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细胞毒素相关蛋白基因A与胃粘膜组织恶变的研究 被引量:7
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作者 阎小君 张沥 +2 位作者 韩锋产 张玲霞 苏成芝 《胃肠病学》 1997年第3期158-161,共4页
目的:研究细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)阳性幽门螺杆菌(Hp)在胃粘膜组织恶性化转变中的作用。方法:以含Hp细胞毒素相关蛋白基因A的质粒(P^(MC3))为外参照品,在微孔板上对PCR扩增cagA的产物作探针杂交及辣根过氧化物酶酶促显色分析,定量... 目的:研究细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)阳性幽门螺杆菌(Hp)在胃粘膜组织恶性化转变中的作用。方法:以含Hp细胞毒素相关蛋白基因A的质粒(P^(MC3))为外参照品,在微孔板上对PCR扩增cagA的产物作探针杂交及辣根过氧化物酶酶促显色分析,定量榆测不同组织中cagA阳性Hp。结果:往50份Hp尿素酶B基因阳性的临床标本中检测到28份cagA亦阳性(56%),其中5份浅表性胃炎组织,12份癌前病变组织及11份胃癌组织。浅表性胃炎组织cagA阳性的Hp感染率(31%)及每毫克组织感染的平均拷贝数(12.8)均显著低于(P<0.01或P<0.05)癌前病变组织(60%;77.1)或胃癌组织(79%;57.6),二者在后两种组织间均无显著性差别(P>O.05)。结论:cagA阳性的Hp感染可能有助于胃粘膜组织的恶性化转变,这种转变与cagA阳性Hp的感染量有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白基因a 定量聚合酶链反应 胃癌
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定量检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A方法的建立
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作者 阎小君 张沥 +2 位作者 韩锋产 江梅 苏成芝 《胃肠病学》 1997年第3期187-190,共4页
目的:建立定量检测细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)阳性幽门螺杆菌(Hp)的方法。方法:利用含Hp cagA的质粒(P^(MC3))作为外参照品,在微孔板中对PCR扩增cagA的产物进行辣根过氧化物酶标记的探针杂交及酶促显色。结果:当PCR反应体系中原始模板... 目的:建立定量检测细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)阳性幽门螺杆菌(Hp)的方法。方法:利用含Hp cagA的质粒(P^(MC3))作为外参照品,在微孔板中对PCR扩增cagA的产物进行辣根过氧化物酶标记的探针杂交及酶促显色。结果:当PCR反应体系中原始模板为1~10~5拷贝、循环次数小于或等于25时,原始模板以相对固定的指数形式增加,在该范围内适宜定量分析。通过对20份已知Hp菌株cagA的检测符合率达100%,观察结果的敏感度较电泳法提高了200倍。定量检测不同胃粘膜组织中cagA阳性Hp,检出底限为6拷贝/mg组织。结论:本方法特异性强,敏感度高,对研究Hp与消化道疾病的关系有实用价值。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白基因a 定量聚合酶链反应
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不同饲育方式对家蚕产卵量及卵黄蛋白相关基因表达的影响
3
作者 李琼艳 范永慧 +2 位作者 李继娅 廖鹏飞 刘敏 《山东农业科学》 北大核心 2023年第12期156-162,共7页
为探究人工饲料与桑叶不同搭配饲育方式对家蚕产卵情况及卵黄蛋白相关基因表达的影响,本研究采用全龄桑叶育(Mul1-5)、1~2龄人工饲料育+3~5龄桑叶育(Art1-2)、1~3龄人工饲料育+4~5龄桑叶育(Art1-3)、1~4龄人工饲料育+5龄桑叶育(Art1-4)... 为探究人工饲料与桑叶不同搭配饲育方式对家蚕产卵情况及卵黄蛋白相关基因表达的影响,本研究采用全龄桑叶育(Mul1-5)、1~2龄人工饲料育+3~5龄桑叶育(Art1-2)、1~3龄人工饲料育+4~5龄桑叶育(Art1-3)、1~4龄人工饲料育+5龄桑叶育(Art1-4)4种饲育方式饲养菁松×皓月,调查不同饲育方式下的造卵量、产卵量、百粒卵重及卵黄蛋白基因Vg、30Kc19、ESP、VgR的表达情况。结果表明,Mul1-5的24 h产卵量、造卵量及百粒卵重均最高,造卵数量和百粒卵重都随人工饲料饲喂龄期延长呈现下降趋势;Mul1-5和Art1-2的造卵量显著高于Art1-3和Art1-4,Mul1-5的百粒卵重显著高于其他3个组合。利用荧光定量PCR方法测定了4种饲育方式下卵黄蛋白相关基因的表达情况,结果显示,Vg从5龄第7天开始到整个蛹期结束持续表达,整体表现为Art1-3的表达量最高,Art1-2的次之,Art1-4的最低;30Kc19在5龄第7天及上蔟第1天表达量较高,并分别以Art1-2和Art1-3方式下最高,蛹期基本不表达;ESP和VgR在整个蛹期都有表达,但以第5~8天的表达量较高,且第5~7天以Art1-4的最高,第8天以Art1-3的最高。综合来看,人工饲料育替代桑叶育的龄期越长,家蚕产卵数量和百粒卵重下降越明显,卵黄蛋白相关基因的表达受影响越大,这可能与人工饲料的配方、家蚕对人工饲料的吸收利用程度及人工饲料育后家蚕的体质有关,具体影响机制还需进一步研究。 展开更多
关键词 家蚕 人工饲料 饲育方式 产卵量 造卵量 卵黄蛋白相关基因
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刺鼠基因相关蛋白在代谢性疾病中的研究进展
4
作者 钟鑫媛 卢宇 +1 位作者 侯佳妮 龚浩 《河北医学》 CAS 2023年第4期696-698,共3页
当体内的某种代谢物质由于生成、利用或排泄异常导致其在人体内增加或减少引起的疾病称为代谢性疾病。近年来,随着社会经济高速发展,人们生活方式及饮食结构较前发生了巨大变化,这也导致了我国代谢性疾病的患病率迅速升高,包括肥胖、非... 当体内的某种代谢物质由于生成、利用或排泄异常导致其在人体内增加或减少引起的疾病称为代谢性疾病。近年来,随着社会经济高速发展,人们生活方式及饮食结构较前发生了巨大变化,这也导致了我国代谢性疾病的患病率迅速升高,包括肥胖、非酒精性脂肪肝、高脂血症、糖尿病及高尿酸血症等。这些代谢性疾病不仅加重了患者的身体负担,更进一步增加动脉粥样硬化、高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病等心血管疾病及肝肾疾病的风险[1],对人类健康及社会发展造成了严重威胁。因此,代谢性疾病及其相关并发症的防治对于人类健康及社会进步有着重大意义。刺鼠基因相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)是一种调节机体能量平衡及基础代谢的新型因子,与摄食、糖脂代谢等密切相关。本文现就AgRP在代谢性疾病中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 刺鼠基因相关蛋白 糖代谢 肥胖 脂肪代谢
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冠状动脉粥样硬化性心脏病患者细胞毒素相关蛋白基因A幽门螺杆菌感染状况研究 被引量:13
5
作者 张丽 张保朝 +3 位作者 王璐 郭遂成 常方圆 丁春丽 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期2928-2931,共4页
目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者细胞毒素相关蛋白基因A(CagA)幽门螺杆菌(HP)感染状况,为冠状动脉粥样硬化性心脏病的防治提供参考。方法选取2015年6月-2016年6月诊治的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者100例(冠心病组)和同期门诊行... 目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者细胞毒素相关蛋白基因A(CagA)幽门螺杆菌(HP)感染状况,为冠状动脉粥样硬化性心脏病的防治提供参考。方法选取2015年6月-2016年6月诊治的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者100例(冠心病组)和同期门诊行健康体检的健康人群100例(对照组),采用酶联免疫吸附法检测HP-IgG抗体、抗HP-CagA-IgG抗体,14C呼气试验检测HP。结果冠心病组HP感染、CagA HP感染分别为75例(75.00%)、51例(51.00%),对照组分别为12例(12.00%)、2例(2.00%),比较差异有统计学意义(P<0.05);冠心病组1-2支冠状动脉病变患者HP感染、CagA HP感染分别有53例、31例,感染率分别为69.74%、40.79%,≥3支病变患者分别有22例、20例,感染率分别为91.67%、83.33%,比较差异有统计学意义(P<0.05);冠心病组稳定性冠心病患者HP感染、CagA HP感染分别为33例(63.46%)、17例(32.69%),急性冠脉综合症患者分别为42例(87.50%)、34例(70.83%),比较差异有统计学意义(P<0.05);冠心病组冠状动脉轻中度狭窄患者HP感染、CagA HP感染分别为49例(68.06%)、29例(40.28%),重度狭窄患者分别为26例(92.86%)、22例(78.57%),比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论冠状动脉粥样硬化性心脏病患者CagA HP感染率高,CagA HP感染与患者病变严重程度密切相关。 展开更多
关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 细胞毒素相关蛋白基因a 幽门螺杆菌
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乳腺癌肿瘤转移相关基因1蛋白及转化生长因子-β1蛋白的表达及临床意义
6
作者 陈琴 《检验医学与临床》 CAS 2023年第19期2814-2816,2821,共4页
目的探讨乳腺癌组织肿瘤转移相关基因(MTA)1蛋白及转化生长因子(TGF)-β1蛋白的表达及临床意义。方法选择2019年8月至2021年7月于该院行乳腺癌根治术及淋巴结清扫术的乳腺癌患者60例作为研究对象,对所有患者均进行MTA1蛋白、TGF-β1蛋... 目的探讨乳腺癌组织肿瘤转移相关基因(MTA)1蛋白及转化生长因子(TGF)-β1蛋白的表达及临床意义。方法选择2019年8月至2021年7月于该院行乳腺癌根治术及淋巴结清扫术的乳腺癌患者60例作为研究对象,对所有患者均进行MTA1蛋白、TGF-β1蛋白检测。分析MTA1蛋白、TGF-β1蛋白在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达情况,MTA1蛋白、TGF-β1蛋白的表达与乳腺癌的病理特征的关系,以及乳腺癌组织中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白间表达的相关性。结果乳腺癌组织中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白阳性率高于正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同淋巴结转移情况患者的MTA1蛋白、TGF-β1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同人类表皮生长因子受体2表达情况的患者TGF-β1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,MTA1蛋白、TGF-β1蛋白在乳腺癌表达中呈负相关(r=-0.367,P=0.003)。结论乳腺癌中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白的表达水平对判断患者病情具有重要作用,同时可为治疗方案制订提供有力依据,临床应用价值较高。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤转移相关基因1蛋白 转化生长因子-β1蛋白
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定量检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A方法的建立 被引量:2
7
作者 阎小君 张沥 +2 位作者 韩锋产 江梅 苏成芝 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第11期739-741,共3页
目的建立定量检测幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)的方法。方法以含HpcagA片段的质粒(pMC3)作为外参照品,在微孔板中对聚合酶链反应(PCR)扩增cagA的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交... 目的建立定量检测幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白基因A(cagA)的方法。方法以含HpcagA片段的质粒(pMC3)作为外参照品,在微孔板中对聚合酶链反应(PCR)扩增cagA的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交及酶促显色以定量检测cagA阳性Hp。结果当PCR反应体系中原始模板为1~105拷贝,循环次数小于或等于25时,原始模板以相对固定的指数形式增加,在该范围内适宜定量分析。通过对20份已知Hp菌株cagA的检测,符合率达100%,观察结果的敏感度较电泳法提高了200倍。定量检测不同胃黏膜组织中cagA阳性Hp,检出底线为6拷贝/毫克组织。结论本方法特异性强,敏感度高。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素 相关蛋白基因a 胃疾病
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脂肪分化相关蛋白基因多态性与优质鸡屠宰性状和肌内脂肪含量的相关性研究 被引量:7
8
作者 赵小玲 刘益平 +3 位作者 李亮 蒋小松 杜华锐 朱庆 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1483-1490,共8页
对脂肪分化相关蛋白(Adipocyte Differentiation-Related Protein,ADFP)基因的外显子进行SNPs检测,探讨其作为鸡脂肪性状候选基因的可能性。实验以四川省畜牧科学研究院和大恒家禽育种有限公司培育的优质肉鸡新品系为素材,采用PCR-SSCP... 对脂肪分化相关蛋白(Adipocyte Differentiation-Related Protein,ADFP)基因的外显子进行SNPs检测,探讨其作为鸡脂肪性状候选基因的可能性。实验以四川省畜牧科学研究院和大恒家禽育种有限公司培育的优质肉鸡新品系为素材,采用PCR-SSCP的方法进行SNPs检测和基因型的分析。结果找到3个SNPs位点:4 079位由A→T(位点A)、4 843位由C→T(位点B)和7 070位由A→G(位点C)。单位点基因型对屠宰性状的遗传效应分析表明,位点A的基因型对腿肌率、腹脂重、腹脂率和肌内脂肪含量有显著性影响(P<0.05),位点B的基因型对活重和屠体重均有显著性影响(P<0.05),位点C的基因型对胸肌重和肌内脂肪含量有显著性影响(P<0.05),对胸肌率有极显著性影响(P<0.01)。初步推断ADFP基因可能是影响鸡脂肪性状的主效基因或与主效基因连锁,推测可以利用多态位点A和C对鸡腹脂重、腹脂率和肌内脂肪含量进行标记辅助选择。 展开更多
关键词 脂肪分化相关蛋白基因 屠宰性状 肌内脂肪含量 SNPS
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膀胱癌相关蛋白基因对HeLa细胞增殖的抑制作用 被引量:8
9
作者 左泽华 赵旻 +2 位作者 刘娟 魏芸 伍欣星 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期811-817,共7页
背景与目的:通过癌基因与抑癌基因的基因分类表达芯片筛选发现,在宫颈癌组织中,膀胱癌相关蛋白基因(bladdercancerrelatedprotein,BLCAP)表达降低最为明显。提示该基因可能与宫颈癌发生相关。本研究旨在探讨该基因对宫颈癌细胞增殖的抑... 背景与目的:通过癌基因与抑癌基因的基因分类表达芯片筛选发现,在宫颈癌组织中,膀胱癌相关蛋白基因(bladdercancerrelatedprotein,BLCAP)表达降低最为明显。提示该基因可能与宫颈癌发生相关。本研究旨在探讨该基因对宫颈癌细胞增殖的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测54例宫颈癌组织和25正常宫颈组织中BLCAP基因的表达情况。制备BLCAP全长cDNA并克隆到真核表达载体pLXSN上,稳定转染至宫颈癌细胞系HeLa中,细胞计数方法和克隆形成实验观察稳定转染BLCAP基因的HeLa细胞的细胞形态、细胞增殖及集落形成能力;利用DNAladder检测BLCAP基因引起HeLa细胞凋亡情况;裸鼠体内抑瘤实验观察BLCAP基因的抑瘤作用。结果:BLCAP在宫颈癌组织中不表达或低表达,与正常宫颈组织相比明显降低;转染BLCAP基因的HeLa细胞倍增时间为69.4h,较未转染HeLa细胞(27.5h)和转染空载体的HeLa细胞(30.2h)明显延长,差异有显著性(P﹤0.05);细胞同步对比实验显示,转染BLCAP基因的HeLa细胞的克隆形成率明显低于未转染HeLa细胞(t=5.98,P<0.01)和转染空载体的HeLa细胞(t=4.69,P﹤0.01);HeLa细胞在转染BLCAP基因后出现了DNA梯形条带。将转染BLCAP基因的HeLa细胞、转染空载体的HeLa细胞和未转染的HeLa细胞分别注射入BALB/c裸鼠体内,30天后处死动物,剥离肿瘤组织并称重,各组平均瘤重分别为1.015g、1.612g和1.530g,转染BLCAP基因的细胞抑瘤能力与两对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。肿瘤病理切片结果显示,稳定转染BLCAP基因的HeLa细胞所成肿瘤组织,癌组织被纤维组织包裹,边缘整齐,未侵犯肌层和脂肪组织,部分癌巢边缘癌细胞可见散在类似凋亡细胞的细胞群。而未转染质粒组及转染空载体pLXSN质粒组所成肿瘤组织癌组织突破肌层呈浸润性生长,癌巢边缘癌细胞病理性核分裂像多见。结论:BLCAP基因在宫颈癌组织中表达下调,对HeLa细胞的增殖具有明显抑制作用,为宫颈癌相关候选抑癌基因。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 HELA细胞 膀胱癌相关蛋白基因 抑癌基因
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小儿恶性肿瘤化疗前后外周血多药耐药基因、多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因的变化及临床意义 被引量:7
10
作者 邓晓斌 王珊 +3 位作者 邹琳 李长春 章均 欧阳军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1087-1090,共4页
目的探讨实体恶性肿瘤化疗患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中多药耐药基因(multi-drug resistance1,MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(multi-drug resistance-associated protein1,MRP1)、肺耐药蛋白基因(l... 目的探讨实体恶性肿瘤化疗患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中多药耐药基因(multi-drug resistance1,MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(multi-drug resistance-associated protein1,MRP1)、肺耐药蛋白基因(lung resistance protein,LRP)的表达量及其与临床化疗的关系。方法应用实时荧光定量PCR(real-time fluores-cence quantitative PCR,FQ-PCR)技术,检测患儿化疗前后外周血和手术切除新鲜冻存组织,以及对照组外周血中MDR1、MRP1、LRP的mRNA表达量。结果所有化疗患儿外周血MDR1表达量与同期手术切除的肿瘤组织MDR1表达量存在正相关(r=0.894,P=0.000);化疗前后外周血MDR1表达量变化与肿瘤大小变化间存在负相关:神经母细胞瘤(r=-0.733,P=0.000),卵黄囊瘤(r=-0.874,P=0.000),淋巴瘤(r=-0.617,P=0.005);化疗前外周血MDR1表达量与首次化疗后相应肿瘤标志物变化大小呈负相关:神经母细胞瘤尿香草杏仁酸(VMA)(r=-0.440,P=0.046),卵黄囊瘤甲胎蛋白(AFP)(r=-0.831,P=0.000),淋巴瘤乳酸脱氢酶(LDH)(r=-0.495,P=0.031)。随着化疗次数的增加MDR1表达量增加(P<0.05)。结论动态检测患儿化疗前后PBMCs中MDR1mRNA水平对化疗疗效及预后的判定有一定的指导意义,可在一定程度上指导化疗方案的修订。 展开更多
关键词 小儿实体恶性肿瘤 多药耐药基因 多药耐药相关蛋白基因 肺耐药蛋白基因 外周血 荧光定量PCR
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多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因在肝细胞癌中的表达及临床意义 被引量:11
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作者 王百林 杨海燕 +4 位作者 翟淑萍 陈孝平 仲永 张庆业 孟磊 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2005年第2期95-99,共5页
  目的 研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法 采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果 MRP和...   目的 研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法 采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果 MRP和LRP在 3种组织中均有表达,HCC组织中其基因表达显著高于其他组织 (P< 0. 0 5 )。HCC中两种基因表达呈正相关 (r= 0. 3 1 2, P <0. 0 5; r= 0. 3 2 8, P< 0. 0 5 );其表达与HCC的分化程度有关 (P< 0. 0 5 )。并且其表达阳性组患者化疗后AFP有效率和平均生存期分别高于和长于阴性组 (P< 0. 0 5 ),但LRP与平均生存期无关 (P> 0. 0 5 )。结论 HCC多药耐药 (MDR)与两种基因表达有关,起源于内源性耐药;检测其表达对预测化疗耐药具有指导意义;MRP可能与预后有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤/病理学 肝细胞瘤/病理学 基因表达 多药耐药相关蛋白基因 肺耐药蛋白基因
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协同抑制番茄ACO1对果实成熟及病程相关蛋白基因表达的影响 被引量:6
12
作者 胡宗利 陈国平 +2 位作者 吕丽娟 陈绪清 GRIERSO NDonald 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期558-565,共8页
目的探讨协同抑制番茄ACO1基因对果实成熟和病程相关蛋白基因表达、内源乙烯生物合成及果实耐贮性的影响。方法采用PCR或RT-PCR方法克隆了番茄ACC氧化酶1、ACC氧化酶3、EBF1、PR1、PR5以及NP24基因片段,并以此制备探针,以协同抑制ACO1... 目的探讨协同抑制番茄ACO1基因对果实成熟和病程相关蛋白基因表达、内源乙烯生物合成及果实耐贮性的影响。方法采用PCR或RT-PCR方法克隆了番茄ACC氧化酶1、ACC氧化酶3、EBF1、PR1、PR5以及NP24基因片段,并以此制备探针,以协同抑制ACO1的转基因番茄和野生型番茄为研究对象,进行Northern杂交,同时测定了伤害叶片和果实的乙烯释放量,并进行了果实贮藏试验等。结果Northern杂交结果表明,番茄ACO1基因表达被抑制后,与果实成熟相关基因LeACO3和LeEBF1,以及病程相关蛋白基因LePR1、LePR5和LeNP24的表达量急剧降低。乙烯释放量测定试验和果实贮藏试验结果表明,协同抑制LeACO1番茄完整和受伤叶片以及完整果实内源乙烯释放量相对于野生型番茄大大减少,成熟果实贮藏时间延长。结论协同抑制番茄ACO1基因表达的同时,与果实成熟相关基因和病程相关蛋白基因的表达也不同程度地受到抑制,而且其内源乙烯生物合成减少,果实耐贮性增强。 展开更多
关键词 协同抑制 番茄ACO1 果实成熟 病程相关蛋白基因
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人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达 被引量:8
13
作者 罗阳 张学 +3 位作者 刘莹 姜莉 刘兴元 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期191-196,共6页
为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了... 为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 . 展开更多
关键词 人牛精浆蛋白相关基因 CDNA克隆 定位 表达
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聚集相关蛋白基因与转化生长因子β1对肺癌相关生物材料表皮葡萄球菌生物膜形成的影响 被引量:3
14
作者 陈颖 雷玉洁 +4 位作者 黄云超 饶钟鸣 叶联华 赵光强 王小燕 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第4期308-314,共7页
背景与目的研究聚集相关蛋白(accumulation-associated protein,Aap)基因及转化生长因子β1(TGF-β1)对肺癌相关生物材料表皮葡萄球菌(SE)生物膜形成的影响。方法种属鉴定分离临床肺癌患者植入材料感染表皮葡萄球菌株,PCR法检测生物膜... 背景与目的研究聚集相关蛋白(accumulation-associated protein,Aap)基因及转化生长因子β1(TGF-β1)对肺癌相关生物材料表皮葡萄球菌(SE)生物膜形成的影响。方法种属鉴定分离临床肺癌患者植入材料感染表皮葡萄球菌株,PCR法检测生物膜形成相关基因Aap,检测表皮葡萄球菌Aap基因株生物形成能力。密度梯度法提取非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞,与人肺腺癌细胞A549在不同浓度(10 ng/mL,20 ng/mL,40 ng/mL)TGF-β1共培养30 h后,取上清液分别加入SE Aap+株、SE Aap-株下与医用硅橡胶培养30 h,半定量粘附试验测各组细菌生物膜形成的情况,扫描电镜观察材料表面生物膜微观情况。结果 Aap基因的与表皮葡萄球菌生物膜的形成密切相关(P<0.01)。在(10 ng/mL,20 ng/mL,40 ng/mL)TGF-β1浓度组医用硅橡胶表面SE Aap+生物膜的厚度大于空白组(P<0.01)。SE Aap+株在TGF-β1浓度组间生物膜的厚度无明显差异(P>0.05)。在不同浓度TGF-β1因子刺激下SE Aap-株均不能形成明显细菌生物膜。结论在肺癌患者植入材料引起感染中表皮葡萄球菌Aap基因表达阳性株较易形成细菌生物膜,TGF-β1对SE Aap阳性形成细菌生物膜有一定促进作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 医用硅橡胶 表皮葡萄球菌 生物膜 聚集相关蛋白基因 TGF—p1
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不结球白菜病程相关蛋白基因BcPR5的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 肖栋 韦艳萍 +1 位作者 李英 侯喜林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期640-646,共7页
[目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因Bc PR5的结构与表达特征。[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到Bc PR5基因的全长c DNA序列。采用RT-q PCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(Me J)和脱落酸... [目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因Bc PR5的结构与表达特征。[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到Bc PR5基因的全长c DNA序列。采用RT-q PCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(Me J)和脱落酸(ABA)等激素处理条件下的表达模式。SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征。[结果]Bc PR5基因的c DNA全长为954 bp,其中开放阅读框长度为732 bp,共编码243个氨基酸,相对分子质量为26.1×103,理论等电点是9.3。氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜Bc PR5基因与同属植物的进化关系相近,其中与大白菜第6号染色体上的基因同源性最高(100%)。RT-q PCR分析表明,抗病品种‘苏州青’和感病品种‘矮脚黄’在霜霉病菌和非生物胁迫(SA、Me J和ABA)诱导过程中,Bc PR5基因的表达量均呈先升高后降低的趋势,且抗病品种高于感病品种。原核表达结果表明,该蛋白在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG诱导4 h后能实现融合蛋白的高效表达。[结论]Bc PR5在不结球白菜抗霜霉病防御反应中发挥着重要作用,研究结果为该基因的功能验证提供理论基础。 展开更多
关键词 不结球白菜 病程相关蛋白基因(PR5) 霜霉病菌 实时定量PCR 原核表达
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鼻咽癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及意义 被引量:5
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作者 胡国华 李兵 朱江 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期90-91,共2页
目的 :探讨MRP基因在鼻咽癌的表达状况及其与鼻咽癌临床病理特征的关系。方法 :应用免疫组化技术检测 40例鼻咽癌组织中多药耐药相关蛋白 (multidrugresistance -associatedprotein ,MRP)基因的表达 ,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系... 目的 :探讨MRP基因在鼻咽癌的表达状况及其与鼻咽癌临床病理特征的关系。方法 :应用免疫组化技术检测 40例鼻咽癌组织中多药耐药相关蛋白 (multidrugresistance -associatedprotein ,MRP)基因的表达 ,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果 :鼻咽癌组织中MRP基因阳性表达率为 42 .5 %( 17/4 0 ) ,与年龄、性别和淋巴结转移无关 ,但是 ,T3~ 4 期鼻咽癌的表达率明显高于T1~ 2 期 (p <0 .0 5 )。结论 :MRP基因是鼻咽癌产生多药耐药的机制之一 ,并涉及肿瘤的浸袭 ,有可能成为判断预后和化疗效果的指标。 展开更多
关键词 鼻咽癌 多药耐药相关蛋白基因 MRP基因 免疫组化 表达率
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生长相关蛋白43基因修饰脂肪间充质干细胞对视网膜色素变性的修复及保护 被引量:5
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作者 高俊彦 张芸 +3 位作者 李明 刘学敏 武志兵 曹燕飞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第25期3978-3983,共6页
背景:研究发现基因治疗和细胞移植治疗视网膜色素变性有效果,而且二者相结合治疗视网膜色素变性效果更为显著,但其作用机制有待深入研究。目的:探讨生长相关蛋白43基因修饰脂肪间充质干细胞对视网膜色素变性大鼠视网膜的保护作用。方法... 背景:研究发现基因治疗和细胞移植治疗视网膜色素变性有效果,而且二者相结合治疗视网膜色素变性效果更为显著,但其作用机制有待深入研究。目的:探讨生长相关蛋白43基因修饰脂肪间充质干细胞对视网膜色素变性大鼠视网膜的保护作用。方法:分离和培养视网膜色素变性大鼠脂肪间充质干细胞,以生长相关蛋白43慢病毒载体转染脂肪间充质干细胞。将60只视网膜色素变性大鼠分3组干预,实验组视网膜下腔注射生长相关蛋白43慢病毒载体转染的脂肪间充质干细胞,对照组注射脂肪间充质干细胞,假手术组注射PBS,注射后3,7,14,21 d,观察眼球组织脂肪间充质干细胞变化及视网膜生长相关蛋白43表达;注射后28 d,观察视网膜Rho蛋白、GS蛋白表达及外核层厚度。结果与结论:(1)实验组脂肪间充质干细胞移植后,随着时间的延长,生长相关蛋白43表达量逐渐升高,不同时间点间两两比较差异均有显著性意义(P<0.05);(2)实验组、对照组Rho蛋白和GS蛋白表达量高于假手术组(P<0.05);实验组Rho蛋白表达量高于对照组(P<0.05),GS蛋白表达量低于对照组(P<0.05);(3)实验组、对照组视网膜外核层厚度高于假手术组(P<0.05),实验组视网膜外核层厚度高于对照组(P<0.05);(4)结果表明,生长相关蛋白43基因修饰的脂肪间充质干细胞,对视网膜色素变性大鼠模型视网膜具有保护作用。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪干细胞 生长相关蛋白43基因 脂肪间充质干细胞 大鼠 视网膜 RHO蛋白 GS蛋白
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恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达 被引量:5
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作者 金荣华 张永宏 +7 位作者 任翊 胡中杰 吴昊 计云霞 武燕琳 孙国平 丁惠国 赵春惠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期97-99,共3页
目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以... 目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以 10例高危、健康的医务人员为对照。结果 :恢复期SARS患者外周血T淋巴细胞亚群 (CD3、CD4、CD8)均恢复正常 ;CD4 DR5、CD13,CD8 DR5、CD13表达均阴性 ,与对照组无明显差异。但是 ,恢复期SARS患者CD4、CD8阳性细胞仍明显表达Fas和Bcl 2 ,其阳性细胞的百分数较对照组明显增多 (P <0 0 1)。结论 :Fas FasL途径导致T淋巴细胞凋亡可能是SARS患者的免疫发病机理之一 ,而恢复期Bcl 2表达增多对抑制T淋巴细胞的进一步凋亡、T淋巴细胞亚群恢复正常可能具有重要作用。SARS患者T淋巴细胞凋亡不通过Trail DR5 细胞凋亡途径。 展开更多
关键词 SARS T淋巴细胞 凋亡相关基因蛋白 流式细胞术 CD13
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催乳素对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响 被引量:13
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作者 邢媛媛 李大彪 +2 位作者 李红磊 于永强 王卫云 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2439-2447,共9页
本试验旨在探讨催乳素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛BMECs为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加不同浓度催乳素[0(对照)、100、300、500和1 000 ng/m L],继续培养24 h。通过... 本试验旨在探讨催乳素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛BMECs为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加不同浓度催乳素[0(对照)、100、300、500和1 000 ng/m L],继续培养24 h。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内甘油三酯的含量;采用实时定量PCR法检测乳脂和乳蛋白合成相关基因的表达。结果表明:1)催乳素浓度为100、300 ng/m L时,BMECs相对增殖率显著高于对照组与其他试验组(P〈0.05)。2)与对照组相比,300 ng/m L催乳素能够显著提高BM ECs乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、二酰甘油酰基转移酶(DG AT)、脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因表达量及甘油三酯的含量(P〈0.05),硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因表达量有增加的趋势。3)与对照组相比,100、300 ng/m L催乳素能够显著提高哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、催乳素受体(PRLR)基因表达量(P〈0.05);300 ng/m L催乳素能显著提高αS1酪蛋白(CSN1 S1)基因表达量(P〈0.05)。综上所述,100~300 ng/m L的催乳素对BM ECs乳脂和乳蛋白合成有较好的促进效果。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 催乳素 细胞活力 甘油三酯 乳脂和乳蛋白合成相关基因
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胃癌组织中多药耐药相关蛋白基因表达的临床意义 被引量:4
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作者 王延明 王爱民 +3 位作者 王文杰 郑兴学 高同方 李永忠 《临床军医杂志》 CAS 2002年第4期1-3,共3页
目的 探讨胃癌mrp基因表达与其病理学的关系。方法 应用RT PCR方法 ,对 1 997年 1月— 2 0 0 1年 9月间手术切除的 83例胃癌组织、癌旁及 72枚淋巴结中的mrp基因表达情况进行检测分析。结果 胃癌组织中mrp阳性率( 4 5 8% )及表达水... 目的 探讨胃癌mrp基因表达与其病理学的关系。方法 应用RT PCR方法 ,对 1 997年 1月— 2 0 0 1年 9月间手术切除的 83例胃癌组织、癌旁及 72枚淋巴结中的mrp基因表达情况进行检测分析。结果 胃癌组织中mrp阳性率( 4 5 8% )及表达水平 ( 0 .5 1± 0 .30 )高于癌旁组织 ( 1 5 7% ,0 .32± 0 .1 5 ;P <0 .0 1 ) ;肿瘤浸润浆膜、低分化癌、TNMⅢ、Ⅳ期和N2 病例的mrp表达水平 ( 0 .4 6± 0 .2 8,0 .4 7± 0 .2 7,0 .4 5± 0 .2 9,0 .4 3± 0 .2 5 ;P <0 .0 5 )高于肿瘤侵犯粘膜层、高中分化癌、TNMⅠ、Ⅱ期和N0 者 ( 0 .35± 0 .1 9,0 .34± 0 .2 0 ,0 .36± 0 .2 1 ,0 .33± 0 .1 8;P <0 .0 5 )。结论 胃癌组织中mrp表达增高 ;mrp表达与胃癌病灶大小无关 ;其表达水平与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期及淋巴转移有关 。 展开更多
关键词 胃癌 基因表达 胃肿瘤 多药耐药相关蛋白基因 逆转录-多聚酶链反应 MRP基因
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