大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2表达分布的特点

目的 探讨大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子 Bcl- 2表达分布的特点。方法 采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记法 (TUNEL氏法 )检测凋亡阳性细胞 ,利用单克隆抗体免疫组化检测 Bcl- 2在关节软骨中的表达。结果 1TU NEL法染色的大骨节病儿童关节软骨凋亡阳性细胞数较正常关节软骨增多 ,且主要分布在中层。 2大骨节病儿童关节软骨 Bcl- 2的表达显著高于正常关节软骨中的表达 ,以表层最多 ,其次为中层 ;成人晚期大骨节病患者剥蚀的关节软骨表层 Bcl- 2的表达聚集在软骨细胞团中。结论 大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子 Bcl- 2表达较正常人显著增多。

乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响

旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。

不同证型老年男性高血压病患者性激素相关调控因素的比较研究

目的:探讨男性老年人高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证与性激素相关调控因素的关联性,从而为研究老年人高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证证候表现的病理生理基础提供依据。方法:根据高血压诊断与分级标准、中医辨证标准选择了男性高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证患者各30例和健康老年男性30例,采用酶联免疫吸附法检测白介素-2(IL-2)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、促性腺激素释放激素(GnRH)和硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)的水平。结果:男性老年人高血压肾气亏虚证患者的性激素相关调控因素水平的异常变化与男性老年人高血压病肾气亏虚证的发病有关,预示血清白介素-2、瘦素、促性腺激素释放激素和硫酸脱氢表雄酮水平的异常变化可能是男性老年人高血压病肾气亏虚证形成的病理基础之一。

酸敏感离子通道的功能及其相关调控

酸敏感离子通道 (ASICs)是一类由胞外酸化所激活的阳离子通道 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 .利用基因敲除等技术 ,已证明它们在触觉、痛觉、酸味觉以及学习记忆中具有重要作用 .同时 ,它们也参与某些病理反应 .ASICs可以被神经肽、温度、金属离子和缺血相关物质等调控 。

蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞周期及G_1期相关调控因子cyclinD1、cyclinE的影响

目的 探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对人正常肝和肝癌细胞周期的作用和对G1 期相关调控因子的影响。 方法 通过细胞转染技术将PKCαcDNA正向插入的真核表达质粒PXJ4 1 PKCα导入正常肝细胞 (L 0 2 ) ,并利用本室已构建的表达反义PKCα的BEL 74 0 2细胞 (HT6 )检测细胞的生长曲线 ,细胞周期以及细胞对G1 期相关调控因子cylinD1和cyclinE的影响。 结果 构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型 (LT3) ,过表达PKCα可促进L 0 2细胞增殖 ,促进细胞由G1 期向S期的过渡 ;cyclinD1和cyclinE的蛋白水平上升 ,反之表达反义PKCα的BEL 74 0 2细胞 (HT6 )增殖被抑制 ,阻抑细胞由G1 期向S期的过渡 ,cyclinD1和cyclinE的蛋白水平下降。 结论 从正反两个方面表明 ,PKCα可通过作用于G1 期相关周期蛋白的水平影响G1 S期的进程。

不同证型老年女性高血压病患者性激素相关调控因素的比较研究

目的:探讨女性老年人高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证与性激素相关调控因素的关联性,从而为研究老年人高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证证候表现的病理生理基础提供依据。方法:根据高血压诊断与分级标准、中医辨证标准选择了女性高血压病肾气亏虚证、肝火上炎证患者各30例和健康老年女性30例,采用酶联免疫吸附法检测白介素-2(IL-2)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、促性腺激素释放激素(GnRH)和硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)的水平。结果:女性老年人高血压肾气亏虚证患者的性激素相关调控因素水平的异常变化与女性老年人高血压病肾气亏虚证的发病有关,预示血清白介素-2水平的异常变化可能是女性老年人高血压病肾气亏虚证形成的病理基础之一。

细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其意义

目的 了解细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法 应用高压锅抗原修复免疫组化ABC法 ,检测 47例胰腺癌标本的细胞周期相关调控蛋白 (p5 3、p16、p2 1及Rb蛋白 )的表达 ,并用一种新的ki s5抗体检测胰腺癌细胞ki 6 7增殖指数。结果 p5 3、p16、p2 1及Rb蛋白阳性表达均位于细胞核 ,胰腺癌中 p5 3、p16、p2 1和Rb蛋白表达阳性率分别为 5 5 % (2 6 /47)、5 3 % (2 5 /47)、6 4% (35 /47)和 98% (46 /47) ;p16、p2 1及Rb蛋白表达与ki 6 7增殖指数呈负相关 ;p5 3蛋白表达与p2 1蛋白表达无关。 结论 大部分胰腺癌的异常增殖可能与 p16、p2 1蛋白阴性表达有关 ,而由Rb蛋白阴性表达导致的胰腺癌细胞的异常增殖少见。p5 3蛋白表达与 p2

肝细胞癌细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达的研究

目的 探讨肝细胞癌中细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达特征与HCC分化状态的关系。方法 分别以末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)介导的d UTP缺口末端标记技术 (TUNEL)和SP免疫组化方法检测 3 5例人HCC与其癌旁组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原 (PCNA)及p5 3、Fas的表达特征 ,并结合临床资料进行分析。结果 凋亡细胞在HCC组织中呈散在分布 ,其凋亡细胞指数显著低于癌旁组织 ,而PCNA指数明显高于癌旁组织 ;在HCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中 ,凋亡细胞指数分别为 0 5 3 ,0 42 ,0 2 0 ,0 2 1。PCNA指数分别为 0 0 6,0 41,0 63 ,0 80 ,均存在显著性差异 ;HCC组织的p5 3表达随Edmondson分级呈递增现象 ;而Fas均呈低水平表达。结论 HCC的分化程度与细胞凋亡指数呈正相关 ,而与PCNA指数呈负相关。HCC细胞凋亡为p5 3依赖型 ,p5 3基因高突变、Fas表达的下调的肝癌组织其恶性程度较高 。

稽留流产患者绒毛组织中同源框基因A10 mRNA、凋亡相关调控基因p53 mRNA的表达及其临床意义

目的探究同源框基因A10(HOXA10)mRNA、凋亡相关调控基因p53 mRNA在稽留流产(MA)患者绒毛组织中的表达水平及意义。方法将2019年6月至2021年9月监利市人民医院收治的75例MA患者纳入MA组,并将同期行人工流产的75例正常早孕者纳入对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组绒毛组织中HOXA10 mRNA、p53 mRNA的表达水平;采用Pearson法分析MA患者绒毛组织中HOXA10 mRNA与p53 mRNA的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价绒毛组织中HOXA10 mRNA与p53 mRNA表达水平对MA的诊断价值。结果与对照组相比,MA组患者绒毛组织中HOXA10 mRNA表达水平明显降低,p53 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);MA患者绒毛组织中HOXA10 mRNA与p53 mRNA呈负相关(r=-0.453,P<0.05);绒毛组织中HOXA10 mRNA、p53 mRNA诊断MA的曲线下面积(AUC)分别为0.875、0.887,截断值分别为0.77、1.41,灵敏度均为88.0%,特异度分别为80.0%、74.7%;两者联合诊断MA的AUC为0.962,其灵敏度、特异度分别为86.7%、92.0%。结论MA患者绒毛组织中HOXA10 mRNA表达水平降低,p53 mRNA表达水平升高,两者呈负相关,且HOXA10 mRNA、p53 mRNA联合可有效提高对MA的诊断价值。

老年男性高血压病肾气亏虚证特征性性激素与其相关调控因素的相关性研究

目的:探讨老年男性高血压病肾气亏虚证特征性性激素与其相关调控因素的的关联性,从而为研究老年高血压病肾气亏虚证证候表现的病理生理基础提供依据。方法:对30例老年男性高血压病肾气亏虚证患者首先采用电化学发光免疫法检测血清卵泡刺激素、雌二醇水平,其次采用放射免疫分析法和酶联免疫吸附法检测血清白介素-2、瘦素、促性腺激素释放激素和硫酸脱氢表雄酮水平,最后应用多重线性回归法建立多重线性回归模型,深入探析老年男性高血压病肾气亏虚证特征性性激素指标与特征性性激素相关调控因素之间的相关程度。结果:白介素-2是老年男性高血压病肾气亏虚证患者血清雌激素的敏感性调控因素,雌二醇含量变异的20.50%可由白介素-2的变化来解释,且二者呈负相关关系;瘦素是老年男性高血压病肾气亏虚证患者血清卵泡刺激素的敏感性调控因素,卵泡刺激素含量变异的18.30%可由瘦素的变化来解释,且二者呈正相关关系。结论:老年男性高血压病肾气亏虚证患者的白介素-2对雌二醇具有负向调控作用,瘦素对卵泡刺激素具有正向调控作用。

野生型p53及相关调控基因的转录、翻译水平与肠道干细胞分化的关系

目的 探讨野生型 p53(wtp53)基因及其相关调控基因转录、翻译水平的变化与肠道干细胞分化的关系。方法 利用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学技术 ,以细胞分化标志肝脂肪酸结合蛋白 (L Fabp)mRNA水平为动态参照 ,分别检测大鼠胚胎期E1 4d ,E1 7d,E1 9d和幼鼠期P1d,P2d,P7d,P2 8d及成年大鼠小肠细胞内p53mRNA、p2 1mRNA及其蛋白表达。 结果 从胚胎E1 9d至成年大鼠 ,RT PCR能够检测到小肠细胞内L Fabp的mRNA ,其中P2d,L Fabp的mRNA含量最高 ,证实这个期间为肠道干细胞高分化阶段。从胚胎到成年大鼠 ,小肠细胞p2 1mRNA及其蛋白表达均为阴性 ,p53mRNA水平无明显变化。然而从E1 4d～P2d ,小肠上皮细胞p53蛋白信号呈逐渐增强趋势。P7d以后至成年期 ,p53蛋白信号为阴性。结论 在肠道干细胞迅速分化期 ,p53蛋白高表达可能是因为其半衰期延长 ,最终导致蛋白量累积的结果 ,而与转录水平无关 ,提示蛋白的稳定性对于p53调节肠道干细胞分化期基因的稳定性十分重要 ,另外 ,p53蛋白调节肠道干细胞的分化机制与p2

壬基酚对大鼠F1代脑物质能量代谢调控相关基因表达的影响

目的:利用芯片技术探讨壬基酚(nonylphenol,NP)对F1代脑物质能量代谢调控相关基因表达影响。方法:NP染毒F0亲代母鼠,分别提取NP组和对照组F1代雄性2日龄大鼠的脑组织mRNA,分别用cy5和cy3逆转录标记,与BiostarR-40S基因表达谱芯片杂交,并对cy3、cy5荧光信号做扫描分析。结果:芯片结果显示实验组已知功能差异表达基因有16条,其中下调基因有13条,5条与物质能量代谢调控密切相关。结论:NP可通过多种途径影响机体物质能量代谢功能。

脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡的相关基因调控

脑缺血再灌注损伤与细胞凋亡密切相关,细胞凋亡是基因调控的。本文综述了脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡的相关基因(bcl～2、IEGs、p53、ICE、Fas等)的结构、功能及其在细胞凋亡中的作用、机制和表达情况。

细胞周期调控相关蛋白p14arf,p16ink4a和p53在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期调控相关蛋白p14arf,p16ink4a和p53在子宫内膜癌(EC)组织中表达情况。方法采用免疫组化S-P法,检测42例EC,36例正常子宫内膜组组织中p14arf、p16ink4a及p53的表达程度,并对比其差异,分析它们之间的关系。结果p14arf阳性表达率在子宫内膜癌与正常内膜组织中分别为73.81%(31/42)、100%(36/36),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜癌中p14arf表达缺失的比例高于正常子宫内膜;p14arf表达水平与病理分级、临床分期相关;与组织学类型和肌层浸润深度、淋巴结转移无关。p16阳性表达率在子宫内膜癌与正常内膜组织中分别为57.14%(24/42)、100%(36/36)、两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜癌中p16ink4a表达缺失的比例高于正常子宫内膜;p16ink4a表达水平与临床分期、病理分级和淋巴结转移相关;与组织学类型和肌层浸润深度无关。p53阳性表达率在子宫内膜癌与正常增生内膜组织中分别为47.62%(20/42)、22.22%(8/36),两组比较差异有统计学意义(P<0.05),子宫内膜癌中p53阳性表达的比例高于正常子宫内膜;p53表达与临床分期、病理分级、盆腔淋巴结转移和肌层浸润深度相关,与组织学类型无关。在子宫内膜癌组织中p14arf与p53表达密切相关(P<0.01)。结论p14arf、p16ink4a和p53异常表达提示细胞的过度增殖和增殖-凋亡相关基因的表达失衡在子宫内膜恶性转化过程中起重要作用。其异常表达可作为子宫内膜增生性疾病不同发展阶段的诊断及预测其生物学行为的参考指标。

心肌缺血-再灌注时细胞凋亡及相关基因调控

目的 :观察黄芪抑制家兔心肌缺血—再灌注时细胞凋亡的作用。方法 :采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法 ,复制家兔心肌缺血再灌注的动物模型 ,对心肌缺血—再灌注、黄芪治疗、心肌缺血、假手术等不同情况下心肌坏死面积、心肌细胞DNA电泳、凋亡细胞的形态 (TUNEL法、电镜 )及bcl-2与bax原位杂交进行了观察。结果 :再灌注组和黄芪治疗组的梗死面积小于单纯缺血组 ;DNA电泳发现再灌注组呈凋亡的典型表现 ,单纯缺血组表现为细胞坏死 ,黄芪治疗组梯形条带中DNA含量较心肌缺血—再灌注组明显减少 ;TUNEL染色发现缺血组有散在阳性细胞 ,再灌注组有大量的阳性标记 ,且积聚成团 ,黄芪治疗组较再灌注组明显减少 ;电镜观察发现再灌注组线粒体等细胞亚结构损伤严重 ,而黄芪治疗组则明显减轻。缺血组bcl-2与bax表达增多 ,再灌注组bax表达增多而bcl-2表达减少 ,黄芪治疗可下调bax且一定程度上调bcl-2。结论 :缺血再灌注可引起心肌细胞的凋亡 ,黄芪可确实抑制凋亡的发生。

壬基酚对大鼠F1子代脑内分泌调控相关基因表达的影响

目的 利用芯片技术探讨壬基酚 (nonylphend ,NP)对F1子代脑内分泌调控相关基因表达影响。方法 NP染毒F0亲代母鼠 ,分别提取NP组和对照组F1子代雄性 2日龄大鼠的脑组织mR NA ,分别用cy5和cy3逆转录标记 ,与Mouse4 0S基因表达谱芯片杂交 ,并对cy3、cy5荧光信号做扫描分析。结果 芯片结果显示实验组已知功能差异表达基因有 16条 ,其中下调基因有 13条 ,4条与内分泌调控密切相关。结论 NP可通过多种途径影响机体类固醇激素的合成、代谢及干扰雄性的生殖功能。

糖尿病肾小管-间质纤维化进程中负性调控相关蛋白的研究进展

糖尿病肾病(DKD)是糖尿病最常见及最严重的慢性微血管并发症之一,DKD发展为慢性肾功能衰竭的最终途径是肾小球硬化和小管间质纤维化(TIF)。TIF是DKD的主要病理改变,在TIF进程中上皮间充质转化(EMT)发挥了重要作用。对于EMT这一复杂且影响因素众多的过程,虽已知有很多基因、蛋白参与,但具体的调控机制仍不清楚。迄今为止,对于在糖尿病肾病肾纤维化过程中可能起着重要作用的多种负性调节相关蛋白的表达变化及其调控机制的研究十分广泛,故对此进行综述。

热处理对下丘脑食欲调控和腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关基因表达的影响

本试验旨在探讨热处理对下丘脑食欲调控和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路相关基因表达的影响。试验采用6孔板进行肉鸡下丘脑神经元细胞体外培养,建立下丘脑神经元体外培养模型。将体外培养的神经元细胞分为对照组和热处理组(每组6个重复,每个重复对应1个孔),于培养箱(37℃、5%CO2)中培养。培养至第5天时进行热处理,热处理组培养温度为43℃,对照组培养温度为37℃,热处理1.5 h后收集神经元细胞,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测下丘脑神经元细胞中食欲调控和AMPK信号通路相关基因的mRNA相对表达量。结果显示:与对照组相比,1)热处理显著上调下丘脑促食欲基因刺鼠色蛋白相关蛋白(AgRP)和厌食欲基因阿黑皮素原(POMC)mRNA相对表达量(P<0.05);2)热处理显著下调下丘脑AMPK信号通路相关基因AMPKα2和脂肪酸合成酶(FAS)mRNA相对表达量(P<0.05);3)热处理显著上调下丘脑AMPK信号通路上游因子丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)mRNA相对表达量(P<0.05)。综上可知,热处理能够显著上调下丘脑促食欲基因AgRP和厌食欲基因POMC的表达,并能够显著下调下丘脑AMPK信号通路中AMPKα2和FAS基因的表达,显著上调AKT1基因的表达。

补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞增的调控作用

目的 :比较补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞增殖的调控作用。方法 :采用含药血清对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞 2BS细胞株进行处理 ,观察四种中药对细胞寿命、细胞生长曲线、代谢活力 (MTT法 )以及衰老细胞生物学标志衰老相关半乳糖苷酶活力的影响。结果 :补肾和益气方药能够明显延长衰老细胞的传代次数 ,促进细胞增殖 ,使细胞MTT的还原量明显升高 ,抑制细胞衰老相关半乳糖苷酶 (SA β Gal)活力。而健脾、活血方药对细胞增殖的促进作用不明显。 结论 :细胞衰老时增殖变慢 ,活力降低 ,衰老相关半乳糖苷酶活力增高。补肾、益气中药能改善上述衰老变化 ,健脾、活血药作用不明显。