天处死动物取出肺组织,用苏木精-伊红(HE)和Massontrichrome染色,分别观察实验动物肺炎症和纤维化的程度,以样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸的量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ILK mRNA表达、免疫组化检测不同实验组小鼠ILK,并同时检测间充质细胞标记物α-平滑肌肌蛋白(α-SMA)和上皮细胞标记物上皮钙粘附素(E-Cad)的表达。结果组织学结果显示小鼠肺组织胶原含量在第28d明显增加,第40d达高峰,羟脯氨酸测定动态增高。与正常对照组比较,肺纤维化组中ILK、α-SMA蛋白表达增高(P<0.01),E-Cad的蛋白表达降低(P<0.01)。RT-PCR结果显示肺纤维化组ILKmRNA的表达显著增高(P<0.01)。ILK的表达不仅与羟脯氨酸的含量成正相关(r分别为0.867、0.886,P均小于0.05),也与α-SMA/E-Cad比值成正相关(r分别为0.830、0.844,P均小于0.05);α-SMA与E-Cad成负相关(r分别为-0.820、-0.833,P均小于0.05)。结论ILK在小鼠肺纤维化中表达与纤维化的程度呈正相关增高,表明其可能是肺纤维化形成的促进因子,且由于ILK与α-SMA/E-Cad比值成正相关,推测ILK在肺纤维化形成中的机制可能与促进EMT有关。

产ESBLs大肠埃希菌整合子及其相关基因盒的研究

目的检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中整合子的整合酶及插入的相关基因盒情况,分析整合子对细菌耐药性的影响。方法采用K-B琼脂扩散法对45株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌进行药敏试验;应用PCR法检测45株产ESBLs大肠埃希菌Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子;对Ⅰ类整合子阳性菌进行整合子相关基因盒检测。结果45株菌中有27株(60.0%)含有Ⅰ类整合子,没有检测到Ⅱ类和Ⅲ类整合子阳性菌。在Ⅰ类整合子阳性菌中,有23株携带Ⅰ类整合子相关基因盒(85.2%),5种不同的基因盒图谱,片段大小在600～2322bp,分离自同一科室的部分菌株携带大小相同的基因盒;Ⅰ类整合子阳性菌株的耐药率高于整合子阴性的菌株。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在产ESBLs大肠埃希菌株中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。

利益相关者整合与高技术企业新产品开发绩效——有调节的中介模型

基于利益相关者理论,探究利益相关者整合对高技术企业新产品开发绩效的影响,以及利益相关者响应能力的中介作用和战略柔性的调节作用。通过对369家高技术企业的研究发现,利益相关者整合对新产品开发绩效具有正向影响,利益相关者响应能力在利益相关者整合与新产品开发绩效关系中起中介作用,战略柔性正向调节利益相关者整合与利益相关者响应能力的促进作用。在此基础上,提出高新技术企业提升新产品开发绩效的管理建议。

整合素相关蛋白与免疫

CD47分子又称整合素相关蛋白,是一种多次跨膜的糖蛋白,在机体的各种细胞及组织上均有表达。CD47分子通过与其整合素配体、信号调节蛋白α(SIRP-α)、凝血酶敏感蛋白(TSP-1)的相互作用,对机体发挥着重要的调控作用。其参与调控细胞的粘附与增殖,激活血小板,抑制红细胞的清除等生理过程,并通过诱导淋巴细胞凋亡,协同刺激T细胞活化,抑制T细胞向Th1型细胞分化,以及影响树突状细胞(DC)的分化成熟及细胞因子的分泌,对免疫系统发挥着重要的调节作用,对诱导免疫耐受、防治移植物抗宿主病(GVHD)及自身免疫性疾病均有重要的意义。

整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)抗体的制备及其特异性分析

以整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)全蛋白为抗原,采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫,共免疫6次,最终获得ILKAP抗血清.采用Protein A agrose柱纯化抗体,获得ILKAP的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法测定ILKAP多克隆抗体的滴度为1∶1 600.免疫荧光分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体在细胞水平应用效果较好.

含三磷腺苷的Hanks平衡盐溶液处理张氏肝癌细胞诱导新去整合素金属蛋白酶相关蛋白的表达

目的研究不同条件下张氏肝癌细胞中去整合素金属蛋白酶(ADAMs)及ADAM相关蛋白的表达和功能改变。方法用热激、含有三磷腺苷(ATP)的Hanks平衡盐溶液(HBSS)处理张氏肝癌细胞,Western blotting检测AD-AM相关蛋白,对处理过的细胞构建cDNA文库,用ADAMs通用抗体对文库进行免疫筛选,对阳性克隆的插入序列测序并进行体外表达,分析蛋白的性质。结果包含ATP的HBSS处理张氏肝癌细胞诱导出2个新的相对分子质量为30 000和50 000的ADAM相关蛋白,热激处理未出现相同的反应。对处理细胞构建了cDNA文库,筛选出1个新的有碱性蛋白酶活性的ADAM相关蛋白。结论含有ATP的HBSS处理张氏肝癌细胞可以诱导出1种新的ADAM相关蛋白。

企业合并相关整合的思考

随着社会市场经济的发展,现在企业之间的竞争日益激烈.所以,近年来,企业合并成为各个企业提高市场份额的手段.然而,企业合并不单单是多个内外要素进行简单的综合后就能达到理想的合并效果,而是要通过对经营战略、组织制度、财务管理、企业文化等多个方面进行有效整合,才能实现企业合并的最佳效果.本文对此进行了具体阐述,并提出了一些有利于企业合并相关整合的具体策略,从而可以帮助企业在合并后快速投入生产.

靶向CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合治疗策略在恶性肿瘤治疗中的应用及其作用机制研究进展

阻断CD47/SIRPα抑制性信号传导是目前最受关注的免疫检查点抑制策略之一,然而单独靶向CD47/SIRPα信号轴具有血液毒性高、疗效较弱等缺陷。靶向CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合靶向治疗性抗体、适应性免疫疗法、化疗、放疗、光热免疫疗法等治疗方式,可通过多种通路激活免疫系统,充分发挥抗肿瘤效应。靶向CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合靶向治疗性抗体,可以增加肿瘤的选择性活性,而且还可减少红细胞毒性。CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合适应性免疫疗法的双重免疫疗法,可以最大程度遏制肿瘤细胞的免疫逃逸,可能成为最有效的联合治疗策略。靶向CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合化疗、放疗能产生更强的抗肿瘤效果,有助于消除未知部位的微转移灶和提高局部及远处的无复发生存率。同时,靶向CD47/SIRPα信号轴免疫疗法联合光热免疫疗法可以直接消除肿瘤并诱导持续免疫反应,杀死残留或转移性肿瘤,并通过免疫记忆细胞的产生来预防癌症复发,是未来联合治疗策略的方向。

大肠埃希菌中Ⅰ类整合子耐药基因的分析

目的对临床分离大肠埃希菌株携带的Ι类整合子及相关耐药基因进行筛选和分析,探讨Ι类整合子在大肠埃希菌耐药中的作用。方法对43株大肠埃希菌临床分离株做药敏试验;采用PCR扩增、DNA测序、DNA序列比对的方法对其携带的Ι类整合子相关耐药基因进行分析。结果43株大肠埃希菌分离株对10种抗菌药物的耐药率依次为亚胺培南4.7%、阿米卡星18.6%、头孢他啶、27.9%、头孢吡肟37.2%、头孢呋辛55.8%、复方磺胺甲噁唑58.1%、妥布霉素74.4%、庆大霉素79.1%、头孢噻肟81.4%和哌拉西林83.7%。在43株大肠埃希菌分离株中有25株含有Ι类整合子,其中18株携带整合子相关耐药基因,如介导对磺胺类和氨基糖苷类药物的耐药基因等;某些菌株携带的整合子相关耐药基因相同。结论Ι类整合子在大肠埃希菌中广泛存在,整合子相关耐药基因在该菌耐药性的形成和播散中发挥作用。

产金属酶铜绿假单胞菌携带Ⅰ类整合子的研究

目的研究产金属酶铜绿假单胞菌携带Ⅰ类整合子及其基因盒的情况。方法收集铜绿假单胞菌68临床株,进行金属酶IMP-1、VIM基因的PCR检测,选取阳性株再作第Ⅰ类整合酶基因的PCR检测,然后选取整合酶基因阳性株进行Ⅰ类整合子相关基因盒的PCR检测。结果PCR检测出68株铜绿假单胞菌中的1株同时含有IMP-1基因和Ⅰ类整合子基因盒;55株含有VIM基因,其中26株含有Ⅰ类整合酶基因,在这26株中只有18株含有Ⅰ类整合子基因盒,根据电泳条带可分为5种类别。结论首次在中国西南地区发现产IMP-1并同时带有Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌。Ⅰ类整合子在产金属酶铜绿假单胞菌中分布广泛,基因盒携带率为69.2%,对细菌的耐药性传播具有重要意义。

CD47与高血压性脑出血临床表现的相关性研究

目的研究整合素相关蛋白(CD47)的表达与高血压性脑出血(HICH)患者脑水肿程度、神经功能损伤以及临床预后的关系。方法收集2016年9月至2018年4月在临沂市人民医院就诊的HICH患者12例为HICH组,取其手术时的血肿液和外周血,测量患者手术前的脑出血体积、水肿体积,同时进行GCS及NIHSS评分,发病3个月后进行mRS及NIHSS评分。于临沂市人民医院收集12例健康体检者为健康对照组,取其空腹外周血,利用ELISA方法检测HICH患者血肿液、外周血及健康对照者外周血中CD47的浓度。根据HICH组血肿液中CD47的浓度分为低浓度组和高浓度组,分析CD47的表达与HICH患者脑水肿程度、神经功能缺损以及临床预后的相关性。结果 HICH患者的血肿液中CD47的浓度高于患者外周血及健康对照组外周血(P<0.0001)。CD47高浓度组与低浓度组相比,HICH病灶周围水肿程度明显较重、GCS评分明显较低、NIHSS评分明显较高(P<0.05);发病3个月后mRS评分明显较高、NIHSS评分明显较高(P<0.05)。结论 HICH后血肿液中的CD47表达明显升高,并且浓度越高脑水肿体积越大、神经功能损伤越重、发病3个月后神经功能缺损程度也越重,即CD47表达越高,病情越重,预后越差。

CD47生理功能的研究

CD4 7又叫整合素相关蛋白 (IAP) ,是一个 5 0kD的膜糖蛋白 ,表达广泛。本文综述了CD4 7作为整合素相关分子 ,调节一系列依赖整合素的细胞功能 ;CD4 7与血小板反应蛋白 (TSP)结合 ,调节细胞粘附、移动、激活和血小板聚集 ;CD4 7是人抑制性受体信号调节蛋白 (SIRP)的胞外配体 ,引发负性调节信号 ;CD4 7是T细胞活化的共刺激因子 ,活化T细胞凋亡过程 ,诱导T细胞无反应性 ,加强TCR信号传导的效率 ;CD4 7是Rh抗原复合体组成成分之一 ;CD4 7参与基质支持的红细胞生成。本文还讨论了CD4 7作为红细胞自身标志 ,在溶血中发挥作用 ,这将为临床认识。