电针联合NGF对骨折大鼠血钙水平、愈合程度及EGFR相关通路的影响

目的探究电针联合神经生长因子(NGF)对骨折大鼠血钙水平、愈合程度及表皮生长因子受体(EGFR)相关通路的影响。方法选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、电针(C)组、NGF(D)组、电针联合NGF(E)组,每组10只,对B、C、D、E组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立胫骨骨折模型,建模成功后,C组给予电针治疗,D组给予骨折部位注射1500 U的NGF,E组给予电针联合NGF治疗,A组不建模,A组、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,X线摄片检测大鼠骨折愈合程度,苏木素-伊红(HE)染色法检测骨组织病理形态,全自动生化仪检测血钙水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中NGF含量,免疫印迹法检测大鼠骨组织中EGFR蛋白表达。结果与A组相比,B组骨折断端边缘清晰,可见明显骨折线,无骨痂生长且骨折处骨质密度降低;与B组相比,C组骨折线仍可见但折断端边缘趋于模糊,骨密度有所升高,且可见少量骨痂生长;与C组相比,D组、E组骨折线逐渐消失,骨痂明显增多,骨密度明显升高,且D组可见大部分骨痂长入骨折线,已有骨外膜形成并可见骨连接形成。A组骨组织形态完整,且排列整齐,无坏死区域,B组骨组织形态遭到破坏,出现部分坏死区域,并可见少量纤维组织,C组、D组可见大量肉芽组织生长和新生毛细血管内皮细胞等,并出现大量骨痂及纤维组织,成软骨细胞增生活跃,E组骨组织形态已趋于完整,排列有序且部分已被正常组织替代,出现大量的板层骨连接,形成骨化,钙盐开始沉着;与A组比较,B、C、D、E组血钙水平、NGF含量显著降低(P<0.05),与B组比较,C、D、E组血钙水平、NGF含量显著升高(P<0.05),与C组比较,D组、E组血钙水平、NGF含量显著升高(P<0.05),且E组比D组显著性升高(P<0.05);B、C、D、E组胫骨组织中EGFR蛋白表达按A组显著性升高(P<0.05),与B组比较,C、D、E组中EGFR蛋白在胫骨组织表达显著性降低(P<0.05),与C组比较,D组、E组胫骨组织EGFR蛋白表达显著降低(P<0.05),且E组比D组降低更显著(P<0.05)。结论电针联合NGF具有显著疗效,其可显著促进骨折愈合,提高血钙水平,这与抑制EGFR相关通路相关。

脑缺血再灌注损伤中钙超载相关通路研究进展

缺血性中风是严重危害人类健康的疾病之一,而脑缺血再灌注损伤是其核心病理环节。近年来诸多研究发现钙超载在其病理过程中扮演着重要角色。通过检索相关文献,发现N-甲基-D-天冬氨酸受体、瞬时受体电位通道2、酸敏感离子通道、ATP供应不足影响钠/钙交换器、高尔基体参与、钙调蛋白等机制介导了钙超载的发生,而钙超载又通过导致线粒体损伤、氧化应激,激活内质网应激的方式引起神经元的死亡。

营养不良相关因素及代谢相关通路对结直肠癌患者预后的影响

探讨营养不良的相关因素及代谢相关通路对结直肠癌患者预后的影响。选择我院146例结直肠癌患者,采用一般资料调查表、患者自评营养状况主观评估表(PG-SGA)对结直肠癌患者的营养状况进行现况调查,并对其影响因素进行分析。同时采用癌症和肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中包含完整mRNA和预后数据的367例结直肠癌患者,利用基因集变异分析(Gene Set Variation Analysis,GSVA)确定代谢相关通路的富集分数,并对代谢相关通路进行预后分析。单因素和多因素logistic回归显示,年龄、临床分期、既往史、BMI指数、低蛋白血症、总蛋白缺乏是结直肠癌患者营养不良的危险因素(OR>1,P<0.05),也是影响结直肠癌患者预后的危险因素;代谢相关通路的预后分析表明,糖代谢过程中的半乳糖代谢通路、脂肪代谢过程中的脂肪酸代谢通路以及蛋白质代谢过程中的色氨酸代谢通路的富集程度越高,结直肠癌患者的预后越好(P<0.05)。年龄、临床分期、既往史、BMI指数、低蛋白血症、总蛋白缺乏是造成结直肠癌患者营养不良及较差预后的重要危险因素;半乳糖代谢通路、脂肪酸代谢通路和色氨酸代谢通路的激活可以提高结直肠癌患者的生存率。

右美托咪定调节心肌缺血再灌注损伤相关通路的研究进展

急性心肌梗死(AMI)是导致人类死亡的主要原因之一,心肌梗死后的再通导致心肌损伤进一步加重,因此早期的治疗和及时有效的干预措施,对减少AMI患者的总病死率起着重要意义。药物预处理或后处理被证实能够减轻再灌注所带来的损伤,其机制是使相关信号通路激活,控制下游信号蛋白级联反应的发生,从而发挥心脏保护作用。研究发现右美托咪定可以减轻心肌缺血再灌注所造成的损伤。本文现就右美托咪定对心肌保护作用的机制,并讨论可能参与心肌缺血再灌注损伤的信号通路及相关治疗进行综述。

透析通路相关的肿胀手综合征合并缺血综合征1例

自体动静脉内瘘(autologous arteriovenous fistula,AVF)是维持性血液透析患者常用的透析通路,随着患者透析龄延长,内瘘血管狭窄、血栓形成、动脉瘤形成、感染、透析通路相关肿胀手综合征(swelling hand syndrome,SHS)及透析通路相关缺血综合征(dialysis access-associated ischemic steal syndrome,DASS)等血管通路相关的并发症发生风险逐渐升高。在临床实践中,SHS同时合并DASS的病例相对少见,现将我科成功诊治的1例AVF相关的SHS多次复发合并DASS的病例进行报道。

JNK通路相关磷酸酶水平变化在儿童炎症性肠病中的临床意义

本研究旨在探讨血清C-Jun N-末端激酶通路相关磷酸酶(C-Jun N-terminal kinase pathway-associated phosphatase, JKAP)水平在儿童炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease, IBD)中的表达及其与炎症轻重程度、疾病活动度、Th17细胞水平的相关性。方法:选取140例IBD患儿(包括60例克罗恩病(Crohn’s Disease, CD)儿童和80例溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis, UC)儿童)作为实验组,采用ELISA法检测其血清JKAP、TNF-α、IL-23、IFN-γ和IL-17A水平。同时,选取10名健康儿童作为对照者,ELISA法检测血清JKAP水平。结果:① 与健康对照组相比,CD儿童和UC儿童的血清JKAP水平降低(均p α呈负相关(均 p 0.05)。⑤ 在CD或UC儿童中,JKAP与IFN-γ (Th1分泌细胞因子)无相关性(均为p > 0.05)。⑥ 在CD和UC儿童中,JKAP与IL-17A (Th17分泌细胞因子)呈负相关(均为p < 0.05)。结论:血清JKAP水平在IBD儿童中呈低表达,与炎症轻重程度、疾病活动度和Th17细胞分泌的细胞因子水平呈负相关。

刺络拔罐联合骨痹散外敷治疗膝骨关节炎疗效观察及对软骨组织相关信号通路的影响

目的:观察刺络拔罐联合骨痹散外敷治疗膝骨关节炎的疗效及对软骨组织相关信号通路的影响。方法:选取72例膝骨关节炎患者作为研究对象,按随机数字表法分为观察组及对照组各36例。对照组给予骨痹散外敷,观察组给予刺络拔罐联合骨痹散外敷治疗,2组均治疗4周。比较2组临床疗效,比较2组治疗前后疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分、“起立-行走”计时测试(TUGT)、中医证候积分、最大主动关节活动度(AROM)、膝关节评分表(KSS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)、软骨组织相关信号通路指标值[白细胞介素-1β(IL-1β)、环氧化酶-2(COX-2)]的变化。结果:观察组临床疗效总有效率为97.22%,对照组为83.33%,2组临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗2周、4周后,2组VAS评分、TUGT指标值均较治疗前下降(P<0.05),观察组VAS评分、TUGT指标值均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组关节疼痛、胫软膝酸、活动不利、动作牵强中医证候积分均较治疗前下降(P<0.05),观察组上述4项中医证候积分均低于对照组(P<0.05)。治疗2周、4周后,2组AROM活动度、KSS指标值均较治疗前升高(P<0.05),观察组AROM活动度、KSS指标值均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组疼痛、僵硬、日常生活难度WOMAC评分均较治疗前下降(P<0.05),观察组上述3项WOMAC评分均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组IL-1β、COX-2指标值均较治疗前升高(P<0.05),观察组IL-1β、COX-2指标值均高于对照组(P<0.05)。结论:刺络拔罐联合骨痹散外敷治疗膝骨关节炎疗效较好,能减退关节肿痛程度,改善膝关节活动度,促进患者自主生活能力的恢复,有效缓解关节疼痛、活动不利等症状。

短星翅蝗转录组分析和免疫相关通路及基因的鉴定

【目的】短星翅蝗Calliptamus abbreviatus隶属于直翅目、星翅蝗亚科,是草原及半农牧区的主要害虫之一,其相关分子生物学信息研究相对较少。本研究拟测序短星翅蝗的转录组数据,基于组装和注释结果,鉴定并挖掘该类群与免疫相关的信号通路和基因。【方法】本研究采用Illumina高通量测序平台,对短星翅蝗雌雄成虫个体进行了转录组测序,对测序数据进行组装和注释等生物信息学分析,并鉴定与免疫相关的通路及基因。【结果】短星翅蝗转录组数据总计获得36804个unigenes,对unigenes进行Nr、Nt、GO、COG、KEGG、Swissprot和Interpro七大功能数据库注释,最终21137个unigenes被成功注释。在Toll通路、IMD通路和JAK-STAT信号通路中共鉴定了160个与天然免疫相关的unigenes;在MAPK、TLR等与免疫相关的通路中鉴定出166个unigenes,在解毒代谢相关的通路中鉴定出457个unigenes。短星翅蝗的雌雄分组中(C_abbreviatus_M VS C_abbreviatus_F),总计获得8125个差异表达基因,其中6326个为上调表达基因,而1799个为下调表达基因。差异表达基因KEGG注释中,有22个unigenes注释到JAK-STAT信号通路上,6个unigenes注释到MAPK通路中。另外,还检测到6227个SSR。【结论】本研究获得了短星翅蝗转录组数据,并对其与免疫相关的通路及基因进行了鉴定分析,为该类群基因功能注释、免疫基因筛选及分子标记开发等研究提供了分子基础。

葫芦素B调节Hippo-Yes相关蛋白通路对宫颈癌中调节性T细胞介导免疫逃逸的有关机制研究

目的探讨葫芦素B调节Hippo-Yes相关蛋白(YAP)通路对宫颈癌中调节性T细胞(Treg)介导的免疫逃逸的影响。方法选取BALB/c裸鼠32只作为研究对象,皮下注射人宫颈癌Hela细胞建立裸鼠移植瘤模型,将造模成功的裸鼠按照随机数字表法分为CON组、葫芦素B组、LPA组和葫芦素B-LPA组,每组8只。CON组采用腹腔注射生理盐水,葫芦素B组和LPA组采用腹腔注射剂量0.5 mg/kg的葫芦素B和剂量为3 mg/kg的JAP激活剂LPA,葫芦素B-LPA组采用腹腔同时注射0.5 mg/kg的葫芦素B和3 mg/kg的LPA,每2天给药一次,共处理21 d后取材;采用ELISA试剂盒法比较各组裸鼠血清白介素-2(IL-2)、IL-10和转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;采用流式细胞术比较各组裸鼠淋巴细胞CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)叉状头状螺旋转录因子3(Foxp3^(+))Treg水平;采用Western blot法比较各组瘤组织Foxp3、TGF-β、YAP、大肿瘤抑制基因1(LATS1)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)蛋白表达。结果21 d后,葫芦素B组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达低于CON组,LATS1、MST1蛋白表达高于CON组,差异有统计学意义(P<0.05);LPA组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达高于CON组,差异有统计学意义(P<0.05);LPA组和CON组的LATS1、MST1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);葫芦素B-LPA组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达高于葫芦素B组,低于LPA组,差异有统计学意义(P<0.05);葫芦素B-LPA组和葫芦素B组的LATS1、MST1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);葫芦素B-LPA组的LATS1、MST1蛋白表达高于LPA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葫芦素B可通过调节Hippo-YAP通路抑制宫颈癌中Treg介导的免疫逃逸。

水苏碱调节Hippo-YAP信号通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用

目的探究水苏碱(stachydrine,STA)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠的神经保护作用,并分析其作用机制。方法将新生SD大鼠随机分为假手术组、HIBD组、STA低剂量(5 mg/kg)组、STA中剂量(10 mg/kg)组、STA高剂量(20 mg/kg)组、维替泊芬(10 mg/kg)+STA高剂量(20 mg/kg)组,除假手术组外,其余大鼠构建HIBD大鼠模型。对各组大鼠进行神经功能缺损评分,采用Morris水迷宫实验进行认知功能评价,测定各组大鼠脑含水量和脑指数,HE染色、尼氏染色观察脑组织神经元损伤,TUNEL染色观察脑组织神经元细胞凋亡情况,Western blot法检测YES相关蛋白(YES associated protein,YAP)、p-YAP、哺乳动物STE20样蛋白激酶1(mammalian sterile 20-like kinase 1,MST1)、p-MST1、具有PDZ基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白表达。结果与假手术组比较,HIBD组海马组织损伤加重,尼氏小体减少(P<0.05),神经功能缺损评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、脑指数、神经元细胞凋亡率、p-YAP/YAP比值、p-MST1/MST1比值显著增加(P<0.05),穿越平台次数、TAZ表达显著降低(P<0.05);与HIBD组相比,STA低、中、高剂量组海马组织损伤改善,尼氏小体增加(P<0.05),神经功能缺损评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、脑指数、神经元细胞凋亡率、p-YAP/YAP比值、p-MST1/MST1比值显著降低(P<0.05),穿越平台次数、TAZ表达显著增加(P<0.05);与STA高剂量组相比,维替泊芬+STA高剂量组海马组织损伤加重,尼氏小体减少(P<0.05),神经功能缺损评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、脑指数、神经元细胞凋亡率、p-YAP/YAP比值、p-MST1/MST1比值显著增加(P<0.05),穿越平台次数、TAZ表达显著降低(P<0.05)。结论STA可能通过调控Hippo-YAP信号通路、减少神经损伤和神经元细胞凋亡、改善神经功能,发挥对HIBD新生大鼠的神经保护作用。

LncRNA p21调控Hippo-YAP信号通路对小鼠腹主动脉瘤形成的影响及机制

目的 探究长链非编码RNA p21(long non-coding RNA,LncRNA p21)调控Hippo-Yes相关蛋白(Hippo-Yes-associated protein, Hippo-YAP)信号通路对小鼠腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)形成的影响。方法 C57BL/6 ApoE-/-通过皮下植入渗透性微泵构建血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导小鼠AAA模型。将C57BL/6 ApoE-/-随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、LncRNA p21阴性对照组(sh-NC)、LncRNA p21敲低组(sh-LncRNA p21)。HE和血管弹力纤维染色(VVG)观察血管形态变化;qRT-PCR检测LncRNA p21表达;Western blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达;原位末端标记法(TUNEL)染色检测平滑肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、cyclinD1及Hippo-YAP信号通路蛋白表达。结果 与sham组相比,model组小鼠血管弹力纤维断裂紊乱,出现明显损伤,且LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均增加(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均降低(P<0.01)。与model组相比,sh-LncRNA p21组小鼠血管弹力纤维断裂及损伤程度减轻,LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均降低(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均增加(P<0.01)。结论 LncRNA p21能够促进小鼠AAA形成,其机制与调控Hippo-YAP信号、促进细胞凋亡、抑制细胞增殖相关。

穿心莲内酯对大鼠缺血性脑损伤及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1通路的影响

目的探讨穿心莲内酯(AND)对缺血性脑损伤(IBI)的影响及其作用机制。方法将192只健康SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),模型组(IBI组),低、中、高剂量AND组和尼莫地平(NMP)组,每组32只;采用线圈阻断大脑中动脉的方法制备IBI大鼠模型,造模完成后,低、中、高剂量AND组分别给予25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg的AND溶液灌胃,NMP组以10 mg/kg的NMP溶液灌胃,Sham组和IBI组给予生理盐水5 mL/kg灌胃,疗程7 d。采用Longa评分标准进行神经功能缺损评分;测定脑梗死率、脑含水量、观察梗死灶周边2 mm区域半暗带神经细胞凋亡状况、丙二醛(MDA)含量和抗氧化酶活性,检测炎症因子含量、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、核因子-κB(NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与Sham组相比,IBI组神经功能缺失评分、脑梗死率、脑含水量均显著升高(均P<0.05);梗死灶周边2 mm区域半暗带凋亡细胞数量明显增多,凋亡指数显著升高(P<0.05);MDA含量显著升高、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著降低(均P<0.05),肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、干扰素-γ含量显著升高(均P<0.05),Nrf2、HO-1、Bcl-2表达量显著降低而NF-κB、Caspase-3、Bax表达量显著升高(均P<0.05)。AND各组上述作用呈现一定的剂量依赖性,高剂量AND组作用最强,且高剂量AND组对各指标的作用优于NMP组(P<0.05)。结论AND对大鼠IBI具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路,进而抑制氧化应激、炎症反应和神经细胞凋亡有关。

马钱苷调节AKT/AMPK/Nrf2通路改善氧葡萄糖剥夺/复氧诱导的神经元铁死亡的机制研究

目的:探讨马钱苷通过调节蛋白激酶B(AKT)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-E2相关因子2(Nrf2)通路改善氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元铁死亡的机制。方法:将神经元分为对照组、OGD/R组、OGD/R+L-马钱苷组、OGD/R+M-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷+ML385组。透射电子显微镜观察神经元线粒体形态;检测铁含量、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG),还原型辅酶Ⅱ(NADPH)/辅脱氢酶Ⅱ(NADP^(+))及乳酸脱氢酶(LDH)含量;使用CM-H2DCFDA、C11-BODIPY581/591分别检测细胞内和脂质活性氧(ROS)水平;四唑盐(MTT)试剂盒检测细胞活性;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)/AKT、磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)/AMPK、Nrf2蛋白表达。结果:OGD/R组神经元线粒体出现碎片化现象,嵴减少,线粒体膜密度有所增加。与对照组比较,OGD/R组GSH/GSSG、NADPH/NADP^(+)、SOD、GPX4相对活性、细胞活力以及Bcl-2水平、p-AKT/AKT、p-AMPK/AMPK、Nrf2水平下降(P<0.05),Fe^(2+)含量、细胞内ROS水平、脂质ROS水平以及4-HNE、MDA水平、LDH释放量、Bax以及cleaved Caspase-3水平上升(P<0.05);马钱苷处理后神经元线粒体中的线粒体嵴变得较为完整,碎片化现象消失,OGD/R+L-马钱苷组、OGD/R+M-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷组较OGD/R组GSH/GSSG、NADPH/NADP^(+)、SOD、GPX4相对活性、细胞活力以及Bcl-2水平、p-AKT/AKT、p-AMPK/AMPK、Nrf2水平上升(P<0.05),Fe^(2+)含量、细胞内ROS水平、脂质ROS水平以及4-HNE、MDA水平、LDH释放量、Bax以及cleaved Caspase-3水平下降(P<0.05),且随着马钱苷剂量的增加,改善效果更显著;OGD/R+H-马钱苷+ML385组以上指标与OGD/R组趋势一致。结论:马钱苷可能通过调节AKT/AMPK/Nrf2通路改善OGD/R诱导的神经元铁死亡。

金合欢素调节Sirt1/AMPK/Nrf2信号通路对糖尿病白内障大鼠氧化应激损伤的影响

目的探讨金合欢素对糖尿病白内障(DC)大鼠氧化应激损伤的影响及其对沉默调节蛋白1(Sirt1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。方法60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、金合欢素低剂量组、金合欢素高剂量组、金合欢素+Sirt1抑制剂(EX527)组,除对照组以外均构建DC大鼠模型,其中,金合欢素低剂量组、金合欢素高剂量组大鼠分别经颈部皮下注射10 mg·kg^(-1)、20 mg·kg^(-1)的金合欢素,金合欢素+EX527组大鼠经颈部皮下注射20 mg·kg^(-1)金合欢素,均为每天2次,同时金合欢素+EX527组大鼠经皮下埋入渗透微型泵每天泵入3.5 mg·kg^(-1)EX527,其余组别均泵入等量生理盐水,给药持续4周。给药结束后,测量血压和空腹血糖(FBG),裂隙灯照射法观察大鼠晶状体混浊状况,HE染色观察晶状体组织病理学变化,ELISA测定血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β的含量,Western blot检测Sirt1、p-AMPK、AMPK、Nrf2蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠晶状体上皮细胞呈片状、条索状,发生迁移性聚集,收缩压、FBG、晶状体混浊评分、MDA、IL-6、IL-1β水平均升高,SOD、GSH-Px含量及Sirt1、p-AMPK/AMPK、Nrf2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05);与模型组比较,金合欢素低、高剂量组大鼠晶状体上皮细胞迁移性聚集现象改善,收缩压、FBG、晶状体混浊评分、MDA、IL-6、IL-1β水平均降低,SOD、GSH-Px含量及Sirt1、p-AMPK/AMPK、Nrf2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);与金合欢素高剂量组比较,金合欢素+EX527组晶状体上皮细胞形态改变和聚集现象加重,收缩压、FBG、晶状体混浊评分、MDA、IL-6、IL-1β水平均升高,SOD、GSH-Px含量及Sirt1、p-AMPK/AMPK、Nrf2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。结论金合欢素可能通过激活Sirt1/AMPK/Nrf2通路保护DC大鼠免受氧化应激损伤。

金蓉颗粒通过雌二醇/活性氧簇/核转录因子E2相关因子2通路抑制乳腺癌进程的机制研究

【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模型,分为模型组(生理盐水灌胃)、金蓉颗粒组(0.5 mg/kg金蓉颗粒混悬液灌胃),共给药12周。给药结束后,观察2组小鼠原发肿瘤大小及肺转移情况,检测血清中E2、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、ROS的水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察乳腺肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学法检测乳腺肿瘤组织中层黏连蛋白(Laminin)、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平,聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺肿瘤组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达水平。【结果】与模型组比较,金蓉颗粒组小鼠乳腺肿瘤生长及肺转移被明显抑制,血清E2、ROS和8-OHdG水平明显降低,SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC水平明显升高(均P<0.05),乳腺肿瘤组织中Laminin表达水平显著降低,Nrf2及下游NQO1、HO-1的蛋白和mRNA表达水平升高(均P<0.05)。【结论】金蓉颗粒可抑制小鼠乳腺癌生长及肺转移,其机制可能与激活E2/ROS/Nrf2通路有关。

意大利蜜蜂Hippo信号通路相关基因及其全长转录本的鉴定与分析

采用Blast工具将已鉴定到的意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)全长转录本比对Nr数据库,共鉴定到意蜂Hippo信号通路中相关的49个基因及其550条全长转录本。运用Gffcompare软件将鉴定到的Hippo信号通路相关全长转录本与西方蜜蜂参考基因组(Amel_HAv3.1)上注释的转录本进行比较,分别延长西方蜜蜂参考基因组注释到Hippo信号通路的9个基因的5'UTR和7个基因的3'UTR。通过Astalavista软件鉴定到Hippo信号通路相关的4个基因的7次可变剪切(AS)事件,包括2次外显子跳跃、2次内含子保留和3次可变5'端剪接。通过PCR验证了1个基因的AS事件真实性。利用TAPIS pipeline鉴定到意蜂Hippo信号通路相关的24个基因含有1个及以上可变多聚腺苷酸化(APA)位点,其中含有1个APA位点的基因数量最多。通过TBtool软件鉴定APA位点上游motif的一致性序列HVNCCNBNDYVDVVHVNDBVDYCNBBDNNNHNNVNNVMNN。

紫草素调节Nrf2/HO-1信号通路对实验性大鼠肉芽肿性小叶性乳腺炎的治疗作用研究

目的探究紫草素(Shikonin,SHI)通过调节核因子-红细胞2型相关因子2/血红素加氧酶(Nrf2/HO-1)信号通路对肉芽肿性小叶性乳腺炎模型大鼠的影响及作用机制。方法建立肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)大鼠模型,将大鼠分为对照组(Control组)、模型组(GLM组)、紫草素低剂量组(SHI-L组,17.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)SHI)、紫草素中剂量组(SHI-M组,35 mg·kg^(-1)·d^(-1)SHI)、紫草素高剂量组(SHI-H组,70mg·kg^(-1)·d^(-1)SHI)和紫草素高剂量+Nrf2抑制剂ML385组(SHI-H+ML385组,70 mg·kg^(-1)·d^(-1)SHI+14 mg·kg^(-1)·d^(-1)ML385)。HE染色观察乳腺组织病理变化情况;ELISA检测乳腺组织中IL-1β、TNF-α、IL-8、T-AOC、SOD、GSH、MPO、NAGase和ROS水平;免疫荧光检测NLRP3表达;Western blotting检测Nrf2和HO-1蛋白表达。结果与Control组相比,GLM组大鼠乳腺小叶完全被破坏、大片结节样慢性肉芽肿炎性病灶生成,乳腺小叶组织边界不清,腺叶内出现空泡,伴有大量淋巴细胞及中性粒细胞浸润;IL-8、IL-1β、TNF-α、ROS、MPO和NAGase水平、NLRP3阳性表达率显著增加(P<0.05),T-AOC、SOD和GSH水平、Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与GLM组相比,SHI-L组、SHI-M组和SHI-H组乳腺组织病变逐渐减轻;IL-8、IL-1β、TNF-α、ROS、MPO和NAGase水平、NLRP3阳性表达率依次降低(P<0.05),T-AOC、SOD和GSH水平、Nrf2和HO-1蛋白表达依次升高(P<0.05)。与SHI-H组相比,SHI-H+ML385组乳腺组织病变加重;IL-8、IL-1β、TNF-α、ROS、MPO和NAGase水平、NLRP3阳性表达率显著增加(P<0.05),T-AOC、SOD和GSH水平、Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论紫草素发挥抗炎抗氧化作用改善大鼠肉芽肿性小叶性乳腺炎,其机制可能与激活Nrf2信号通路,上调HO-1表达有关。

鸢尾素调节Hippo/YAP信号通路对绝经后骨质疏松大鼠骨代谢的调节作用

目的:探讨鸢尾素(Irisin)对绝经后骨质疏松(PMOP)大鼠骨代谢及Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路的影响。方法:采用双侧卵巢切除法构建PMOP大鼠模型,将所有实验大鼠分为对照组(Control组)、PMOP组、鸢尾素低、中、高剂量组(Irisin-L、Irisin-M、Irisin-H组)、鸢尾素高剂量+YAP抑制剂维替泊芬组(Irisin-H+VTPF组);骨密度仪测定骨密度(BMD);Micro-CT分析骨小梁的平均厚度(Tb.Th)、骨小梁面积百分比(Tb.Ar)、骨小梁数量(Tb.N)和骨小梁分离度(Tb.Sp);HE染色观察股骨组织形态学变化;ELISA法检测大鼠血清中骨代谢标志物特异性碱性磷酸酶(BALP)、I型前胶原氨基端前肽(PINP)、Ⅰ型胶原氨基端延长肽(PINP)、骨钙素(OC)、核结合因子-α1(CBF-α1)水平;Western blot法检测带pdz结合基序的转录共激活因子(TAZ)、YAP、p-YAP蛋白表达水平。结果:与Control组比较,PMOP组大鼠股骨组织的骨小梁结构紊乱,骨小梁厚度变薄,空骨陷窝明显,甚至发生轻微骨折,BMD、Tb.Th、Tb.Ar、Tb.N、BALP、P1NP、OC、CBF-α1、TAZ、YAP、p-YAP表达水平显著降低,Tb.Sp显著升高(P<0.05);与PMOP组比较,Irisin-L、Irisin-M、Irisin-H组大鼠股骨组织骨小梁结构逐渐排列有序,空骨陷窝减少,股骨组织损伤逐渐减轻,BMD、Tb.Th、Tb.Ar、Tb.N、BALP、P1NP、OC、CBF-α1、TAZ、YAP、p-YAP表达水平依次显著升高,Tb.Sp依次显著降低(P<0.05);与Irisin-H组比较,Irisin-H+VTPF组大鼠股骨组织的骨小梁结构紊乱,空骨陷窝明显增加,股骨组织损伤加重,BMD、Tb.Th、Tb.Ar、Tb.N、BALP、P1NP、OC、CBF-α1、TAZ、YAP、p-YAP表达水平显著降低,Tb.Sp显著升高(P<0.05)。结论:鸢尾素可以通过激活Hippo-YAP信号通路,调节绝经后骨质疏松大鼠骨代谢,防治骨质疏松。

番茄红素调节RAS同源基因家族成员A/Rho相关激酶信号通路对氧化低密度脂蛋白诱导脑血管内皮细胞凋亡的影响

目的探讨番茄红素(LYC)调节RAS同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关激酶(ROCK)信号通路对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的脑血管内皮细胞(EC)凋亡的影响。方法未做任何处理的人脑微血管内皮细胞(HBMECs)设为NC组;采用ox-LDL处理的HBMECs分为ox-LDL组、LYC组(0.5μmol/L的LYC处理HBMECs)、溶血磷脂酸(LPA)组(5μmol/L RhoA/ROCK信号通路激活剂LPA处理HBMECs)、LYC+LPA组(0.5μmol/L的LYC以及5μmol/L LPA共同处理HBMECs);处理24 h后用于后续实验。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBMECs细胞因子水平;CCK-8法检测HBMECs增殖;流式细胞术检测HBMECs凋亡率;Western blot检测细胞血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)、平滑肌(SM)22α、BCL-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase-3)、RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果与NC组相比,ox-LDL组单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素(IL)-6、血管内皮细胞黏附分子1(VCAM-1)、HBMECs凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3、SM22α、RhoA、ROCK1蛋白水平升高,OD值、Bcl-2、CD31蛋白水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组相比,LYC组MCP-1、IL-6、VCAM-1、HBMECs凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3、SM22α、RhoA、ROCK1蛋白水平降低,OD值、Bcl-2、CD31蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),而LPA组趋势相反;LPA减弱了LYC对ox-LDL诱导的HBMECs凋亡的改善作用。结论LYC可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路来减轻HBMECs凋亡。

基于互联网平台的自我管理对维持性血液透析患者血管通路相关并发症的影响

目的探讨基于互联网平台的自我管理在维持性血液透析(MHD)患者中的应用效果。方法选择南方科技大学医院2021年1—12月收治的MHD患者为研究对象,对照组实施常规护理干预,观察组实施基于互联网平台的自我管理。比较两组患者血管通路相关并发症发生率、血肌酐水平、自我效能感、自我管理情况,生活质量及护理满意度。结果护理后观察组血管通路相关并发症发生率、血肌酐水平均低于对照组(P<0.05),血透患者自我管理量表得分、一般自我效能感量表得分、生活质量综合评定问卷得分及护理满意度均高于对照组(P<0.05)。结论基于互联网平台的自我管理能提升MHD患者的自我管理能力、自我效能感及护理满意度,降低血管通路相关并发症的发生率,改善肾功能指标水平与生活质量。